重要动物疫病监测样品采集技术规范DB4201／T 540-2018.pdf

ICS 65.020.01 B 41 武汉市地方标准 重要动物 疫病监测 样品采集 技术规范 2018-08-28 发布 2018-09-28 实施 武汉市 质量 技术监 督局 发 布 DB4201 DB4201/T 540-2018 DB4201/T 540-2018 I 前 言 本规范 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。本规范 附录A、附录B 为资 料性附录。本规范 由武 汉市 动物 疫病 预防控 制中 心提 出。本规范 由武 汉市 农业 委员 会归口。本规范 起草 单位：武 汉市 动物疫 病预 防控 制中 心、烟台出 入境 检验 检疫 局、蔡甸区动 物疫 病预防控制中 心。本规范 主要 起草 人：张 四化、尹伟 力、阮 征、刘开武、王雪、万云、赵静、吴 建英、陈橙、吴颢、杜娜、宫 时玉。本规范 首次 发布。DB4201/T 540-2018 1 重 要动物 疫病监测 样品采 集技术规 范 1 范围 本规范 规定 了重 要动 物疫 病监测 样品 采集 的一 般要 求，包括 采样 原则 和 要求、样品类 别和 数量、采样前准 备、样品 采集、采 样记录、样品 的包 装、样品 的 保存 和 运输 等。本规范 适 用于 本地 动 物防 疫机构 技术 人员 及养 殖企 业技术 人员 开展 相关 采样 工作。2 规范性 引用 文件 下 列 文件 对于 本文 件的 应用 是 必不 可少 的。凡是 注日 期 的引 用文 件，仅所 注日 期 的版 本适 用于本文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。NY/T541 兽医 诊断 样品 采 集、保 存与 运输 技术 规范 NY/T 3075 畜禽 养殖 场消毒 技 术 中华人 民共 和国 农业 部农 医发2017年第25 号 病死 及病害 动物 无害 化处 理技 术规范 中华人 民共 和国 农业 部公 告第503 号 高 致病 性动 物 病原微 生物 菌（毒）种或 者样本 运输 包装 规范 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 重要动物 疫病 被本地 政府 列入 强制 免疫 范围的 动物 疫病，或 需进 行优先 防治 的动物 疫病、人 畜 共患 病及 其他对畜禽生产 影响 较大 被列 入本 地监测 计划 的动 物疫 病。3.2 监测 采用规 定的 标准 和方 法，持 续 对特 定群 体中 疫病 的 发 生、流行、分布 及相 关因素 进 行观 察与 检测 的过程。3.3 样品 取自动 物及其 产品 或环 境，拟 通过 相关 检测 反 映动 物个体、群 体或 环境 有关 状况的 材料 或物 品。3.4 采样 按照规 定的 程序 和要 求从 动物及其 产品 或环 境取 得样 品的过 程。3.5 DB4201/T 540-2018 2 无菌操 作 用于防 止微 生物 进入 样品 或其它 无 菌范 围的 操作 技术。4 采样原 则和 要求 4.1 采样人 员必 须是 兽医 技术 人员，具备 动物 传染 病相 关知识，熟练 掌握 各种 采样 技 术。4.2 个人安 全防 护和 消毒 隔离 按照 NY/T 3075 的要 求执 行。4.3 凡发现 动物 有急 性死 亡，在排除 炭疽 后方可 剖检、取 样。4.4 解剖时 先胸 腔后 腹腔，先 取实质 性器 官，后取 肠道 等易污 染的 组织 器官 及内 容物。4.5 病死动 物要 在隔 离区（下 铺塑料 布）或实验 室剖 检、取样，剖 检后 的动 物尸 体、废 弃 物等 要按 病死及病 害动 物无 害化 处理 技术规 范 进行 无害 化处 理。