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I C S 6 5.0 2 0C C S B 1 522吉 林 省 地 方 标 准D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 1利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 技 术 规 程C o d e o f p r a c t i c e f o r T r i c h o g r a m m a b r e e d i n g b y S y m p a r a s i t i s m2 0 2 1-1 1-2 6 发 布 2 0 2 1-1 2-1 5 实 施吉 林 省 市 场 监 督 管 理 厅 发 布D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 1I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的规 定 起 草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 吉 林 省 农 业 农 村 厅 提 出 并 归 口。本 文 件 起 草 单 位：吉 林 农 业 大 学（农 业 现 代 化 综 合 技 术 研 究 所）。本 文 件 主 要 起 草 人：张 雪、张 俊 杰、杜 文 梅、阮 长 春。D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 11利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 技 术 规 程1 范 围本 文 件 确 立 了 利 用 柞 蚕 卵 共 寄 生 繁 育 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 的 工 艺 流 程，规 定 了 生 产 计划、工 厂 化 生 产 等 阶 段 的 操 作 指 示，描 述 了 过 程 记 录 等 追 溯 方 法。本 文 件 适 用 于 工 厂 化 生 产 共 寄 生 赤 眼 蜂。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用文 件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。本 文 件 没 有 规 范 性 引 用 文 件。3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1共 寄 生 s y m p a r a s i t i s m以 柞 蚕 卵 为 中 间 寄 主，将 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 同 时 寄 生 在 一 粒 柞 蚕 卵 内 的 寄 生 方 式。4 利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 程 序 的 构 成利 用 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 生 产 分 为 2 个 阶 段，准 备 工 作 阶 段 分 为 6 个 步 骤，工 厂 化 生 产 阶 段 分为 7 个 步 骤。程 序 流 程 图 如 图 1 所 示。图 1 共 寄 生 繁 育 赤 眼 蜂 工 厂 化 生 产 流 程5 准 备 工 作 阶 段5.1 生 产 计 划每 年 的 1 1 月 1 2 月 份，根 据 虫 情 预 测 预 报 信 息 和 实 际 情 况，及 时 调 整，主 要 内 容 包 括：D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 12a)所 需 厂 房、设 备；b)蜂 种、蚕 茧 等 生 产 资 料；c)用 工 数 量 和 时 间；d)组 织 生 产 及 应 急 保 障 措 施。