植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中有毒有害物质的测定 第3部分：葡萄糖迁移量碘量法DB13／T 5127.3-2019.pdf

ICS 11.120.20 C 30 DB13 河北省地方标准 DB 13/T 5127.3 2019 植入性医 疗器械 高 分子材料 浸提液中 有毒有害 物质的测 定 第3 部分：葡萄 糖迁移量 碘量 法 2019-12-27 发布 2020-01-28 实施 河 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB13/T 5127.3 2019 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1-2009 给出的 规则 起草。DB13/T 5127 植入 性医 疗 器械 高分 子材 料 浸提 液中有 毒有 害物 质的 测定 共分16个 部分：第1部 分：柠檬 酸钠 和 乙二胺 四乙 酸二 钾迁 移量 原子 吸收 分光 光度 法；第2部 分：二巯 基丙 醇 迁移量 碘 量法；第3部 分：葡萄 糖迁 移 量 碘 量法；第4部 分：柠檬 酸迁 移 量 酸 碱中 和滴 定法；第5部 分：硫氰 酸胍 迁 移量 分光 光度 法；第6部 分：丙酮 迁移 量 气相 色谱 法；第7部 分：丙交 酯迁 移 量 气 相色 谱法；第8部 分：对苯 二甲 酸 迁移量 高 效液 相色 谱法；第9部 分：乙醇 迁移 量 气相 色谱 法；第10部 分：环氧 乙烷 迁移量 气 相色 谱法；第11部 分：戊二 醛迁 移量 高效 液相 色谱 法；第12部 分：异氰 酸酯 迁移量 高 效液 相色 谱法；第13部 分：甲醛 迁移 量 气 相色 谱质 谱联 用法；第14部 分：蛋白 质迁 移量 可见-紫外 分光 光度 法；第15部 分：铅、砷、镉、铬、铜、锑、钡、铝、锌、锡 迁 移量 电 感耦 合等离 子体 质 谱 法；第16部 分：生物 负载 薄膜 过滤 法。本部分 为DB13/T 5127的第3部分。本部分 由河 北省 药品 监督 管理局 提出 并归 口。本部分 起草 单位：河 北省 医疗器 械与 药品 包装 材料 检验研 究院。本部分 主要 起草 人：杨光、刘若 锦、刘华、王 丽、尹紫明。DB13/T 5127.3 2019 1 植 入性医 疗器械 高 分子材 料 浸 提液中 有毒有害 物质的 测定 第 3 部分：葡萄糖 迁移量 碘 量法 1 范围 本标准 规定 了植 入性 医疗 器械高 分子 材料 浸提 液中 葡萄糖 迁移 量 的 碘量 法的 测定 方 法。本标准 适用 于植 入性 医疗 器械高 分子 材料 浸提 液中 葡萄糖 迁移 量 的 测定。本方法 葡萄 糖 的 检出 限为0.03 mg/mL。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 注日 期的版 本适 用于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规 格 和实 验方 法 GB/T 16886.12 医 疗器 械 生物学 评价 第12部 分：样品制 备与 参照 材料 3 方法原 理 在碱性 条件 下将 过量 的碘 单质(I2)加 入葡 萄糖 溶液 中，碱 液中OH-与I2 作 用可 生成IO-，而 葡萄 糖 分子中的 醛基 定量 地被 次碘 酸负离 子氧 化为 葡萄 糖酸，反应 如下：在 酸性 条件 下过量 的未 与葡 萄糖 反 应的IO-在碱 性介 质中 进一 步 歧化为IO3-和I-，在加 酸酸 化时又 重新 氧化 生成I2；用硫代 硫酸 钠(Na2S2O3)标准溶液 滴定 析出 的I2；按照 加入的I2 标 准溶 液的 量以 及滴定 消耗 的Na2S2O3 标准 溶液的 量，计 算出 葡萄 糖的含 量。