鞍带石斑鱼种质标准DB35／T 1878-2019.pdf

ICS 67.120.30 B 51 DB35 福建省地方标准 DB35/T 18782019 鞍带石斑鱼种质标准 The germplasm of Epinephelus lanceolatus 2019-12-19发布 2020-03-19实施福建省市场监督管理局 发布 福建省地方标准 鞍带石斑鱼种质标准 DB35/T 18782019*2019年 12月第一版 2019年 12月第一次印刷 DB35/T 18782019 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 名称与分类地位.1 4 分布与生态习性.1 5 形态特征.2 6 生长与繁殖特性.3 7 遗传学特性.3 8 检验方法.5 9 判定规则.6 DB35/T 18782019 II 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由福建省海洋与渔业局提出并归口。本标准起草单位：厦门大学海洋与地球学院、泉州市水产技术站、漳州市水产技术推广站、福建省水产技术推广总站。本标准主要起草人：万为民、丁少雄、吴昊昊、刘巧红、肖佳媚、陈志森、尤颖哲、陈何东、吴斌。DB35/T 18782019 1 鞍带石斑鱼种质标准 1 范围 本标准规定了鞍带石斑鱼Epinephelus lanceolatus（Bloch,1790）的名称与分类地位、分布与生态习性、形态特征、生长与繁殖特性、遗传学特性、检验方法和判定规则。本标准适用于鞍带石斑鱼的种质检测与鉴定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分：性状测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分：年龄与生长的测定 GB/T 18654.6 养殖鱼类种质检验 第6部分：繁殖性能的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 3 名称与分类地位 3.1 学名 鞍带石斑鱼Epinephelus lanceolatus(Bloch,1790)。3.2 俗名 龙趸、龙胆石斑鱼。3.3 分类地位 辐鳍亚纲（Actinopterygii），鲈形目（Perciformes），鲈亚目（Percoidei），石斑鱼科（Epinephelidae），石斑鱼属（Epinephelus）。4 分布与生态习性 鞍带石斑鱼为肉食性鱼类，广泛分布于印度洋及太平洋区，在中国沿海分布于台湾海峡及南海海域，栖息于海水的中下层，栖息水深一般超过50 m。耐受温度10 35，适宜生长温度22 30，耐受盐度1141。DB35/T 18782019 2 5 形态特征 5.1 外部形态 鱼体呈长椭圆形；眼小，侧上位，眼间隔宽且隆起；口大，两颌具犬齿，上颌前端具一对小圆锥齿，左右侧具绒毛状齿，下颌齿细尖，稀疏排列不规则；具明显的辅上颌骨，腭骨具齿，舌上平滑无齿；前鳃盖骨后缘具细锯齿棘，鳃盖骨具三个扁平棘，鳃盖膜不与峡部相连；体被细小栉鳞；背鳍鳍棘部与鳍条部相连，无缺刻；胸鳍后端圆形，尾鳍圆形。幼鱼体色呈黄色，在体侧布有三条不规则的黑色宽带，第一条宽带由背鳍鳍棘部发出，向下延伸至腹部，向前则延伸至头部；第二条宽带由背鳍鳍条部发出，向下延伸至臀鳍部；第三条宽带则位于尾柄处。成鱼体色呈深褐色，随着体长的增长颜色越来越深，宽带区域的白色或黄色斑点颜色越来越淡，各鳍处分布一些不规则黑点。鞍带石斑鱼的外部形态如图1所示。图1 鞍带石斑鱼外部形态 5.2 可数性状 5.2.1 组鳍式 组鳍式：D.XI-1416；A.-8；P.1820；V.I-5；C.17。5.2.2 第一鳃弓外鳃耙数 810+1417。5.2.3 侧线鳞数 5462。DB35/T 18782019 3 5.3 可量性状 体长为体高2.43.4倍，为头长2.22.7倍；体高为体宽1.51.8倍；头长为眼径5.814倍，为眼间距3.36.2倍，为胸鳍长1.82.2倍，为腹鳍长2.12.6倍。5.4 内部构造特征 5.4.1 鳔 鳔无鳔管，1室。5.4.2 脊椎骨总数 脊椎骨为24枚，其中躯椎10枚，尾椎14枚。6 生长与繁殖特性 6.1 生长 鞍带石斑鱼体长与体重的关系式见式（1）：W=0.008 3L3.241 8 R2=0.996 5.(1)式中：W体重，单位为克（g）；L 体长，单位为厘米（cm）。