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ICS 65.020.20 ICS 65.020.20 CCS B 05 DB23 黑龙江省地方标准 DB23/T 3185 2022 设施番茄 根结线虫 病抗性鉴 定 技术规程 2022-05-09 发布 2022-06-08 实施 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB23/T 31852022 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作导 则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 这些 专利的 责任。本文件 由黑 龙江 省农 业农 村厅提 出。本文件 起草 单位：中 国科 学院东 北地 理与 农业 生态 研究所 农业 技术 中心。本文件 主要起 草人：李春 杰、王 从丽、王旋、常豆 豆、赵 亚男、黄铭 慧、姜 野、秦 瑞峰、于瑾 瑶、赵磊、蒋丹、谢 倚帆。DB23/T 31852022 1 设 施番茄 根结线虫 病抗性 鉴定技术 规程 1 范围 本 文件 规定 了设 施番 茄根 结线虫（Meloidogyne spp.）病 抗性 鉴定 技术 中的 术 语和定 义、鉴 定材 料、鉴定场 所、育苗 和移 苗、秧苗管 理、接种 体制 备、接种、病情 调查、抗 性评 价 以及 鉴定 档案 记录。本 文件 适用 于设 施内 栽培 番茄（Solanum lycopersicum L.）对南 方根 结线 虫（M.incognita）和北 方根结线 虫（M.hapla）病 的 抗性鉴定。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB 16715.3 瓜 菜作 物种 子 第 3 部 分：茄果 类 NY/T 1858.8 2010 番 茄 主要病 害抗 病 性 鉴定 技术 规程 第 8 部分：番茄 抗南方 根结 线虫 病鉴 定 技术规程 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 根结线 虫病 root-knot nematode disease 由 南方 根结 线虫（M.incognita）或北 方根 结线 虫（M.hapla）等 引 起的 线虫 病 害。根 系受 害后 形成大小和 形状 不同 的瘤 状根 结，初 呈白 色、表面 光滑，后呈 黄黑 褐色、粗 糙，解剖根 系可 见很 小 的 乳 白 色线虫。受害 初期 植株 地上 部分无 明显 症状，后 期生 长不良，叶 片变 黄，甚至 萎蔫死 亡。3.2 接种体 inoculum 用于接 种植物 以 引起 植物 发 病的 病原 物或 病原 物的 一部分。3.3 人工接 种 artificial inoculation 在适宜 条件 下，通过 人工 操作将 接种 体置 于植 物体 的适当 部位 并使 之发 病的 过程。3.4 根结级 别 root-knot rating scale 人为定 量植 株个 体或 群体 根结线 虫病 发病 程度 的数 值化描 述。3.5 病情指 数 disease index 通过对 植株 个体 发病 程度（根结 级别）数 值的 计算 所获得 的群 体发 病程 度的 数值化 描述 形式。3.6 DB23/T 31852022 2 抗病性 disease resistance 植 物体 所具 有的 能够 减轻或 克服 病原 体致 病作 用的可 遗传 性状。3.7 抗病性 鉴定 identification of disease resistance 根 据适 宜技 术方 法鉴 定植物 对特 定病 害的 抵抗 水平。3.8 抗性评 价 evaluation of disease resistance 根据 采用 的技 术标 准判 别植物 对特 定病 害反 应程 度和抵 抗水 平的 描述。4 鉴定材 料 鉴定材 料种 子的 质量 要求 按照 GB 16715.3 的规 定执 行。5 鉴 定场 所 育苗 和 移苗、秧苗 管理 及 接种均 在智 能温 室内 或智 能光照 培养 箱内 进行，光 照 16 h/d、温度 22 28，相对 湿 度 60%70%。6 育苗 和 移苗 6.1 育苗 将待鉴 定的 番茄 种子 用 10%NaClO 溶液 浸泡 10 min，无菌 水冲 洗后 播种 在装 有无菌 蛭石 的营 养盆中，每 个品 种在 每盆 内播 种 40 粒，于 智能 温室 或培 养箱内，常 规管 理，保 留 生长健 壮、一致 的幼 苗 30株，长 出 1 片真 叶时 移 苗。