大球盖菇菌种生产及林地栽培技术规程DB2327／T 048-2022.pdf

I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 0 5黑 龙 江 省 大 兴 安 岭 地 方 标 准DB2327D B 2 3 2 7/T 0 4 8-2 0 2 2大 球 盖 菇 菌 种 生 产 及 林 地 栽 培 技 术 规 程2 0 2 2-0 5-2 7 发 布 2 0 2 2-0 7-0 1 实 施大 兴 安 岭 地 区 行 政 公 署 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 2I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规定 起 草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 大 兴 安 岭 林 业 集 团 公 司 绿 色 产 业 发 展 处 提 出。本 文 件 起 草 单 位：黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 畜 牧 研 究 所、松 岭 区 延 军 食 用 菌 协 会。本 文 件 主 要 起 草 人：倪 淑 君、吴 延 军、何 树 友、高 传 宇、张 海 峰、刘 凯。D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 2大 球 盖 菇 菌 种 生 产 及 林 地 栽 培 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 大 球 盖 菇 菌 种 生 产 中 的 术 语 和 定 义、各 级 菌 种 生 产 技 术 规 程 和 菌 种 质 量 标 准；规定 了 大 球 盖 菇 林 地 生 产 的 场 地 选 择、栽 培 模 式、种 植 管 理 和 采 收。本 文 件 适 用 于 大 兴 安 岭 地 区 大 球 盖 菇 菌 种 生 产 及 林 地 栽 培。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用 文件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。G B/T 4 7 8 9.2 8 食 品 安 全 国 家 标 准、食 品 微 生 物 学 检 验、培 养 基 和 试 剂 的 质 量 要 求G B/T 5 0 0 9.6 0 食 品 包 装 用 聚 乙 烯、聚 苯 乙 烯、聚 丙 烯 成 型 品 卫 生 标 准 的 分 析 方 法G B/T 1 2 7 2 8 食 用 菌 术 语N Y/T 5 2 8 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程3 术 语 和 定 义G B/T 1 2 7 2 8、N Y/T 5 2 8 界 定 的 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。为 了 便 于 使 用，以 下 重 复 列 出 了 一 些术 语 和 定 义。3.1 母 种经 各 种 方 法 选 育 得 到 的 具 有 结 实 性 的 菌 丝 体 纯 培 养 物 及 其 继 代 培 养 物，也 称 一 级 种、试管 种。3.2 原 种由 母 种 扩 繁 培 养 而 成 的 菌 丝 体 纯 培 养 物，也 称 二 级 种。3.3 栽 培 种由 原 种 扩 繁 培 养 而 成 的 菌 丝 体 纯 培 养 物。栽 培 种 只 能 用 于 栽 培，不 可 再 次 扩 大 繁 殖 菌 种，也 称 三 级 种。