斑玉蕈 菌种DB42／T 1608-2020.pdf

ICS 65.020.20 CCS B 39 DB42 湖北省地方标准 DB42/T 1608 2020 斑玉蕈 菌种 Culture of Hypsizygus marmoreus 2020-12-04 发布 2021-02-04 实施 湖 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB42/T 1608 2020 I 目 次 前言.III 1 范围.1 2 规范 性引 用文 件.1 3 术语 和定 义.1 4 质量 要求.2 4.1 菌 种分 类.2 4.2 母种.3 4.3 原种.3 5 抽样、检 验、留样 和判 定.5 5.1 抽样.5 5.2 检验.5 5.3 留样.6 5.4 判定.6 6 标签、标 志、包装、运 输和贮 存.6 6.1 标 签、标志.6 6.4 贮存.7 附录A（资 料性）斑玉 蕈 母种培 养基 配方.8 附录B（资 料性）斑玉 蕈 固体原 种及 栽培 种培 养基 配方.9 附录C（资 料性）斑玉 蕈 液体菌 种培 养基 配方.10 DB42/T 1608 2020 II DB42/T 1608 2020 III 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。本文件 的某 些内 容可 能涉 及专利，本 文件 的发 布机 构不承 担识 别专 利的 责任。本文件 由湖 北省 农业 科学 院经济 作物 研究 所提 出。本文件 由湖 北省 农业 农村 厅归口 管理。本文件 起草 单位：湖北 省 农业科 学院 经济 作物 研究 所、华中 农业 大学、如意 情 生物科 技股 份有 限公司、武 汉健 业食 用菌 股份 有限公 司、湖北 彬笑 现代 农业有 限公 司。本文件 主要 起草 人：刘启 燕、王 卓仁、康 恒、边银 丙、刘 群涛、吴 珍珍、林 晖、吴 洪丽、孙 波、周洪英。本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话：027-87665821，邮 箱：；对 本文 件的有 关修 改意 见建 议请 反馈至 湖北 省农 业科 学院 经济作 物研 究所，联 系 电 话（刘启 燕）：13871579788，邮箱：。DB42/T 1608 2020 IV DB42/T 1608 2020 1 斑 玉蕈 菌种 1 范围 本文件 规定 了斑 玉蕈（Hypsizygus marmoreus(Peck)H.E.Bigelow）菌 种的 术语 和定义、质 量要 求、抽样、检验、留 样、判定 及标签、标 志、包装、运 输、贮 存等。本文件 适用 于斑 玉蕈 菌种 的生产、流 通和 使用。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB/T 191 包装 储运 图示 标 志 GB/T 12728 食 用菌 术语 GB/T 37671-2019 金 针菇 菌种 NY/T 528-2010 食用 菌菌 种生产 技术 规程 NY/T 1742-2009 食 用菌 菌 种通用 技术 要求 3 术语和 定义 GB/T 12728 及GB/T 37671 界定的 以及 下列 术语 和定 义适用 于本 文件。3.1 斑玉蕈 Hypsizygus marmoreus(Peck)H.E.Bigelow 又名：真姬菇、海 鲜菇、蟹味菇、白玉 菇等，隶属 真菌界、担子 菌门、层菌 岗、伞 菌目、白蘑 科、玉蕈属。子 实体 丛生，中 等大小，菌 盖幼 时扁 半球 形，后 稍平 展，中 部稍 凸 起，近 白色 至灰 褐色，盖 表面中央 有浅 褐色 龟裂 状斑 纹；菌 肉白 色；菌 褶近 白 色，近 直生，密或 稍稀，不等长；菌 柄较 长，表 面 白色，平 滑或 有纵 条纹，质 地脆嫩，基 部相 连或 分叉；显微 镜下 孢子 无色，光 滑，宽 椭圆 形或 近球 形。3.2 固体菌 种 solid spawn 生长在 固体 培养 料上 的菌 种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.31 3.3 液体菌 种 liquid spawn 培养基 为液 体状 态的 菌种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.30 3.4 母种 stock culture 经各种 方法 选育 得到 的具 有结实 性的 菌丝 体纯 培养 物及其 继代 培养 物。