6.2 繁殖特性 6.2.1 性成熟年龄 鞍带石斑鱼具有性反转现象，雌性先熟。部分雌鱼4龄以上达到性成熟，8龄以上部分雌鱼转为雄鱼并达到性成熟。6.2.2 产卵习性 主要繁殖季节6月至10月，产卵水温25 28，多次产卵。怀卵量随个体增大而增多，相对怀卵量为2.5 粒/g25 粒/g。卵径（0.790.04）mm，浮性卵。7 遗传学特性 7.1 细胞遗传学特性 7.1.1 染色体数 2n=48。7.1.2 核型公式 2n=2sm+6st+40t；NF=50。鞍带石斑鱼核型如图2所示。DB35/T 18782019 4 a）鞍带石斑鱼中期分裂相 b）鞍带石斑鱼组型图 图2 鞍带石斑鱼核型图中期分裂相及组型图 7.2 分子遗传学特征 7.2.1 DNA条形码靶基因 以两个线粒体基因COI和ND2及一个核基因RYR3同时作为鞍带石斑鱼DNA条形码靶基因。7.2.2 COI基因DNA条形码 鞍带石斑鱼COI条形码基因共654 bp，种内个体间最大遗传距离小于1%。鞍带石斑鱼COI基因DNA条形码序列如下：1 CTTTATCTTGTATTTGGTGCCTGGGCTGGGATAGTAGGAACAGCCCTTAGTTTGCTAATT 60 61 CGGGCTGAACTAAGCCAGCCAGGGGCTCTGCTAGGTGATGACCAGATTTATAATGTAATT 120 121 GTTACAGCACATGCTTTTGTAATAATCTTTTTTATAGTAATACCAATCATAATCGGTGGC 180 181 TTTGGAAATTGACTCATCCCACTTATAATTGGTGCCCCTGACATAGCGTTCCCTCGGATG 240 241 AATAACATGAGTTTCTGACTTCTCCCCCCTTCTTTCCTGCTTCTTCTTGCCTCCTCTGGA 300 301 GTAGAAGCTGGTGCTGGCACTGGCTGAACGGTCTACCCACCCCTAGCCGGAAATCTAGCC 360 361 CATGCAGGTGCATCTGTAGACTTAACTATCTTCTCACTACACTTGGCAGGGATTTCATCA 420 421 ATCCTAGGTGCAATTAACTTTATTACAACCATCATTAACATAAAACCCCCTGCCATCTCT 480 481 CAATACCAAACACCTTTGTTCGTATGGGCTGTACTAATCACAGCAGTACTACTACTCCTC 540 541 TCCCTCCCTGTCCTTGCCGCCGGCATCACTATGTTGCTTACTGATCGTAACCTTAACACT 600 601 ACCTTCTTTGATCCAGCCGGAGGAGGAGATCCAATTCTTTACCAGCACTTGTTC 7.2.3 ND2基因DNA条形码 鞍带石斑鱼ND2条形码基因共678 bp，种内个体间最大遗传距离小于1%。鞍带石斑鱼ND2基因DNA条形码序列如下：1 ATGAATCCATACATCTTAGCTATCCTACTACTCAGCCTTGGACTAGGAACCACCATCACA 60 61 CTCACAAGCTCCCACTGACTATTCGCCTGAATAGGCTTAGAAATTAATACCCTAGCCATT 120 121 CTCCCCCTTATAGCCCAACAACACCACCCTCGAGCAGTTGAAGCCACCATTAAATATTTT 180 181 CTTACCCAAGCAACGGGGGCAGCCACCCTACTATTCGCCAGCACCACCAATGCATGACTA 240 241 ACAGGCCAATGAGACATCCTACAAATATCTCACCCCTTCTCAATCACACTAGCCATCCTT 300 301 GCTCTCTCCCTAAAAATTGGTCTCGCCCCTCTACATACATGATTACCTGAAGTACTCCAA 360 DB35/T 18782019 5 361 GGACTAGACTTAACTACAGGACTTATTCTATCAACCTGACAGAAACTAGCACCATTCGCC 420 421 CTACTCCTTCAAATTCAACCCACCAACCCCCTAATCTTAGTGATACTCGGCATTACCTCA 480 481 ACCCTCGTTGGTGGTTGAGGAGGGCTAAACCAAACACAACTCCGAAAAATTCTAGCATAC 540 541 TCCTCCACAGCCCACTTAGGTTGAATAATTTTAATCCTCCAATTCTCCCCCTCACTGGCC 600 601 CTCCTAACCCTGGTTATGTACTTAATCATAACATCCTCAACATTCCTTGTATTTAAACTA 660 661 AACAAATCAACAAACATA 7.2.4 RYR3基因DNA条形码 鞍带石斑鱼RYR3条形码基因共846 bp，种内个体间最大遗传距离小于1%。