3.4 培 养 基各 级 菌 种 菌 丝 生 长 所 需 营 养 物 质 的 液 体 或 固 体 混 合 物。3.5 扩 繁将 菌 种 从 一 种 培 养 物 移 接 到 另 外 的 培 养 物 中 扩 大 培 养 的 过 程。3.6 接 种将 菌 种 移 接 在 培 养 基 物 中 的 方 法。3.7 森 林 郁 密 度D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 2即 林 地 树 冠 垂 直 投 影 面 积 与 林 地 面 积 之 比，以 十 分 数 表 示。3.8 种 菇组 织 分 离 制 作 母 种 所 用 的 大 球 盖 菇 子 实 体。4 菌 种 生 产4.1 母 种 生 产4.1.1 母 种 生 产 流 程母 种 的 生 产 流 程：培 养 基 配 制 培 养 基 灭 菌 组 织 分 离 培 养 转 管 纯 化 培 养 母 种。4.1.2 培 养 基 配 置制 作 菌 种 所 用 的 培 养 基 和 试 剂 质 量 应 符 合 G B/T 4 7 8 9.2 8 要 求。母 种 培 养 基 参 考 配 方 有：a)麦 芽 糖 酵 母 琼 脂 培 养 基(M Y A)大 豆 蛋 白 胨(豆 胨)1 g、酵 母 2 g、麦 芽 糖 2 0 g、琼 脂 2 0 g，加 水至 1 0 0 0 m l；b)马 铃 薯 葡 萄 糖 酵 母 琼 脂 培 养 基(P D Y A)马 铃 薯 3 0 0 g(加 水 1 5 0 0 m l，煮 2 0 分 钟，用 滤 汁)、酵 母 2 g、豆 胨 1 g、葡 萄 糖 1 0 g、琼 脂 2 0 g，加 水 至 1 0 0 0 m l；c)燕 麦 粉 麦 芽 糖 酵 母琼 脂 培 养 基(D M Y A)燕 麦 粉 8 0 g、麦 芽 糖 1 0 g、酵 母 2 g、琼 脂 2 0 g，加 水 至 1 0 0 0 m l。上 述 3 种 配 方 中 如 不 加 琼 脂，即 可 作 为 液 体 培 养 基。以 上 培 养 基 需 按 常 规 配 制、分 装、灭 菌、接 种 和 培 养。4.1.3 容 器使 用 玻 璃 试 管、棉 塞 或 硅 胶 塞。试 管 以 1 8 m m 1 8 0 m m 或 2 0 m m 2 0 0 m m 规 格 为 宜，棉 塞 要使 用 梳 棉，硅 胶 塞 要 使 用 透 气 硅 胶 塞。4.1.4 灭 菌采 用 高 压 灭 菌，压 力 0.1 1 M p a 0.1 2 M p a，温 度 1 2 1，灭 菌 3 0 m i n。4.1.5 组 织 分 离可 以 采 用 组 织 分 离 法 获 得 母 种。在 超 净 工 作 台 内，同 时 放 入 0.1%氯 化 汞、无 菌 水、P D A斜 面 和 解 剖 刀 等 工 具。选 择 当 年 人 工 栽 培 的 优 质 子 实 体 进 行 组 织 分 离。标 准 为 外 形 均 匀、菌 柄洁 白、子 实 体 健 壮。将 种 菇 用 清 水 洗 净，酒 精 擦 拭 表 面，刮 取 种 菇 菌 柄 和 菌 盖 交 界 处 的 内 在 组织，接 入 平 皿 或 试 管 斜 面 内，放 入 2 3 2 6 恒 温 培 养 箱 培 养。待 菌 丝 萌 发 长 至 近 1 c m 时，挑 取 菌 丝 纯 化、镜 检。4.1.6 扩 大 培 养选 择 菌 丝 健 壮、生 长 旺 盛、无 老 化、无 感 染 杂 菌 的 母 种 试 管，在 接 种 箱 或 超 净 工 作 台 内，用 接 种 钩 挑 取 母 种 培 养 基 上 菌 丝 立 即 接 入 到 另 一 支 试 管 培 养 基 中 央，塞 紧 棉 塞。接 种 完 毕 后，将 试 管 放 于 1 9 2 3 恒 温 箱 内 培 养。