也称 一级种、试 管种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.7 3.5 DB42/T 1608 2020 2 原种 mother spawn 由母种 移植、扩 大培 养而 成的菌 丝体 纯培 养物。也 称二级 种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.8 3.6 栽培种 spawn 由原种 移植、扩 大培 养而 成的菌 丝体 纯培 养物。也 称三级 种。来源：GB/T 12728-2006，2.5.9 3.7 锁状联 合 clamp connection 一种锁 状桥 接的 菌丝 结构，是异 宗结 合担 子菌 次生 菌丝的 特征。来源：GB/T 12728-2006，2.2.5 3.8 高温圈 high temperatured line 食用菌 菌种 在培 养过 程中 受高温 或通 气不 足的 不良 影响，培养 物出 现的 圈状 发黄、发暗 或菌 丝变 稀弱的现 象。来源：GB/T 12728-2006，2.5.18 3.9 生物学 效率 biological efficiency 单位质 量培 养料 的风 干物 质所培 养产 生出 的子 实体 或菌丝 体质 量（鲜重），常 用百分 数表 示。如 风干料100 kg 产生 了新 鲜子 实体50 kg，即 为生 物学 效 率50%。来源：GB/T 12728-2006，2.1.27 3.10 种性character of variety 食用菌 的品 种特 性。一般 包括生 理特 性、农艺 性状 和商品 性状。来源：GB/T 12728-2006，2.5.4 3.11 摇瓶液 体菌 种 liquid spawn culturing by Erlenmeyer flask on a shaker 由母种 移植 到液 体培 养基 中在摇 床上 恒温 震荡 扩大 培养 而 成的 菌丝 体纯 培养 物。来源：GB/T 37671-2019，3.13 3.12 发酵罐 液体 菌种 liquid spawn culturing by fermentation tank 由摇瓶 液体 菌种 移植 到发 酵罐液 体培 养基 中恒 温培 养 而成 的菌 丝体 纯培 养物。来源：GB/T 37671-2019，3.14 3.13 通风量 ventilation volume 液体菌 种培 养过 程中 每分 钟通入 培养 基中 的无 菌空 气量。用L/min 表示。来源：GB/T 37671-2019，3.15 4 质量要 求 4.1 菌种分 类 根据来 源、繁殖 代数 与生 产目的，斑 玉蕈 菌种 分为 母种、原种、栽培 种；根 据培养 基质 的形 态，分为固体 菌种 和液 体菌 种。DB42/T 1608 2020 3 4.2 母种 4.2.1 容器规 格应 符合 NY/T 528-2010 中 4.7.1.2 的 规定。4.2.2 感官要 求应 符合 表1 规定。表1 母种感 官要 求 项目 要求 接种块大小（3 mm 5 mm)（3 mm 5 mm)菌种外观 菌丝生长量 长满斜面 菌丝体表面特征 白色、浓密，有绒 毛状气生菌 丝，表面均匀、平 整、无原基、无或少许菌皮 表面分泌物 无 菌落边缘 整齐 杂菌菌落 无 斜面背面外观 培养基不干缩，颜色均匀、无暗斑 气味 有斑玉蕈菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 4.2.3 菌丝长 满斜 面时 间：在 PDA 培养 基上，23 2 避光恒 温培 养，应 在 12 d 16 d 长满 斜面。4.2.4 母种栽 培性 状：母种 需经 出菇实 验，确证 种性 合格 后，方 可用 于扩 大繁 殖或 出售。4.3 原种 4.3.1 固体原 种 4.3.1.1 容器规 格应 符 合NY/T 528-2010 中 4.7.1.3 的 规定。4.3.1.2 感官要 求应 符合 表 2 规定。表2 固体原 种感 官要 求 项目 要求 每支母种接原种数，接种物大小 4 瓶（袋）6 瓶（袋），12 mm15 mm 菌种外观 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 菌丝洁白、浓密、生长均匀，无高温圈，无原基，无子实体，无或少许菌皮 培养基及菌丝体 紧贴瓶（袋）壁，无干缩，变软 表面分泌物 无 拮抗线 无 杂菌菌落 无 螨虫 无 气味 有斑玉蕈菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 4.3.1.3 菌丝长 满容 器时 间：采 用附 录 A 中 规定 的配 方 在 23 2 避光 恒温 培养，菌丝 长满容 器（750 ml 菌 种瓶）的 时间 为30 d 5 d。