鞍带石斑鱼RYR3基因DNA条形码序列如下：1 CTTAAACTGAAGGACCTGACGACCTCTGACAGCTTCAGAGAGTATGACCCCGACTGTAAA 60 61 GGCATTATTTCAAAGAAGGAGTTCCAGAAGTCAATGGAGAGCCAGAAGCAGTACATTCAG 120 121 TCTGAGATAGAATTCCTGCTCTCGTGCGCAGAGGCCGATGAGAATGACATGTTCAACTAC 180 181 AAGGAGTTTGTAGAGCGGTTCCACGAGCCGGCCAAAGAAATCGGCTTCAATGTGGCAGTG 240 241 CTTCTGACCAACCTGTCTGAACACATGCCACACGACGCCAGACTCGCCACCTTCTTAGAC 300 301 CTAGCAGAGAGCGTACTCAGCTACTTTGAGCCTTACCTGGGTCGCATTGAAATCATGGGC 360 361 AGCGCAAAGCGGATTGAGAGGGTGTACTTTGAGATCAGCGAGTCGAGCCGGGAGCAGTGG 420 421 GAGAAGCCGCAGGTCAAAGAGTCCAAGCGCCAGTTCATCTTTGACGTGGTCAATGAGGGC 480 481 ACGGAGAGCGAGAAGATGGAGATGTTTGTGAATTTCTGTGAGGACACCATTTTTGAGATG 540 541 CAGCTAGCCTCACAGATCTCTGAGCCAGATGCAGTTGAGCATCCTGAGGAGGAGGCTGAG 600 601 GAAGAAGCACACAGTATCCTGGACGAGTTGGCTGAAGAGGAAGAGGGCGCCCTGGAGTCT 660 661 GCCTCAGCCTTTACCACCGCATGCCGCTCAGTCAAGAAAAAGGTCGCCTCCGTCCGCCAA 720 721 ATCTTTTCTATGAAAAACGTGCGTAAGCAGTTCAAGAAAATGAAGAACCTGAGCATCAGG 780 781 GAGATTATCACCAGCTTCGTCTCCTTCTTCTGGATGCTCTTCACCGGCTTCTTCAAGGGA 840 841 ATCTAC 8 检验方法 8.1 性状检测 按照GB/T 18654.3执行。8.2 生长与繁殖测定 生长按照GB/T 18654.4执行，繁殖按照GB/T 18654.6执行。8.3 染色体的检测标准 按照GB/T 18654.12执行。8.4 DNA条形码检测 8.4.1 DNA提取 取肌肉组织剪碎，用酚氯仿方法提取基因组DNA，超纯水溶解后-20 保存备用。DB35/T 18782019 6 8.4.2 PCR扩增 鞍带石斑鱼DNA条形码基因引物序列见表1。表1 鞍带石斑鱼 DNA条形码基因引物序列 引物名称 扩增基因 引物序列（5-3）Fish F1 COI TCAACCAACCACAAAGACATTGGGAC Fish R1 COI TAGACTTCTGGGTGGCCAAAGAATCA ND2-1L ND2 AAGGGCCACTTTGATAGAGTG ND2-1H ND2 GTRAGTRYGGGGGYTTTTGCYCA RYR3 F48 RYR3 TGACAGCTTCAGAGAGTATGACCCT RYR3 R849 RYR3 GCCAGTGAAGAGCATCCAGAAGAAG 扩增反应条件：反应体积为25 L，其中含10PCR 缓冲液2.5 L，25 mmol/L Mg2+2 L，5 pmol引物各1 L，2.5 mmol/L dNTP 1 L，DNA模板25 ng，Taq酶1 U，无菌超纯水补足25 L。扩增程序为：95 2 min（95 1 min52 1 min72 1 min）30 cys72 5 min。8.4.3 序列测定 将PCR产物纯化后双向测序。9 判定规则 检验结果不符合本标准第5章至第7章任意一章要求的，则判定为不合格项，有不合格项的样品为不符合样品。A _