5 样品类别 和数 量 5.1 样品类别 5.1.1 抗体 监测 样品 包括全血、血清、禽 蛋等；5.1.2 病原 监测 样品 包括分泌 物、组织、粪 便、精液、皮肤 样品 等。5.2 样品数量 根据本地 监 测计 划，结合 养殖场（户）实际 情况，确定监 测的 具体 比例 和数 量。可 参考 场群 内 个体抗体 监测 抽样 数量 表 和场 群内 个体 病原 学监 测抽样 数量 表（见 附录B.1 和 附录B.2）。6 采样前准 备 6.1 采样用品 6.1.1 血液采 集用 品 一次性 注射 器、镊 子、碘酊、75%酒精 棉、干棉 球、采血针、采 血管、保 定动 物专用 工具 等。6.1.2 禽蛋采 集用 品 格状专 用盛 蛋盘 等。6.1.3 拭子采 集用 品 无菌棉 拭子、剪 刀等。6.1.4 组织采 集用 品 解剖刀、剪 刀、镊子、扁 桃体采 样器、灭 菌牙 签、酒精灯 等。6.1.5 其他采 集用 品 金属探 杯（采集 牛羊O-P 液）、塑 料桶、全 棉绳（采 集猪口 腔液）等。6.2 存放用 品 DB4201/T 540-2018 3 塑料离 心管（2 mL、10 mL、15 mL、50 mL）、玻 璃容器、自封 袋、试管 架、离 心管存 放盒、铝盒、封口膜、冷冻 剂、防震 材料、采样 箱、保温 箱、胶 布等。6.3 防护用 品 口罩、一 次性PE 手套 或乳 胶手套、防 护服、防 护帽、防护 眼镜、胶 靴、消 毒液 等。6.4 样品保 存液 6.4.2 根 据所 采样 品的 种 类和要 求，准备 不同 类型 并分装 成适 量的 保存 液。6.4.3 pH 7.4 磷 酸盐 缓 冲液（PBS，配制 方法 见附录 A.1）6.4.4 pH 7.4 甘油PBS（配 制 方法 见附录 A.2）6.4.5 棉拭 子保 存液（配制 方 法见 附录 A.3）6.4.6 粪便 保存 液（配制方 法 见附录 A.4）6.4.7 30 甘油 PBS（配制 方 法见 附录 A.5）6.4.8 50 甘油 PBS（配制 方 法见 附录 A.6）6.5 记录用 品 不干胶 标签、签 字笔、圆 珠笔、油性 记号 笔、采 样 登记表 和样 品编 号表（见 附录B.3、附录B.4、附录B.5）等。7 样品采 集技术 7.1 血液 7.1.1 采血部 位 7.1.1.1 应根 据动 物种 类 确定采 血部 位，不同 动物 的采 血部 位见 附录 B.6。7.1.1.2 采 血部 位的 皮肤应先 剃毛（拔 毛）、清 洁，用 1 2 碘酊 消毒 后，再 用 75 酒精 棉球 由内向外螺 旋式 脱碘 消毒，干 燥后穿 刺采血。7.1.2 采血方 法 7.1.2.1 猪前腔 静脉 采血 仔猪或 中等 大小 的猪 适用前 腔 静脉 采血，参 照NY/T 541中6.1.2.2规定 执行。7.1.2.2 猪耳缘 静脉 采血 体型较 大的 猪适 用耳 缘静 脉采血，参照NY/T 541中6.1.2.1 规 定执 行。7.1.2.3 牛尾静 脉采 血 牛尾静 脉位 于牛 尾腹 侧面 的中心 线皮 下位 置，采 血时将 牛 尾上 提，在离 尾根10 cm 左右 中点 凹陷 处，将注射 器针 头垂 直刺 入约1 cm，见有 血液 回流 时，把 注射器 活塞 向外 拉使 血液 流入针 筒。7.1.2.4 牛、羊、马 颈 静脉 采血 DB4201/T 540-2018 4 颈静脉 位于 颈部 侧面 颈静 脉沟内，采血 时将 牲畜 保定，手指 压迫 颈静 脉近 心端，使 血管 怒 张，针头与皮肤 呈45 角由 下向 上刺 入血管，见 有血 液回 流时，把注 射器 活塞 向外 拉使 血液流 入针 筒。7.1.2.5 禽翅静脉 采血 禽侧卧 保定 后，将 禽翅 翻开，暴露 翅 静 脉，拇指 按压 翅静脉 近心 端，使之 怒张，针头 由近 心端向远心端方 向平 行刺 入静 脉，放松对 近心 端的 按压，缓 慢抽取 血液。7.1.2.6 禽心脏 采血 参照NY/T 541中6.1.2.6 规定 执 行。