4.3.2 液体原 种（摇瓶 液体 菌种）4.3.2.1 容器规 格应 符 合GB/T 37671-2019 中4.4.1.1 的规 定。4.3.2.2 感官要 求应 符合 表 3 规定。DB42/T 1608 2020 4 表3 摇瓶液 体菌 种感 官指 标要 求 项目 要求 培养基装量 容器的40%60%母种接种块大小，接种量（5 mm 10 mm)（10 mm 15 mmm),2 块8 块 菌种外观 色泽 菌丝体白色；滤液清澈透亮 形态 有大量球状、絮状、片状菌丝体，分布均匀 杂菌 无 气味 有斑玉蕈菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 4.3.2.3 培养条 件：在附 录 B 培 养 基内，置于 摇床 上，振荡 频率 80 转/min 120 转/min，温 度 23 2，避 光培 养7 d8 d。4.4 栽培种 4.4.1 固体栽 培种 4.4.1.1 容器规 格应 符 合NY/T 528-2010 中 4.7.1.4 的 规定。4.4.1.2 感官要 求应 符合 表4 规定。表4 栽培种 感官 要求 项目 要求 每瓶原种接栽培种数量 30 瓶（袋）40 瓶（袋）菌种外观 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 洁白、浓密，生长均匀、旺盛，无高温圈 培养基及菌丝体 紧贴瓶（袋）壁，无干缩，变软 表面分泌物 允许有少量无色或浅黄色水珠 拮抗现象 无 子实体原基 无或少量 杂菌菌落 无 螨虫 无 气味 有斑玉蕈菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 4.4.1.3 菌丝长 满容 器时 间：采用 附 录A 中规 定的 配方 在23 2 避光 恒温 培养，菌 丝 长满容 器（750 ml 菌 种瓶）30 d 5 d。4.4.2 液体栽 培种（发 酵罐 液体 菌种）4.4.2.1 容器规 格应 符 合NY/T 528-2010 中 4.7.1.4 的 规定。4.4.2.2 感官要 求应 符合 表5 规定。DB42/T 1608 2020 5 表5 发酵罐 液体 菌种 感官 指标 要求 项目 要求 接种量 培养基投料量的体积比为0.05%0.1%菌种外观 色泽 菌丝体白色；滤液清澈透亮 形态 有大量球状、絮状、片状菌丝体，分布均匀 杂菌 无 气味 有斑玉蕈菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 4.4.2.3 培养条 件：在 适宜 培养 基 内，通风 量 0.5 L/min 1.2 L/min、罐压 保持 在0.02 Mpa0.04 Mpa之间，温 度17 22,培养 7 d8 d。4.5 斑玉蕈 固体 原种 及栽 培种 培养基 配方 应采 用附 录B 中规定 的配 方。4.6 斑玉蕈 液体 菌种 培养 基配 方应采 用附 录C 中规 定的 配方。5 抽样、检验、留 样和 判定 5.1 抽样 5.1.1 母种按 品种、培养 条件、接种时 间分批 编号，原种/摇瓶液 体菌种、栽 培种/发 酵罐液 体菌种 按菌种来 源、制种 方法 和接 种时间 分批 编号。按 批随 机抽取 被检 样品。5.1.2 固体菌 种的母 种、原种、栽培种 的抽样 量分 别为该 批菌种 量的 10%，5%，1%。但每 批抽样 数量不得 少于 10 支（瓶、袋）；超 过 100 支（瓶、袋）的，可进 行两 级抽 样。液体菌 种的 摇瓶 菌种 的抽样量为 每 批1 个 2 个摇 瓶，液 体菌 种罐 为每 罐 100 mL500 mL。5.2 检验 5.2.1 感官检 验 按表6 逐项 进行。表6 感官要 求检 验方 法 检验项目 检验方法 检验项目 检验方法 容器 肉眼观察 接种量 母种、原种、栽培种 肉眼观察、测量 摇瓶液体菌种、发酵罐菌种 检查生产记录 棉塞、硅胶赛、塑料盖 肉眼观察 培养料上表面距瓶（袋）口的距离 尺量 母种培养基灌入量 测量 菌种外观各项（杂菌除外）肉眼观察 母种斜面长度 测量 杂菌 肉眼观察，或用放大镜观察 母种斜面背面外观 肉眼观察 气味 鼻嗅 5.2.2 微生物 学检 验 5.2.2.1 菌丝体 形态、螨 虫检 验：检测方 法应 符 合GB/T 37671-2019 中5.1.4 的 规定。5.2.2.2 锁状联 合：检测 方法 应符 合 GB/T 37671-2019 中 5.1.1 的 规定。5.2.2.3 细菌检 验：检测 方法 应符 合 GB/T 37671-2019 中 5.1.2 的 规定。