5.2 厂 房 及 规 模按 照 1 5 0 亿 头 共 寄 生 赤 眼 蜂 生 产 规 模 应 包 括：a)蜂 种 繁 育 室 不 低 于 4 0 m2；b)暖 茧 车 间 不 低 于 3 0 0 m2；c)采 卵 室 不 低 于 5 0 m2；d)洗 卵 室 不 低 于 2 0 m2；e)消 毒 室 不 低 于 1 0 m2；f)接 种 室 不 低 于 1 0 m2；g)暗 室 不 低 于 6 0 m2；h)发 育 室 不 低 于 5 0 m2；i)保 鲜 冷 藏 室 不 低 于 1 0 0 m2；j)物 品 保 存 库 不 低 于 2 0 m2。5.3 设 备药 品 保 存 箱、搅 拌 器、脱 水 机、烘 干 机、柞 蚕 卵 色 选 机、空 调、排 风 机、点 暖 气、加 湿 器、温湿 度 自 控 仪、电 脑 机 打 印 机、发 育 盘 架、手 推 运 输 车。5.4 常 用 药 品 及 材 料5.4.1 2 5 g/L 3 0 g/L 苯 扎 溴 铵 溶 液（新 洁 尔 灭 消 毒 液）。5.4.2 孔 径 为 0.1 5 m m 的 纱 网。5.4.3 孔 径 为 2.0 0 m m 的 纱 网。5.5 蜂 种 准 备5.5.1 蜂 种 采 集在 靶 标 害 虫 产 卵 季 节，于 不 同 生 境 广 泛 采 集 被 赤 眼 蜂 寄 生 的 靶 标 害 虫 卵，并 做 好 标 记，经 室 内培 养，筛 选 出 寄 生 率 高、适 应 性 强 的 蜂 种。5.5.2 蜂 种 鉴 定根 据 雄 性 赤 眼 蜂 外 生 殖 器 的 形 态 特 征 进 行 种 类 鉴 定，参 照 附 录 A 执 行。5.5.3 蜂 种 纯 化对 采 自 不 同 靶 标 害 虫 卵 内 的 赤 眼 蜂 进 行 如 下 筛 选 纯 化：a)在 规 格 1 0 m m 7 0 m m 试 管 中 投 放 米 蛾 卵 2 0 0 粒，再 放 入 单 头 雌 蜂，用 棉 球 或 纱 布 封 口 后 置于 发 育 室；b)发 育 条 件：光 照 1 6 h，（2 5 1）、R H（7 5 5）%；黑 暗 8 h，（2 0 1）、R H（7 5 5）%；D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 13c)将 确 定 的 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 分 别 合 并，继 续 繁 殖。5.5.4 蜂 种 保 存纯 化 的 蜂 种，经 3 代 5 代 筛 选 繁 殖，建 立 实 验 种 群 后 按 下 列 方 法 保 存：a)将 发 育 到 幼 虫 中 期 的 蜂 种，置 入 1 2、R H（7 5 5）%的 条 件 下，诱 导 滞 育 3 0 d；b)置 入（3 1）、R H（7 5 5）%的 条 件 下，进 行 解 除 滞 育 6 0 d 9 0 d；c)经 1 0 2 d、1 5 1 d 过 渡 后，按 5.5.3 b)变 温 发 育 至 出 蜂。5.6 柞 蚕 茧 准 备5.6.1 备 茧5.6.1.1 备 茧 时 期在 生 产 前 1 年 的 1 1 月 1 2 月 份 开 始 按 预 定 计 划 备 茧。5.6.1.2 茧 质 量茧 质 量 要 求 如 下：a)健 康 雌 茧 率 9 0%；b)雄 茧 率 7%；c)死 伤 茧 率 3%；d)割 口 茧 率 8%；e)发 育 蛹 和 嫩 蛹 5%；f)茧 层 率 1 0%，无 薄 皮 茧、瘪 茧；g)茧 干 燥，未 在-3 一 下 低 温 储 存。5.6.1.3 备 茧 数 量按 每 繁 1 5 0 亿 头 共 寄 生 赤 眼 蜂 用 茧 1 8 0 0 0 k g 计 算。5.6.2 蚕 茧 保 存5.6.2.1 保 存 温 度：（3 1）、R H（6 0 5）%。5.6.2.2 适 当 通 风 换 气，保 持 空 气 含 氧 量。5.6.2.3 防 止 接 触 有 毒 有 害 物 质。5.6.2.4 储 存 时 间 不 低 于 4 5 d。