7.1.3 血样的 处理 7.1.3.1 全血 将采集 的全 血立 刻注 入装 有抗凝 剂的 试管 中，轻 轻摇 动，充分 混匀。血液 抗凝 可 选用以 下四 种 方 法：a)5 mL 全血 加入0.1 mL10 乙二胺 四乙 酸二 钠溶液。b)5 mL 全血 加入 0.5 mL 3.8枸椽 酸钠（柠 檬酸 钠）溶液。c)5 mL 全血 加入 0.1 mL 1 肝素钠 溶液。d)使用市 售商 品抗 凝管。7.1.3.2 血清 7.1.3.2.1 将 采 集的 全血在室温 下（20 25）倾 斜 30 角放置2 小时 4 小时，待全 血凝 固并 析出血清后，将 血清 注入 无菌 离心管，离心 后取 上清 液备 用。7.1.3.2.2 采集 动物 血样时，注射 器或采 血管 应 保留 1/2 或 1/3 的空 气，以便 析 出血 清。7.2 禽蛋 7.2.1 采集方 法 随机采 集规 模化 禽场、养 禽专业 户、散养 农户 的不 同养殖 单元 的禽 蛋，禽蛋 要求无 破损，置 于 洁净卫生的 格状 专用 盛蛋 盘中。7.2.2 卵黄抗 体的提 取 提取卵 黄液，将 卵黄 液、生理 盐 水、氯 仿按1:1:2 比例 混匀后 静置30分钟，3 000r/min离心20 分 钟，取上层 清液 备用（氯 仿体 积不计，待 检样 品按 被稀 释2 倍计 算）。7.3 拭子 7.3.1 禽咽喉-泄殖 腔双 拭子 将一个棉 拭子 插入 喉头 口及 上 颚裂 处来 回刮3 次5 次取 咽喉 分泌 液，将另 一 个棉拭 子插入 泄殖 腔约1.5 cm 2 cm，旋转2圈 3圈 取 泄殖 腔内 容物，将两个拭 子的 样 品端 插入 同 一个含1 mL棉拭 子保 存液（配制 方法 见附 录A.3，下同）的离 心管 中，剪下 或折 断 尾部，盖上 管盖 并做好 标 记。7.3.2 禽环境 拭子 7.3.2.1 禽内环 境拭 子 DB4201/T 540-2018 5 用棉拭 子擦 拭笼 具表 面、笼具周 围、垫料、饲 槽、饮水、粪便 等禽 舍内 环境 部位，分别 置于 含1 mL棉拭子 保存 液的离 心管 中，剪下 或折 断尾部，也可 用 多个拭 子充 分擦 拭后 置于 一个离 心管 中，盖上 管盖并做好 标记。7.3.2.2 禽外环 境拭 子 用棉拭 子擦拭 禽 舍外 的地 面、出 入道路、污 水、运 送工具 等处，置于 含1 mL 棉拭子 保存 液的 离心 管中，剪下 或折 断尾 部，盖上 管 盖并 做好 标记。7.3.3 羊口鼻 拭子 用棉 拭子 刮取 羊口 腔黏 膜分 泌 物，取另一 个棉 拭子 插入羊 鼻腔 约23 cm，旋转后 沾 上分 泌物，将 拭子样 品端 一并 置于 含有1 mL 棉 拭子 保存 液的 离心 管中，剪 下或 折断 尾部，盖上 管盖并 做好 标记。7.4 分泌物 7.4.1 牛、羊 食道-咽部 分泌 物（O-P 液）7.4.1.1 采样 前禁 食12 小时，适 量饮水，避 免采样 时胃内 容物反 流污 染O-P 液。采样 前将O-P液探杯 置于23的 氢氧 化钠溶 液浸泡5 分钟 消毒，再用清水 冲 洗后使 用。每采 完一头 动 物，探 杯要 重复 消毒并充分 清洗。7.4.1.2 采样 时，动物 站 立保定，将 探杯 随吞 咽动 作送入 食道 上部10 cm 15 cm 处，轻轻 来回 抽动 2次3 次，再 将探 杯拉出，采集2 mL5 mL O-P 液，倒入 含有等 量pH 7.4 甘油PBS的离 心管 中，盖 上管盖并做 好标 记。7.4.2 猪口腔 液 将直径1.3 cm 的全 棉绳用 于保育 猪、直 径1.6 cm的 绳子用 于生长 育肥 猪和生 产公母 猪口腔 液采 集。全 棉 绳上 端固 定在 猪圈 栏杆 上，下垂 高度 与猪 只的肩 关 节齐 平，悬 挂处 应远离 饲 槽和 猪排 便区，任猪咀嚼，30 分钟 后收 取棉 绳，刮取和 挤压 口腔 液至 灭菌 自封袋 内，然 后 将自 封袋 内液体 转入 离 心管，盖上管盖并做 好标 记。