观赏石斛杂交育种技术规程DB45／T 2382-2021.pdf

ICS 65S B 6 广 C 2021-02 0 6 2 西 壮 观 C ode of p-11-27 发 壮族观 赏 石 p ractice 发 布 广西 壮 族 自 石 斛 杂 for cr o 壮 族自治 区 自 治 杂 交 育 o ss bree d 区 市场监 督 区 育 种 技 d ing of o 督 管理局 地 D B 技 术 规 o rnament 发 布 4方 标 B 45/T 23 8 规 程 t al Dend r 2021-1 布 45 标准8 2 2021 r obiu m 1 2-25 实 准 实 施DB 45/T 2 38 2 20 21 II 1.前言本文件按照GB/T 1.12 0 20标准化工作导则 第1部分：标 准化文件的 结构和起草 规则的规 定 起草。本文件由广西壮族自治区林业局提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院。本文件主要 起草人：龚 建英、王华 新、汪小玉、潘文、覃 荣、龙定建、苏莉花、陈宝玲、唐 遒冥、石继清、孙利娜、唐庆、蒙芳、桂雪萍、吴玉华、李华娟、刘华。DB 45/T 2 38 2 20 21 1 观赏石斛杂交育种技术规程 1 范围 本文件规定 了观赏石斛（Den dr ob iu m）杂交育种 的亲本选配 及栽培、杂 交技术、F1代无菌苗培 育、F1代观测及 组合筛选、优良单株选择、优良单株扩繁、档案管理等内容。本文件适用于广西境内的观赏石斛杂交育种。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。LY/T 2 69 8 铁皮石斛杂交育种技术规范 NY/T 2 75 8 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 石斛属 DB 45/T 1 78 3 石斛兰组 培快繁技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 唇瓣 l ab ell um 由内轮花被片中央的一片变态而成，常有鲜艳的色泽和复杂的结构。3.2 合蕊柱 c olu mn 雌雄蕊融合而成的柱状器官。3.3 柱头窝 s tig ma n es t 蕊柱柱头中间凹陷的器官。4 亲本的选配与栽培 4.1 亲本选择 株形紧凑美观，花色艳丽、花期长、花量大，具有芳香，易栽培，抗逆性强，表型变异较大。4.2 组合配制 父母本杂交亲和性高，母本观赏性、适应性以及繁殖力综合性状优良，父本单个性状突出，具有要 改良的目标性状。DB 45/T 2 38 2 20 21 2 4.3 亲本栽培 亲本种植于 具 有 隔离网 的 温室大棚 内，方 法参 照LY/T 2 69 8 执行。5 杂交技术 5.1 工具准备 采样瓶、采样针、牙 签 高温消毒处 理，备 用。5.2 母本花朵 宜在母 本的花 朵开放 1 d 3 d进 行 授 粉。5.3 父本花朵 宜在父 本花 朵开放 1 d 5 d采集 花粉。5.4 花粉采集 用 采样针或牙 签 去除父 本植株 药帽，取 下花粉 块，置 于 采样瓶 内。5.5 花粉保存 将装 有花粉的 干燥瓶密封，并 在 4 冰箱保存，存放时 间不 宜超 过7 d。5.6 授粉方法 5.6.1 授粉时间 宜 选择 晴天上午 9:00 10:30 或 下 午 16:30 17:30。5.6.2 授粉操作 用 沾水牙 签 去除母 本植株 唇瓣、药帽 和花粉，去除父 本 药帽，取 下 父 本花粉 块或将采集瓶 内 保存 的 父 本花粉 送至母 本合蕊柱的柱头 窝，轻压粘 稳。5.7 授粉花朵数 每 植株授粉3 4 朵。5.8 标记 在 授粉植株 上挂 标签，记 录 父母 本、授粉人 员 和授粉日期等，参见 附录A。5.9 授粉后管理 授粉 后停止浇水 24 h，蒴 果膨大后每假鳞茎保留果实 1 2 个。