6 工 厂 化 生 产6.1 灭 菌 消 毒在 生 产 前 1 周，将 所 有 繁 蜂 车 间 及 繁 蜂 工 具，进 行 集 中 消 毒。消 毒 方 法 为 如 下：a)首 先 对 消 毒 对 象 进 行 清 水 或 0.5%1%氢 氧 化 钠、1%的 漂 白 粉 水 冲 洗；b)用 生 石 灰 或 石 灰 水 对 繁 蜂 车 间 喷 刷 覆 盖；c)将 繁 蜂 工 具 等 置 于 繁 蜂 车 间 内，用 毒 消 散 或 硫 磺 等 熏 蒸 消 毒。保 持 室 温 2 4 以 上，R H 7 5%以上，时 间 2 4 h。D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 146.2 种 蜂 准 备6.2.1 种 蜂 复 壮根 据 生 产 计 划，定 期 对 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 种 蜂 以 米 蛾 卵 和 柞 蚕 卵 交 替 繁 育 复 壮：a)螟 黄 赤 眼 蜂：1)接 蜂 比 例：米 蛾 卵 蜂 卵 比 未 1：8 0，柞 蚕 卵 蜂 卵 比 为 1：1；2)接 蜂 时 间：1 d 2 d；3)发 育 条 件：同 5.5.3 b)；4)复 壮 周 期：3 0 d 4 0 d。b)松 毛 虫 赤 眼 蜂：1)接 蜂 比 例：米 蛾 卵 蜂 卵 比 未 1：2 0 0，柞 蚕 卵 蜂 卵 比 为 1：1；2)接 蜂 时 间：1 d 2 d；3)发 育 条 件：同 5.5.3 b)；4)复 壮 周 期：3 0 d 4 0 d。6.2.2 种 蜂 扩 繁以 柞 蚕 卵 为 中 间 寄 主，将 种 蜂 扩 繁 2 代 3 代：a)接 蜂 比 例：螟 黄 赤 眼 蜂 为 1：2 5，松 毛 虫 赤 眼 蜂 为 1：3 0（种 蜂 寄 生 柞 蚕 卵：新 鲜 柞 蚕 卵）；b)接 蜂 时 间：1 d；c)接 蜂 条 件：全 黑 暗，（2 5 1）、R H（7 5 5）%；d)发 育 条 件：同 5.5.3 b)；e)将 末 一 代 种 蜂 发 育 至 幼 虫 中 后 期 置 于（3 1）、R H（7 5 5）%条 件 下 冷 藏；f)冷 藏 时 间 螟 黄 赤 眼 蜂 不 超 过 1 0 d，松 毛 虫 赤 眼 蜂 不 超 过 1 5 d。6.3 柞 蚕 卵 准 备6.3.1 暖 茧 发 蛾暖 茧 室 保 持 1 8 2 2、R H（7 0 5）%，2 0 d 2 5 d 后 柞 蚕 茧 羽 化 出 蛾。6.3.2 收 蛾在 柞 蚕 蛾 羽 化 期 内，随 时 采 收 杠 羽 化（展 翅 前）雄 蛾，避 免 交 尾，次 日 清 晨 人 工 收 雌 蛾，用 于当 天 繁 蜂 或 储 存 在（3 1）的 冷 库 中 备 用。6.3.3 剖 腹 取 卵用 人 工 方 法 将 柞 蚕 雌 蛾 腹 部 与 头 胸 部 分 离，剖 腹 取 卵。6.3.4 洗 卵 及 消 毒6.3.4.1 用 搅 拌 器 将 卵 与 蛾 腹 内 杂 物 搅 拌 分 离，加 入 清 水 反 复 漂 洗 数 次，除 去 杂 物，留 下 蛾 卵。6.3.4.2 将 清 洗 干 净 的 新 鲜 卵 用 0.1%的 苯 扎 溴 铵 溶 液（新 洁 尔 灭 消 毒 液）浸 泡 5 m i n。6.3.5 脱 水 晾 卵D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 15消 毒 后 的 新 鲜 卵 用 纱 网 袋 装 好，用 脱 水 机 进 行 初 步 脱 水，然 后 用 烘 干 机 烘 干，温 度 不 超 过2 5 2 8。6.3.6 清 除 绿 卵烘 干 的 新 鲜 卵 用 色 选 机 等 专 用 设 备 清 除 绿 卵 后，再 用 于 接 蜂，绿 卵 率 4%。6.4 接 蜂6.4.1 比 例松 毛 虫 赤 眼 蜂 寄 生 卵、螟 黄 赤 眼 蜂 寄 生 卵、新 鲜 柞 蚕 卵 比 例 为 3：7：2 1 0。