每份 样品1 mL 以上 为有 效采 集量。7.5 组织 7.5.1 扁桃体 7.5.1.1 从 活体 采集 扁桃体 样 品时，应 使用 专用 扁桃 体 采集 器。7.5.1.2 采 样前 将 采 样器置于2 3 的 氢氧 化钠溶 液浸泡 5 分钟 消毒，再 用清水 冲洗 后使用。每采完一头 动物，采 样器 要重 复消毒 并充 分清 洗。7.5.1.3 采样 时，用保 定 绳将猪 只固 定，再用 开口 器撬开 猪嘴，顶 住上 额、压住舌 头，卡住 下巴，看到突起 的扁 桃体 后，迅速 进枪，顶住 腭扁 桃体（切 忌滑动 或搅 动，以免 创口 过大），迅速 扣动 扳机，拉出刀杆，用 灭菌 牙签 将 样品 从 刀槽 中挑 至灭 菌离 心管 中，盖 上管 盖并 做好 标记。7.5.2 脏器组 织 7.5.2.1 根据 疑似 病种 选 择优先 采集 的脏 器组 织，采 集有病 变的 部分，或 采 集病变 和 健康 组织 交界 处。动物主 要疫 病病 原监 测采样 部 位见 附录 B.7。7.5.2.2 用 消毒 的器 械切取 所 需脏 器组 织块，每 取一 份组 织块，应 用火 焰消 毒剪刀 镊子 等采 样器 械，防止组 织间 相互 污染，采 集的组 织块 分别 放入 灭菌 的容器或 自封 袋内。DB4201/T 540-2018 6 7.6 粪便 7.6.1 一般动 物粪 便 7.6.1.1 少量 采集 时，以 灭菌的 棉拭子 从直 肠深处 或泄殖 腔黏膜 上蘸 取粪便，立即 置于含1 mL 粪 便保存液（配 制方 法见 附录A.4，下同）的离 心管 中，盖上 管 盖并 做好 标记。7.6.1.2 多 量采 集时，可 将动物 肛门周 围消 毒后，用器械 或戴上 手套 的手伸 入直肠 内取粪 便，也可 用压舌板 插入 直肠，轻 轻用 力下压，刺 激排 粪，收集 粪便，装入 灭菌 容器 内，封口标记。7.6.2 野生动 物粪 便 野生或 珍稀 动物 采集 新鲜 粪便样 品，每份 样品1 g2 g，置于 内含1 mL粪 便保 存液的 离心 管中，盖上管盖 并做 好标 记。7.7 精液 消毒液 洗 净阴 茎，用 假阴道 挤 压阴 茎或 人工 刺激 的方 法 采取 精液。将集 精杯从 假 阴道 上 取下，装入灭菌容 器中，封口 标记，样品中 不得 加入 防腐 剂。7.8 皮肤样 品 用消毒 的剪刀 剪下1 g2 g动物的 病 变皮 肤 如新 鲜的水 泡皮、结节、痂 皮等，加入含1 mL 50 甘油PBS 的 离心 管中，封 口标记。8 采样记录 8.1 样品编 号 在 离 心管 管盖 或管 壁、自封 袋 上用 记号 笔做 好标 记，或用 签字 笔填 写标 签贴在 样 品包 装上，同一 动物种类 的样 品，从“1”开始 顺 序编 号，在数 字前 加上 不 同动 物种 类代 码：猪“Z”，牛“N”，羊“Y”，鸡“J”，鸭“A”，其 他“Q”。8.2 采样登记 采样登 记表 信息 应包括 采样 地 址、被采 样场（户）名、场 点类 型、联系 人、电话、动物 种类、样 品类别、养殖 规模、采样 数量、编 号、品 种、日 龄、群 体 数量、免疫 信息、发病 情 况等。采样 登记表应用签字笔 逐项 填写（一 式二 份），填 写的 信息 应准 确、完整，字迹 清晰、工 整。将采 样登记 表和 病史 资料装在自封 袋中，一份 随样 品送实 验室，另 一份 留存 备案。各类 监测 采样 登记 表、样 品编 号表 见附 录B.3、附录B.4、附录B.5。9 样品的 包装 9.1 装载样 品的 容器 必须 完整 无损，密封 不漏 液。用前 清洁干 净，必要 时经高 温干热、紫 外线 照射 或高压蒸汽 灭菌 后使 用。9.2 根据样 品性质 及 检验 目的 选择不 同的 容器，容 器装 量不可 过多，液 态样 品不 可超过 容量 的80%，以防冻 结时 容器 破裂。