4 试剂与 材料 除另有 规定 外，所用 的试 剂应为 优级 纯，试验 用水 应符合GB/T 6682 规 定的 二 级水的 要求。4.1 硫代 硫酸 钠标 准溶 液（0.1 mol/L）。4.2 碘标 准 滴 定液（0.05 mol/L）。4.3 氢氧 化钠 溶液（2 mol/L）。4.4 盐酸 溶液（6 mol/L）。4.5 淀粉 指示 剂液（10 g/L）。5 仪器 与 设备 5.1 棕色 碱式 滴定 管。DB13/T 5127.3 2019 2 5.2 刻度 移液 管。5.3 容量 瓶。5.4 具塞 锥形 瓶。6 试液制 备 6.1 浸提试 验 6.1.1 浸提溶 液 本标准 采用 模拟 浸提 方式，以水 为浸 提介 质。6.1.2 浸提条件 和 方法 6.1.2.1 浸提 条件 建立 在 通常可 行并 经论 证为 一个 标准 化 方法 的基 础之 上，在 多数情 况下 为产 品使 用的适当 加严 的条 件。应 在 下列之 一的 条件 下进 行浸 提：a)(371),(242)h；b)(371),(722)h；c)(502),(722)h；d)(702),(242)h；e)(1212),(10.1)h。6.1.2.2 可用 标准 表面 积 确定所 需的 浸提 介质 的 体 积。标 准表 面积 包括 样品 两面面 积 的 总和，不 包括不确定 和不 规则 面积。当 由于样 品外 形不 能确 定其 表面积 时，应使 用质 量/浸 提液体 积。见表1。表1 标 准表 面积 和浸 提液 体积 材料形态举例 厚度（mm）浸提比例（表面积或质量/体积）1 0%膜、薄片、管壁 0.5 6 cm2/mL 管壁、厚板、小型模制件 0.5 1.0 3 cm2/mL 大型模制件 1.0 3 cm2/mL 弹性密封件 1.0 1.25 cm2/mL 粉剂、球体、泡沫材料、无吸收性模制件 不规则形状固体器械 0.2 g/mL 薄膜、织物 不规则形状多孔器械（低密度材料）0.1 g/mL 注1：现在尚无测试吸收剂 和水胶体的标准化方法，推荐以下方案：注2：测定材料浸提介质吸 收量（每0.1 g 或1.0cm2 材料所 吸收的量）；注3：在进行浸提时，对浸 提混合物按每0.1 g 或1.0 cm2 额外加入该浸提介质吸收量。6.1.2.3 对于 弹性 体、涂 层 材料、复 合材 料、多层 材料等，由 于完 整表 面与 切割表 面存 在潜 在的 浸提性能差 异，因此 应尽 量完 整地进 行浸 提。6.2 标准工 作液 制备 精密称 取约1.000 g 葡 萄糖 于100 mL 容量 瓶中，试 验 用水定 容，摇匀。制 得约10 mg/mL 葡萄 糖储 备液。DB13/T 5127.3 2019 3 制备 葡 萄糖 标准 溶液，浓 度分别 为0.20 mg/mL、0.50 mg/mL、1.00 mg/mL、2.00 mg/mL、3.00 mg/mL、4.00 mg/mL。6.3 空白液 制备 以同批 浸提 介质 作为 空白 试验液。7 测定 7.1 标准曲 线测 定 移取25.00 mL 空 白液 或标 准溶液 于碘 量瓶 中，从移 液管准 确加 入25.00 mL 0.05 mol/L 的 碘标 准 溶液。一边 摇动，一 边缓 慢加 入2 mol/L NaOH 溶液，直 至 溶液呈 浅黄 色。将 碘量 瓶加 塞于暗 处放 置10 min 15 min 后，加2 mL 6mol/L HCl 使 溶 液 成 酸 性，立 即 用Na2S2O3 溶 液 滴 定 至 溶 液 呈 淡 黄 色 时，加 入2 mL淀粉指 示剂，继 续滴 定蓝 色消失 即为 终点。记 录消 耗溶液 的体 积。