每 支 母 种 试 管 可 扩 大 繁 殖 1 0 0 支 1 5 0 支 新 管。4.1.7 保 存将 已 长 满 白 色 菌 丝 的 试 管，放 入 1 4 冰 箱 中 保 存。4.1.8 活 化 再 用保 存 的 菌 种 在 使 用 前，需 先 将 菌 种 置 于 适 温 下，让 其 活 化，然 后 及 时 使 用 转 管，否 则 不D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 2易 成 活。4.2 原 种 生 产4.2.1 基 质 配 方基 质 参 考 配 方 有，a)小 麦 或 大 麦 8 8、米 糠 或 麦 麸 1 0%、石 膏 或 碳 酸 钙 1%、生 石 灰 1%、含 水 量 6 5%；b）小 麦 2 5、稻 草 6 4，麦 麸 1 0、石 膏 粉 1%、含 水 量 6 5 7 0；c)杂木 屑 8 3%、米 糠 或 麦 麸 1 5%、石 膏 或 碳 酸 钙 1%、生 石 灰 1%，含 水 量 7 0%。4.2.2 培 养 袋采 用 规 格 为 1 6.0 c m 3 3.0 c m 的 折 角 标 准 优 质 薄 聚 乙 烯 袋，质 量 标 准 符 合 G B/T 5 0 0 9.6 0要 求。4.2.3 装 料 和 灭 菌装 料 要 实，松 紧 适 度，上 下 均 匀 一 致，四 周 无 空 隙，料 面 压 实。袋 口 无 空 隙，松 紧、高度 适 当。采 用 高 压 灭 菌 1 2 3（0.1 2 M p a），1.5 h 2.0 h；常 压 灭 菌 时，在 3 h 之 内 使 灭 菌 锅 温 度达 到 1 0 0，保 持 1 0 0 8 h 9 h。4.2.4 冷 却搬 进 冷 却 室 内，温 度 降 至 2 4 以 下 备 用。4.2.5 接 种使 用 接 种 箱、超 净 工 作 台 等 配 合 酒 精 灯 在 无 菌 室 中 进 行 无 菌 操 作。将 母 种 接 种 到 原 种 培养，每 支 试 管 接 种 原 种 4 袋 6 袋。4.2.6 培 养将 接 种 后 的 菌 袋 立 即 放 入 温 度 控 制 在 1 7 2 1、相 对 湿 度 5 0%5 5%的 培 养 室 内 培 养。培 养 7 d 1 2 d 后 检 查 有 无 杂 菌 并 及 时 剔 除，在 整 个 培 养 过 程 中 检 查 2 次 3 次，直 到 菌 丝 长到 袋 底，备 用。4.2.7 保 存放 入 8 1 0 储 存 室 内，在 卫 生、干 燥、无 光 环 境 下 保 存。4.3 栽 培 种 生 产4.3.1 常 用 配 方可 根 据 当 地 资 源 条 件 配 比 选 用，原 料 要 求 粉 碎，木 屑 要 发 酵 3 个 月 以 上。常 用 参 考 配 方有，a)玉 米 芯 5 3%、玉 米 秸 秆 4 0%、麦 麸 5%、生 石 灰 1%、石 膏 1%；b）玉 米 芯 5 3%、干 牛 粪2 5%、木 屑 1 0%、麦 草 或 玉 米 秸 1 0%，生 石 灰 1%，石 膏 1%。4.3.2 培 养 袋选 用 材 质 均 匀、袋 料 亲 和 力 好 的 折 角 标 准 优 质 薄 聚 乙 烯 袋，规 格 1 6.5 c m 3 5.0 c m、1 6.5 c m 3 7.0 c m 为 宜，菌 袋 质 量 标 准 符 合 G B/T 5 0 0 9.6 0 要 求。4.3.3 装 料 和 灭 菌D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 2操 作 要 求 同 4.2.3。4.3.4 接 种选 择 菌 丝 色 白、均 匀、生 长 有 力、无 杂 菌 的 原 种 作 为 接 种 材 料。