5.2.2.4 霉菌检 验：检测 方法 应符 合 GB/T 37671-2019 中 5.1.3 的 规定。DB42/T 1608 2020 6 5.2.3 菌丝长 满容 器时 间 5.2.3.1 母种：PDA 培养 基，采用 附录 A 中规 定的 配方 在 23 2 条 件 下 培养，长 满所需 天数。5.2.3.2 原种和 栽培 种:采用 附录B 中规定 的配 方任 选其 一 在23 2 培养，长 满所 需天数。5.2.4 母种栽 培农 艺性 状 将被检 母种制 作成 原种，采用附 录A中 规定的 配方，制成菌 瓶(袋)。按 照常规 方法发 菌、出 菇，根据表7 所列 项目，做 好栽 培 记录。表7 母种栽 培农 艺性 状检 验记 录 检验项目 检验结果 检验项目 检验结果 母种长满容器所需时间(d）采收产量（g/袋、瓶）原种长满容器所需时间（d）色泽、质地 栽培种长满菌瓶(袋)所需时间（d）菇形 出菇所需时间（d）菌盖直径（mm）生物学效率（%）菌柄长度（mm）5.3 留样 固体菌 种各 级菌 种应 留样 备查，留 样的 数量 应每 个 批号3 支（瓶、袋）5支（瓶、袋），于0 4 贮 存，贮存 至使 用者 在正常 生产 条件 下该 批菌 种出菇。5.4 判定 判定规 则按 质量 要求 进行。检验 项目 全部 符合 要求 时，为 合格 菌种，其 中任 何一项 不符 合要 求，均为不合 格菌 种。6 标签、标志、包 装、运输 和贮存 6.1 标签、标志 6.1.1 产品标 签 每支（瓶、袋、罐）菌种 必须贴 有清 晰注 明以 下要 素的标 签：a）产品名 称（菌种 名称、菌 株代号、类 别）；b）生产单 位；c）接种日 期；d）执行标 准。6.1.2 包装标 签 菌种包 装应 贴有 清晰 注明 以下要 素的 包装 标签：a)产品名 称（品种 名称、菌 株代号、类 别）；b)厂名、厂址、联 系电 话；c)出厂日 期；d)保质期、贮 存条 件；e)数量；DB42/T 1608 2020 7 f)执行标 准；g)菌种生 产经 营许 可证 编号。6.1.3 包装储 运图 示 按GB/T 191 的规 定，应注 明以下 图示 标志：a)小心轻 放标 志；b)防水、防潮、防 冻标 志；c)防晒、防高 温标 志；d)防止倒 置标 志；e)防止重 压标 志。6.2 包装 6.2.1 母种外 包装 采用 木盒 或有 足够强 度的 纸箱，内 填棉 花、碎 纸等 缓冲 物。6.2.2 原种、栽培 种外 包装 可采 用洁净、干 燥的 塑料 箱、编织袋、泡 沫箱 或有 足够 强度的 纸箱。6.3 运输 6.3.1 不得与 有毒、有 害、有异 味的物 品混 装混 运。6.3.2 运输工 具应 清洁、卫 生、无污染 物。6.3.3 气温 达30 以 上时，需 用 2 20 的冷 藏车 运 输。6.3.4 运输中 应有 防震、防 晒、防尘、防雨 淋、防杂 菌污 染的措 施。6.4 贮存 6.4.1 母种 在5 1 冰 箱中 贮存，贮存 期不 超 过 90 d。6.4.2 固体原 种和 栽培 种的 贮存 温度和 时间 应符 合NY/T 1742-2009 中 7.4.2 的规 定 6.4.3 摇瓶液 体菌 种、发酵 罐液 体菌种 均应 及时 使用，不 贮存。DB42/T 1608 2020 8 A A 附录A（资料 性）斑玉蕈 母种 培养 基配 方 A.1 下面给 出了 斑玉 蕈母 种培 养基配 方。马铃薯(去皮)200 g，葡 萄 糖20 g，琼 脂20 g，水1000 mL，pH 值 自然。DB42/T 1608 2020 9 B B 附录B（资料 性）斑玉蕈 固体 原种 及栽 培种 培养基 配方 B.1 阔叶树 木屑35%，棉籽壳48%，麸 皮10%，玉 米粉5%，石膏 1%，灭菌后pH 值 最佳范 围 6.0 6.5，允许范 围5.5 7.0。B.2 阔叶树 木 屑10%，玉米 芯 30%，棉籽 壳20%，麸皮12%，油 糠 15%，大豆 皮8%，玉 米粉 4%，石膏1%，灭菌 后pH 值最 佳范 围6.0 6.5，允 许范 围5.5 7.0。B.3 阔叶树 木 屑30%，玉米 芯 15%，棉 籽壳20%，麸 皮10%，油糠20%，玉米 粉4%，石膏 1%左 右，灭 菌后pH 值最 佳范 围6.0 6.5，允 许范 围 5.5 7.0。DB42/T 1608 2020 10 C C 附录C（资料 性）斑玉蕈 液体 菌种 培养 基配 方 C.1 黄豆 粉0.3%1%，蔗 糖2%3%，硫酸 镁0.03%0.1%，磷酸 二氢 钾 0.03%0.1%，其 余水，pH 值自然。C.2 玉米粉 1%，黄 豆 粉 2%，酵 母粉 0.5%，葡 萄 糖 3%，磷 酸二氢 钾 0.1%，硫 酸 镁 0.05%，其余 水，pH值自然。