5.1 0 蒴果采收与保存 5.1 0.1 采收时间 蒴果表 皮由 绿 色 转为黄 色 且尚未开裂时采收。DB 45/T 2 38 2 20 21 3 5.1 0.2 测定和统计 测定蒴果长度、粗度和重量，记录蒴果形状和颜色，统计不同杂交组合座果率。5.1 0.3 消毒和保存 用75酒精 拭擦蒴果表面，然后用0.1氯化汞 溶液消毒8 min 10 min，无 菌 水冲洗5 次，晾干水分 后放置在4 冰箱保存备用。6 F 1 代无菌苗培育 6.1 蒴果灭菌 用7 5酒精 消毒30 s，无 菌水冲洗3 次，再 用 0.2 氯 化 汞溶液消毒3 min 5 min，无菌水冲洗5 次，用消毒过的滤纸吸干水备用。6.2 无菌播种 将消毒后蒴果置于无菌培养皿中，用消毒的解剖刀切开蒴果，将种子均匀分布于萌发培养基表面。6.3 萌发培养基 参见附录B.1。6.4 分化培养基 参见附录B.2。6.5 壮苗生根培养基 参见附录B.3。6.6 其它 无菌播种苗的培养条件、炼苗、移栽和移栽后管理，参照D B4 5/T 17 83 的规定 执行。7 F 1 代观测及组合筛选 7.1 F 1 代性状观测 参照NY/T 27 58的规定 执行。7.2 组合筛选 根据育种目标进行综合评价筛选，评价指标见附录C。8 优良单株选择 8.1 指标测定 参照NY/T 27 58的规定 执行。DB 45/T 2 38 2 20 21 4 8.2 优良单株选择 按照7.2 执行。9 优良单株扩繁 参 照DB 45/T 17 83 执行。1 0 档案管理 包括组合 编号、父母 本 名称 及 编号、杂交授粉 时 间、无菌 播种 时 间、移 栽 时 间、第一 次开 花 时 间、F1代 数量、优株选择 时 间、入 选优株 编号 等。DB 45/T 2 38 2 20 21 5 A A 附录A（资料性）观赏石斛组杂交授粉标签格式 观赏石斛杂交授粉标签格式见图A.1。母本：父本：花朵编号：授粉地点：授粉人员：授粉时间：图A.1 观赏石斛杂交授粉标签格式 DB 45/T 2 38 2 20 21 6 B B 附录B（资料性）无菌播种培养基配方 B.1 萌发培养基 M S+白糖 25 g/L+琼脂 4.7 g/L+活 性 炭 0.5 g/L+蛋白胨 1 g/L+椰汁 10 0 m L/L+6 BA 0.05 mg/L 0.2 mg/L,p H 5.4 5.6。B.2 分化培养基 M S+白糖 25 g/L+琼脂 4.7 g/L+活 性 炭 0.5 g/L+蛋白胨 1 g/L+马铃薯 100 g/L+6-BA 0.05 mg/L 0.2 mg/L+NA A0.05 mg/L 0.2 mg/L,p H 5.4 5.6。B.3 生根壮苗培养基 1/2 M S+白糖 30 g/L+琼脂 5.0 g/L+活 性 炭 1.0 g/L+蛋白 胨 2 g/L+香蕉 60 g/L+马铃 薯 40 g/L+6 BA 0.0 5 mg/L 0.2 mg/L,p H 5.4 5.6。观 赏 指标类别 观 赏 性 植株 假鳞 茎 花 叶 抗逆性 适应性 繁殖力 赏 石斛组合 筛 株高 茎 茎长 花型 叶长 抗寒 成活率 新芽数 观赏筛 选和优良 单 株形 株 茎粗 形 花色 花 叶宽 叶 抗旱 抗 生长势 座果率 石斛组合筛 选 单 株选择主 要 表C.1 观 赏 株 幅 形 状 节间 距 花 径 花朵 数 叶 数 叶 形 抗 虫 抗病/C D C 附录 C（资料性）选和优良单 株 要 评价指标 见 赏 石斛组合 筛 评 距 颜色 数 花期长短 叶艺 耐湿热/C）株 选择主要 评 表C.1。筛 选主要评 价 评 价指标/自然 花期 花 香 叶质地 耐晒/评 价指标 价 指标/香 唇瓣 特性/DB 45/T/距长 花梗 长/23 82 20 217/长 花梗 数 整 度/整 齐 度 中华人民共和国广西地方标准 观赏石斛杂交育种技术规程 DB 45/T 2382 2021 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究