每 个 栽 培 袋 接 种 原 种 2 5 g。4.3.5 培 养接 种 后,菌 袋 整 齐 排 放 在 干 燥 清 洁 的 培 养 室 内，温 度 一 般 控 制 在 1 7 2 1，空 气 相 对湿 度 5 0%。7 d 1 2 d 后 检 查 有 无 杂 菌，之 后 每 隔 1 5 d 检 查 一 次，直 至 菌 丝 长 到 袋 底，备 用。4.3.6 保 存长 满 菌 丝 的 菌 袋 放 置 在 8 1 0、卫 生 干 燥、无 光 条 件 下 保 存。4.4 菌 种 质 量 标 准4.4.1 母 种菌 丝 洁 白、均 匀、平 贴 培 养 基 生 长，菌 丝 边 缘 整 齐，无 杂 菌 菌 落，培 养 基 无 干 缩，有 菌 菇 清 香味。4.4.2 原 种菌 丝 长 满，生 长 健 壮，边 缘 整 齐，无 杂 菌。4.4.3 栽 培 种菌 丝 洁 白 健 壮，长 满 菌 袋，无 任 何 杂 菌 污 染。5 林 地 栽 培5.1 场 地 选 择野 外 种 植 场 地，选 择 在 针 叶 林、阔 叶 林、混 交 林 均 可，林 密 度 0.4 5 0.6 5。若 林 密 度 低 于 0.4时，需 要 穴 状 种 植 并 搭 配 林 下 经 济 作 物 种 植 以 达 到 遮 阴 保 湿 的 需 要。应 选 择 土 质 疏 松，通 透 性 强的 土 壤，p H 值 适 宜 范 围 为 在 5.5 7.0。5.2 栽 培 模 式5.2.1 种 植 时 间大 兴 安 岭 地 区 大 球 盖 菇 野 外 林 地 种 植 以 每 年 的 5、6 两 个 月 为 最 佳 种 植 期。5.2.2 菌 袋 处 理用 5%石 灰 水 溶 液 擦 洗 菌 袋 表 面，进 行 菌 袋 表 面 消 毒。5.2.3 种 植 方 式选 择 森 林 郁 密 度 在 5 0%5 5%的 林 地 进 行 种 植，下 挖 深 3 0 c m，4 0 c m 4 0 c m 的 栽 培 穴。大 球 盖 菇种 植 密 度 不 宜 过 高，应 合 理 控 制 菌 种 量，每 穴 2 4 袋 菌 种。以 栽 培 区 腐 殖 土 层 厚 度 作 为 依 据，确定 不 同 种 植 方 式。厚 度 低 于 2 0 c m，应 用 切 片 式 多 边 形 种 植；厚 度 在 2 0 c m 3 0 c m，可 采 用 横 向 分 半等 方 式 种 植；厚 度 在 3 0 c m 以 上 的，采 用 整 体 连 线 方 式 种 植。D B 2 3 2 7/T X X X 2 0 2 25.3 种 植 管 理在 菌 丝 生 长 阶 段，栽 培 料 上 应 覆 盖 3 5 c m 土 层，呈 龟 背 状。菌 丝 生 长 和 出 菇 阶 段 按 照 大 兴 安岭 林 区 土 壤、温 度、湿 度 条 件 自 然 生 长，如 遇 干 旱 天 气，需 要 及 时 人 工 遮 阴，保 持 土 壤 和 栽 培 料 湿度。一 般 在 4 5 d 左 右 出 菇，若 新 出 的 菇 体 伞 冒 出 现 裂 纹，应 及 时 补 给 水 分。5.4 采 收大 球 盖 菇 应 在 菇 菌 膜 没 破 裂、菌 盖 肥 厚 内 卷 呈 钟 形 时 采 收。采 收 应 在 晴 天 早 晨 露 水 未 干 时，或雨 后 晴 天 进 行。如 遇 到 连 雨 天，则 要 在 停 雨 时，突 击 采 收。采 收 时，根 据 菌 菇 的 成 熟 度 分 期 收 获，菇 长 5 c m 以 上 采 收，采 大 留 小，用 锋 利 刀 片 齐 菌 柄 根 部 割 下，同 时 要 注 意 避 免 把 菌 菇 根 处 的 培 养 料带 出，避 免 影 响 继 续 生 长。采 收 后 轻 轻 放 入 筐 内，按 大 小 分 级，在 低 温 阴 凉 处 存 放，尽 快 运 输。