9.3 自封袋 外粘 贴标 签，注明 采样场 点、样品 名称 和数量、采样 日期 等，并 将 各个样 品 放到 自封袋中。9.4 装载样 品的 小塑 料离 心管 应放在 规定 的离 心管 盒内，装载血 液的 注射 器和玻 璃容 器 应用 铝盒 盛放，盒内加 填防 震材 料避 免样 品晃动。DB4201/T 540-2018 7 9.5 自封袋、塑料 盒及 铝盒 外 应贴封 条，封条 上应 有采 样人签 章，并注 明贴 封日 期，标 注放 置方 向。9.6 对疑似 高致 病性 动物 疫病 的样品 包装 参考 高 致病 性动物 病原 微生 物菌（毒）种或 者样 本运 输包装规范。10 样品的 保存 和运 输 10.1 根据 样品 性质 及 检验 目的 确定保 存方 法，不同 样品 的保存 方法 见附 录B.8。10.2 样品采 集、处理 后，应 于24 小时 内送 抵实 验室 进行 检测，运送 时 维持 样品 环境 处于 2 8 低温状态；24 小时 内不 能送检 的，根据 不同 检验 要求，按所 需温 度分 类保存 于冰 箱 或 冰柜。10.3 未完成 血清 分离 的全 血样 品，待 血清 析出 后 方能 运输，途中 严禁 振荡，以免 溶血。10.4 样品密 封后 置于 保温 箱中 运送，内 置适 当冷 冻剂 和 防震材 料。10.5 样品运 送应 符合 生物 安全 要求，外包 装上 加贴 生物 安全警 示标 志，运 送高 致病 性 病原 微生物样品应按照 高 致病 性动 物病 原微生 物菌（毒）种 或者 样本运 输包 装规 范 的规 定执行。DB4201/T 540-2018 8 附 录 A（资料 性附 录）样品保 存液 的配 制 A.1 pH7.4 磷 酸盐 缓冲 液（PBS）氯化钠（NaCl）8.0g 氯化钾（KCl）0.2g 磷酸氢 二钠（Na2HPO412H2O）2.9g 磷酸二 氢钾（KH2PO4）0.2g 蒸馏水（或 无离 子水）加至1000 mL，充 分溶 解 A.2 pH7.4 甘油PBS 在pH 7.4 PBS（A.1）中加 入甘油（丙三醇），体积 比例为10 20，调pH 值至7.4，103.4Kpa高压灭 菌20 分钟，冷 却后4 保 存备 用。A.3 棉拭子 保存 液 取pH 7.4甘油 PBS（A.1），加入 青霉 素（2 000 U/mL）、链霉 素（2 mg/mL）、丁胺 卡那 霉素（1 000 U/mL）、制 霉菌素（1 000 U/mL），加 入 抗生素 后应调pH至7.4，采样 前 分装 离 心管，每 管 加1.0 mL，冷 冻保 存。A.4 粪便保 存液 配制方 法同A.3，但 抗生 素 浓度应 提高5 倍。加 入抗 生 素后应 调pH至7.4。采样 前 分装离 心管，每管加1.0 mL，冷 冻保 存。A.5 30%甘油PBS 在pH 7.4 PBS（A.1）中 加 入甘油（丙三 醇），体积 比例为30，调pH 值至7.4，103.4 Kpa 高 压灭菌20分钟，冷 却后4 保存备 用。A.6 50%甘油PBS 在pH 7.4 PBS（A.1）中 加 入甘油（丙 三醇），体积 比例为50，调pH值至7.4，103.4Kpa 高压 灭菌20分钟，冷 却后4 保 存备用。DB4201/T 540-2018 9 附 录 B（资料 性附 录）场群内 个体 抗体 监测 抽样 数量表 表B.1、表B.2、表B.3、表B.4、表B.5、表B.6、表B.7、表B.8 分别 给出 了场群 内个体 抗体 监测 抽样数量表、场 群内 个体 病原学 监 测抽 样数 量表、武 汉 市动物 疫病 抗体 监测 采样 登记表、武 汉市 动物 疫病病原监测 采样 登记 表、样品 编号表、不同 动物 的采 血部 位、动物 主要 疫病 病原 监测采 样部 位、不同样品的保存方 法。