7.2 样品测 定 取样品5 支，以水 为 浸提 介质 制 备 浸提 液。移 取25.00 mL 浸 提液 于 碘量 瓶 中，从移 液 管 准确 加入25.00 mL 0.05 mol/L 的 碘 标准溶 液。一边 摇动，一 边缓慢 加入2 mol/L NaOH 溶 液，直 至溶 液呈 浅黄 色。将碘量 瓶加 塞于 暗处 放置10 min 15 min 后，加2 mL 6mol/L HCl 使 溶液 成酸 性，立即 用Na2S2O3 溶液 滴定至溶 液呈 淡黄 色时，加 入2 mL 淀粉 指示 剂，继续 滴 定蓝 色消 失即 为终 点。记录消 耗溶 液的 体积。8 结果计算 浸提液 中 葡 萄糖 的 含 量按 公式（1）计算。（1）式中：C 浸提 液中 葡萄 糖的 浓 度，单 位为 毫 克 每升（mg/mL）；y 浸提 液 消 耗碘 标准 溶液(0.05 mol/L)的 体积（mL）；a 回归 曲线 的斜 率；b 回归 曲线 的截 距；稀释 倍数。样品中 葡萄 糖 的 特定 迁移 量按公 式（2）计算。1000 ACM（2）式中：M 特 定迁 移量，mg/cm2或 mg/g；A 浸提 比例，cm2/mL 或g/mL。计算结 果以 平行 测定 值的 算术平 均值 表示，保 留三 位有效 数字。9 确证 DB13/T 5127.3 2019 4 当浸提 液中 检出 葡萄 糖时，用附 录A 高效 液相 色谱 法 进行确 证。10 精密度 浸提液 中 目 标物 在重 复性 条件下 获得 的两 次独 立测 定结果 的绝 对差 值不 得超 过算术 平均 值的10%。DB13/T 5127.3 2019 5 附 录 A(规范 性附录)高效液 相 色 谱法 A.1 原理 试样中 的葡 萄糖 利用 高效 液相色 谱柱 分离,用 示差 折 光检测 器或 蒸发 光散 射检 测器检 测,外标 法进行定量。A.2 仪器 与设 备 A.2.1 电子 天平：精度 为 0.1 mg。A.2.2 超 声波 振荡 器。A.2.3 磁 力搅 拌器。A.2.4 离 心机：转速 4000 r/min。A.2.5 高 效液 相色 谱仪,带示差 折光 检测 器或 蒸发 光散射 检测 器。A.2.6 液 相色 谱柱:氨基 色谱柱，柱长 250 mm，内径 4.6 mm，膜厚 5 m 或 具有同 等性 能的 色谱 柱。A.3 浸提 液处 理 量取50.0 mL 浸提 液移 入100 mL 容量 瓶中,缓 慢加 入乙 酸锌溶 液和 亚铁 氰化 钾溶 液各5 mL,定 容至 刻度,摇匀,静置30 min,用干 燥滤纸 过滤,弃 去初 滤液,后续滤 液用0.45 m 微孔 滤 膜过滤 或离 心获 取上 清液过0.45 m 微 孔滤 膜至 样品瓶，供 液相 色谱 分析。A.4 色谱 参考 条件 根据所 用仪 器型 号选 择最 佳测定 条件。色 谱条 件应 当满足 葡萄 糖的 分离 度大 于1.5。参考条 件：流动 相:乙腈+水=70+30(体积 比)；流动 相流速:1.0 mL/min；柱温:40；进 样量:20 L；示 差折 光检 测器 条件:温度40；蒸 发光 散射 检测器 条件：漂 移管 温度：80 90；氮气 压力：350 kPa；撞击 器：关。A.5 标准 曲线 的测定 将葡萄 糖标 准工 作液 按上 述推荐 色谱 条件 依次 上机 测定，记录 色谱 图峰 面积 或峰高，以 峰面 积 或峰高为 纵坐 标，以标 准工 作液的 浓度 为横 坐标，示 差折光 检测 器采 用线 性方 程；蒸 发光 散射 检测 器 采用幂函 数方 程绘 制标 准曲 线。A.6 样品 测定 将处理 后的 浸提 液注 入高 效液相 色谱 仪中，记 录峰 面积或 峰高，从 标准 曲线 中查得 试样 溶液 中 葡萄糖的 浓度。_