6.2 移苗 将经湿 热灭 菌（121 高温 蒸汽灭 菌 1.5 h）的沙 和土（V 沙：V 土=2：1）混 合 装入直 径 12 cm、深度 12 cm 的一 次性 塑料 营 养钵内，将 沙土 装 至 10 cm 处，每钵 浇水 50 mL。将 30 株备 用幼 苗分 别移 栽到浸湿 的沙 土内，每 钵内 移入 1 株幼 苗，每 15 钵 为 一次重 复，共 两 次生 物学 重复。7 秧 苗管 理 移栽后 的番 茄苗 置于 温室 中，每天 根据 天气 和盆 栽 蒸发量 浇水，每周 浇 1 次 营养液，番茄 植株 长至3 片真 叶时 接种。8 接 种体 制备 8.1 接种 体繁 殖 将已鉴 定的 根结 线虫（M.incognita 或M.hapla）卵 接 种在 感 病番 茄 根 际土 壤，在 温室 内繁殖45 d 后备用。8.2 接种 体悬 浮液 制备 DB23/T 31852022 3 将接种 45 d 后 的番 茄根 系 洗净，放入 装 有 1%NaClO 溶 液的 锥形 瓶中，NaClO 溶 液体 积是 根系 体系的 2 倍3 倍，置 于摇 床 200 rpm 220 rpm 振荡 或手动 用力 摇 晃 3 min 4 min，然后将根 及溶 液一起依次通 过 200 目和 500 目 筛网，用 自来 水冲 洗。收 集 500 目筛 网 上的 卵至 烧杯 中，用蒸 馏水 制成 卵悬 液，用磁力 搅拌 器将 卵悬 液混 合均匀，在 显微 镜下 调查 卵量，配制 成卵 浓度 为 1000 个/mL，备用。9 接种 在番茄 植株 根部 两 侧 1cm 处用 1 mL 微量移液器 枪 头在土 壤中 打孔，孔 深 4 cm 5 cm，每孔接种0.5 mL 上述卵悬 液，接 种 后覆灭 菌沙 土。接 种后 的 番茄在 温室 继续 培养，控 制土壤 湿度 宜于 线虫 侵染。10 病情 调查 番茄接 种 40 d 42 d 扣盆，将 根部 清洗 干净。根据 番 茄根 系 有根结 的 根数 占总 根系的 比例 定级，根结线虫 病的 根结 级别 划分 符合 NY/T 1858.8 2010 规定，按照 表 1 执行。表 1 番茄 根结 线虫 病根 结级别 划分 根结级 别 症状描 述 0 整个根 系无 根结 1 0 有 根结 的根 数占 总根 系10%2 10%有根 结的 根数 占总 根系25%3 25%有根 结的 根数 占总 根系50%4 50%有根 结的 根数 占总 根系75%5 75%有根 结的 根数 占总 根系 100%11 抗 性评 价 11.1 抗性 评价 标准 根据病 情指 数进 行划 分，病情指 数按 照公 式（1）计 算，根 结线 虫病 抗性 调查 表按照 附录A。病情指数=(各级病 株数 各 级代 表值)调查总 株数 最高 一级 代表 值 100（1）依据15 株番 茄材 料（2 次 生 物学重 复）的病 情指 数确 定其抗 性水 平，划分 标准 按照表2执 行。表 2 番 茄对 根结 线 虫病抗 性的 评价 标准 病情指 数 抗性评 价 0 免疫 Immune（I）0病情 指数10 高抗 Highly resistant（HR）10 病 情指 数25 抗 Resistant（R）25 病 情指 数50 中抗 Moderately resistant（MR）50 病 情指 数75 感 Susceptible（S）75 病 情指 数100 高感 Highly susceptible（HS）11.2 评价 有效 性 当感病 对照 材料 病情 指数 达50以 上，视为 有效 评价。DB23/T 31852022 4 12 鉴定 档 案记 录 及时记 录番 茄品 种、接种 体和接 种剂 量，番茄 播种、移栽、接 种及 调查 的时 间等鉴 定过 程信 息。DB23/T 31852022 5 附录 A（规范 性）番茄抗 根结 线虫 病鉴 定结 果记载 表 A.1 番 茄抗 根结 线虫 病鉴 定结果 记载 表见 表A.1。表A.1 番茄 抗根 结线 虫病 鉴定结 果记 载表 日期：编 号 品种/种质名称 来源 根 结线虫病 各级发 病数（株）病情 指数 平 均值 抗性 重复 0 1 2 3 4 5 病情 指数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 鉴定技 术负 责人（签 字）：_
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