B.1 场群内 个体 抗体 监测 抽样 数量表 场/群 存栏数（头只）抽 样数量（头/只）可 接受误差 5%6%7%8%9%10%50 37 33 30 26 24 21 100 59 49 42 36 30 26 150 72 59 48 40 34 29 200 82 65 53 43 36 30 250 90 70 56 45 37 31 300 95 73 58 46 38 32 350 100 76 59 47 39 32 400 103 78 60 48 39 32 450 106 80 61 49 39 33 500 109 81 62 49 40 33 550 111 82 63 50 40 33 600 113 83 64 50 40 33 650 115 84 64 50 41 33 700 116 85 65 51 41 33 750 117 86 65 51 41 34 800 118 86 65 51 41 34 850 119 87 66 51 41 34 900 120 87 66 51 41 34 950 121 88 66 52 41 34 1000 122 88 66 52 41 34 1100 123 89 67 52 42 34 1200 125 89 67 52 42 34 1300 125 90 67 52 42 34 1400 126 90 68 53 42 34 1500 127 91 68 53 42 34 1600 128 91 68 53 42 34 1700 128 91 68 53 42 34 1800 129 92 68 53 42 34 1900 129 92 69 53 42 34 2000 130 92 69 53 42 34 注：预期抗体合格率90%，95%置信 水平，不同可接受误差条件下、不同规模抽样数量。DB4201/T 540-2018 10 B.2 场群内 个体 病原 学监 测抽 样数量 表 场/群 存栏数（头只）抽 样数量（头/只）可 接受误差 1%2%3%4%5%50 49 46 41 35 30 100 95 83 67 54 43 150 139 113 87 65 50 200 181 140 101 73 54 250 220 162 112 79 57 300 258 181 121 83 59 350 294 199 129 87 61 400 329 214 135 89 62 450 361 227 140 91 63 500 393 239 145 93 64 550 423 250 149 95 65 600 452 260 152 96 66 650 480 269 155 98 66 700 506 277 158 99 67 750 532 284 160 99 67 800 557 291 162 100 67 850 580 297 164 101 68 900 603 303 166 102 68 950 625 309 168 102 68 1000 646 314 169 103 69 1100 687 323 172 104 69 1200 724 331 174 105 69 1300 760 338 176 105 70 1400 793 345 178 106 70 1500 824 350 179 106 70 1600 853 355 180 107 70 1700 881 360 182 107 70 1800 907 364 183 108 71 1900 931 368 184 108 71 2000 955 372 185 108 71 注：预期病原学阳性率5%，95%置信 水平、100%试验敏感性条件下，不同可接受误差条件下、不同规模抽样数量。