6.4.2 时 间当 种 蜂 羽 化 率 达 到 2 5%3 0%时，将 两 种 赤 眼 蜂 种 蜂 卵 均 匀 撒 在 接 蜂 盘 中，铺 上 2 m m 孔 径的 纱 网，再 将 定 量 的 新 鲜 柞 蚕 卵 平 铺 到 纱 网 上，送 入（2 5 1）、R H（7 5 5）%的 暗 室 内 产卵 寄 生，接 蜂 4 8 h 后，去 除 种 蜂，标 明 日 期 送 入 发 育 室。6.5 培 养 发 育在（2 5 1）、R H（7 5 5）%条 件 下 继 续 发 育 2 4 h 至 幼 虫 后 期。6.6 寄 生 卵 冷 藏将 发 育 至 幼 虫 后 期 的 螟 黄 赤 眼 蜂 和 松 毛 虫 赤 眼 蜂 的 共 寄 生 卵，平 铺 到 卵 盘 中 置 于 冷 库 内 货 架 上冷 藏：a)铺 卵 厚 度 3 m m 4 m m；b)冷 藏 温 度（3 1）、R H（7 5 5）%，全 黑 暗；c)冷 藏 时 间 不 应 超 过 2 4 d。6.7 发 育 与 精 选6.7.1 发 育根 据 害 虫 发 生 时 间 将 冷 藏 共 寄 生 卵 按 如 下 步 骤 发 育：a)在（1 5 1）、R H（7 5 5）%，全 安 条 件 下 加 温 1 d；b)按 5.5.3 b)变 温 发 育 至 预 蛹 期。6.7.2 精 选用 绿 卵 色 选 机 除 去 未 寄 生 卵、劣 质 卵、绿 卵 及 其 它 杂 质。6.7.3 再 发 育将 精 选 后 的 寄 生 卵，置 于 发 育 室 按 5.5.3 b)变 温 发 育 至 蛹 后 期。根 据 田 间 放 蜂 时 间，必 要 时再 按 6.6 的 方 法 冷 藏，冷 藏 时 间 不 应 超 过 3 d。7 过 程 记 录D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 16建 立 共 寄 生 繁 育 松 毛 虫 赤 眼 蜂 和 螟 黄 赤 眼 蜂 工 厂 化 生 产 档 案，对 整 个 生 产 过 程 进 行 详 实 记 录，保 存 2 年 以 上，做 到 可 追 溯，记 录 并 保 持 一 下 内 容：a)执 行 各 个 阶 段 程 序 的 人 员 姓 名；b)执 行 各 个 阶 段 程 序 的 时 间；c)执 行 各 个 阶 段 程 序 的 地 点；d)执 行 的 具 体 操 作 内 容；e)记 录 执 行 的 结 果 或 观 察 到 的 现 象；f)其 它。D B 2 2/T 3 3 1 5 2 0 2 17A A附 录 A（资 料 性）螟 黄 赤 眼 蜂 及 松 毛 虫 赤 眼 蜂 形 态 学 鉴 定 方 法A.1 制 作 鉴 定 拨 片 及 观 察 测 量将 用 浓 度 7 5%9 5%酒 精 浸 泡 的 雄 性 赤 眼 蜂 标 本 按 下 列 方 法 制 作 为 玻 片：a)在 5%的 K O H 溶 液 中 浸 泡 8 h 1 5 h，并 用 水 清 洗 干 净，置 于 载 玻 片 上；b)在 解 剖 镜 下，用 昆 虫 针 挑 取 雄 蜂 的 外 生 殖 器，清 除 其 他 组 织，盖 好 盖 玻 片；c)在 显 微 镜 下 观 察 并 测 量 阳 基 背 突、腹 中 突 及 D 值。A.2 鉴 定a)螟 黄 赤 眼 蜂在 显 微 镜 下 观 察 赤 眼 蜂 雄 性 外 生 殖 器 并 测 量 其 阳 基 背 突、腹 中 突 及 D 值，符 合 下 列 特 征 的 属于 螟 黄 赤 眼 蜂：1)有 明 显 的 半 圆 形 的 侧 叶，末 端 达 D 值 的 1/2；2)腹 中 突 的 长 度 约 等 于 D 值 的 1/3，略 成 锥 形；3)钩 爪 末 端 伸 达 D 值 的 1/2。b)松 毛 虫 赤 眼 蜂在 显 微 镜 下 观 察 赤 眼 蜂 雄 性 外 生 殖 器 并 测 量 其 阳 基 背 突、腹 中 突 及 D 值，符 合 下 列 特 征 的 属 于 松毛 虫 赤 眼 蜂：1)阳 基 背 突 有 明 显 的 宽 圆 的 侧 叶，末 端 达 D 值 的 3/4；2)腹 中 突 的 长 度 约 等 于 D 值 的 3/5 3/4；3)钩 爪 末 端 伸 达 D 值 的 3/4。
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