DB4201/T 540-2018 11 B.3 武汉市 动物 疫病 抗体 监测 采样登 记表 采样单位：采样人：联系 电话：采样日期：采样地址 区 乡（镇）村 采样时间 被采样场/户名 联系人 联系电话 场点类型 种畜禽场 商品代养殖场户 屠宰场 批发/交易市场 散养户 其他 动物种类 猪 牛 羊 鸡 鸭 鹅 鸽 其他 样品类别 血清 全血 蛋样 其他 养殖数量 采样数量 样品编号 样品信息 序号 样品编号（起止）品种 日龄 群体数量 样品类别 动物来源 备注 免疫情况 疫苗 疫苗类型及亚型 厂家及批号 免疫次数 最后一次免疫时间 猪*猪瘟*蓝耳病*O 型口蹄疫 A 型口蹄疫 其它苗 牛*口蹄疫 羊*口蹄疫*小反刍兽疫 禽*禽流感*新城疫 其它疫苗 包括群体数量、品种、发病数量、死亡数量、临床变化、剖检变化、动物既往病史等情况（可附页）发病情况（健康监测不填）DB4201/T 540-2018 12 B.4 武汉市 动物 疫病 病原 监测 采样登 记表 采样单位：采样时间：采样人：被采样单位签字：采样场点及户名 动物种类 样品类别 样品编号 数量 群体大小 动物状态 联系人 联系电话 备注 注：1、样品类别为禽双拭子、环境 样、野鸟粪、扁桃体、淋巴结、口腔液、O-P 液、口鼻拭子等；2、采样场点及户名：写明具 体的交易市场/规模场（村）/栖息地/生猪屠宰场名称；动物种类：猪/牛/羊/鸡/鸭/鹅/鸽/野鸟等；3、来源地：交易市场和屠宰场需要写明动物来源地（市内来源要占样品总量的50%以 上）；4、备注中填写样品 详细来源地。DB4201/T 540-2018 13 B.5 样品编 号表 采样场点及户名：采样 人：联系电话：采 样时 间：序号 原 始编号 序号 原 始编号 序号 原 始编号 序号 原 始编号 注：序号为采样管上标注号；原始编号为动物号。DB4201/T 540-2018 14 B.6 不同动 物的 采血 部位 动 物种类 采 血部位 猪 前腔静脉、耳缘静脉 牛 尾静脉、颈静脉 羊 颈静脉 马 颈静脉 禽 翅静脉、心脏 DB4201/T 540-2018 15 B.7 动物主 要疫 病病 原监 测采 样部位 疫 病名称 样 品采集部 位 禽流感 活禽采集咽喉和 泄殖腔双拭 子，幼禽、珍禽或 野禽采集新鲜粪便，死亡禽采集肠管及肠内容物、肺、气管、肝、脾、肾、脑等 新城疫 口蹄疫 牛羊采集食道-咽部分 泌物，猪 活体采口腔液，发病动 物采集未破裂的舌面 或蹄部、鼻 镜、乳头等部位的 水泡皮和水泡液，屠宰场或死亡动物采集淋巴结、脊髓、肌肉等 猪瘟 急性病例首选扁 桃体，慢性 病 例选择直肠末端、脾、肾、淋巴结和回盲口等 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 病猪或疑似病猪 采集扁桃体、肺、淋巴结、脾 等，新鲜死胎、弱仔以及哺乳仔猪应加采血液、胸腔积液等 猪伪狂犬病 病死或扑杀猪采 集大脑和三 叉 神经节、扁桃体、肺等，待检活猪采集鼻拭子，公猪可加采新鲜精液 猪圆环病毒病 淋巴结、脾、肺、肾等 小反刍兽疫 活体采集口鼻拭 子，病死或 扑 杀畜采集肠系膜 和支气管淋巴结、脾、胸腺、肠粘膜和肺等 牛羊布鲁氏菌病 活体采集血清、新鲜全乳等 牛结核分枝杆菌病 活体采集血清样 品，疑似病 例 采集下颌、咽后、支气管、肺（特别是肺门及肺门淋巴结）、纵膈及肠系膜的淋巴结，呼吸道、乳房、泌尿生殖道、肠结核疑似病例，可采集痰、乳、精液、子宫分泌物、尿、粪便等 DB4201/T 540-2018 16 B.8 不同样 品的 保存 方法 样 品类型 短 期保存 长 期保存 血清 4 保存-20以下冻存 全血 4 保存 禽蛋 4 保存 拭子 4 保存-20以下冻存 分泌物 4 保存-20以下冻存 组织-20以下冻存 粪便-20以下冻存 精液 4 保存-20以下冻存 皮肤样品-20以下冻存 供细菌检验的样品 30%甘油PBS（附录A.5）4 保存 供病毒检验的样品 50%甘油PBS（附录A.6）0 以下 冻存 A _