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I C S 6 5.0 2 0B 6 2黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23D B 2 3/T 2 5 3 9 2 0 1 9针 叶 天 蓝 绣 球 组 培 繁 殖 技 术 规 程2 0 1 9-1 2-1 3 发 布 2 0 2 0-0 1-1 2 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 2 3/T 2 5 3 9 2 0 1 9I前 言本 标 准 依 据 G B/T 1.1-2 0 0 9 的 编 写 规 则 起 草。本 标 准 由 黑 龙 江 省 科 学 院 提 出。本 标 准 起 草 单 位：黑 龙 江 省 科 学 院 自 然 与 生 态 研 究 所、五 常 市 桂 丹 园 艺 有 限 公 司。本 标 准 主 要 起 草 人：曲 彦 婷、孟 凡 娟、马 游、唐 焕 伟、陈 菲、李 黎、韩 辉、熊 燕、刘 畅、张 革 燕、张 悦、李 虹、张 天 姝。D B 2 3/T 2 5 3 9 2 0 1 91针 叶 天 蓝 绣 球 组 培 繁 殖 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 针 叶 天 蓝 绣 球（P h l o x s u b u l a t a L.）组 培 繁 殖 的 环 境 与 设 备 消 毒、培 养 基 配 制、外植 体 选 择 与 消 毒、外 植 体 接 种、继 代 增 殖、壮 苗 培 养、生 根 培 养、培 养 条 件、移 栽 及 生 产 档 案。本 标 准 适 用 于 针 叶 天 蓝 绣 球 的 种 苗 生 产。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。G B/T 6 0 0 1 育 苗 技 术 规 程L Y/T 1 8 8 2 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程N Y/T 2 3 0 6 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术 规 程3 环 境 与 设 备 消 毒3.1 接 种 室 消 毒接 种 室 消 毒 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 8.6 进 行。3.2 超 净 工 作 台 消 毒超 净 工 作 台 消 毒 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 8.5、8.6 进 行。3.3 培 养 室 消 毒培 养 室 消 毒 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 8.7 进 行。3.4 接 种 器 具 消 毒接 种 器 具 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 8.4 进 行。4 培 养 基 配 制4.1 母 液 配 制培 养 基 母 液 配 制 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 7.3 执 行。4.2 培 养 基 配 制4.2.1 培 养 基 配 方培 养 基 配 制 成 分 如 下：D B 2 3/T 2 5 3 9 2 0 1 92a)接 种 培 养 基：M S N A A 0.5 m g/L+6 B A 1 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L 琼 脂 粉 5 g/L，p H 值 6.0。b)继 代 增 殖 培 养 基：M S+N A A 0.5 m g/L+6 B A 2 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L 琼 脂 粉 5 g/L，p H 值 6.0。c)壮 苗 培 养 基：M S+蔗 糖 3 0 g/L 琼 脂 粉 5 g/L，p H 值 6.0。d)生 根 培 养 基：1/2 M S+I B A 1 m g/L N A A 0.5 m g/L+蔗 糖 3 0 g/L 琼 脂 粉 5 g/L+活 性 炭 3 g/L，p H 值 6.0。4.2.2 培 养 基 配 制 方 法培 养 基 配 制 方 法 按 N Y/T 2 3 0 6-2 0 1 3 中 7.4 执 行。4.3 培 养 基 灭 菌 及 保 存培 养 基 灭 菌 及 保 存 方 法 按 L Y/T 1 8 8 2-2 0 1 0 中 4.2 进 行。5 外 植 体 选 择、消 毒 与 接 种5.1 外 植 体 选 择春 季 从 生 长 健 壮 无 病 虫 害 的 母 株 上 剪 当 年 生 的 粗 壮 嫩 茎 作 为 外 植 体，应 晴 天 进 行。5.2 外 植 体 消 毒将 外 植 体 置 于 5 0 0 m L 烧 杯 中，烧 杯 口 套 纱 网，加 2 滴 4 洗 洁 精，先 用 自 来 水 浸 泡 8 m i n 1 0 m i n 后，再 冲 洗 3 0 m i n，倒 净 水，在 超 净 工 作 台 上 用 7 5%酒 精 清 洗 1 0 s 1 5 s 后 取 出，浸 泡 于 0.1%氯 化 汞 溶 液 中6 m i n 8 m i n，轻 摇，倒 掉 消 毒 液 后 用 无 菌 水 冲 洗 3 次 5 次，再 用 无 菌 滤 纸 吸 干 表 面 的 水 分 备 用。5.3 接 种 与 诱 导 培 养将 消 毒 后 的 外 植 体 切 成 1 c m 2 c m 的 茎 段，每 段 至 少 带 有 1 个 2 个 叶 芽，将 切 好 的 外 植 体 接 种 到诱 导 培 养 基 中，注 明 接 种 物 名 称 和 日 期，培 养 2 1 d 2 8 d，记 录 诱 导 情 况。6 继 代 增 殖、壮 苗 与 生 根 培 养6.1 继 代 增 殖 培 养切 分 诱 导 分 化 的 不 定 芽 接 入 继 代 增 殖 培 养 基 中，约 8 个/瓶，培 养 2 8 d 3 5 d，每 个 茎 段 萌 发 出 5 个 8 个 不 定 芽，分 割 新 长 出 的 不 定 芽，可 按 需 求 重 复 继 代。6.2 壮 苗 培 养切 取 继 代 增 殖 培 养 中 长 1.0 c m 以 上 的 不 定 芽，转 接 至 壮 苗 培 养 基 中，约 8 个/瓶，培 养 1 4 d 2 1 d。6.3 生 根 培 养壮 苗 培 养 基 中 组 培 苗 长 到 2.0 c m 以 上 高 度 时，将 小 苗 转 入 生 根 培 养 基 中，约 1 0 株/瓶，培 养 7 d 1 0 d，当 小 苗 基 部 长 出 健 壮 的 不 定 根 3 条 以 上，大 部 分 苗 根 长 为 0.5 c m 2.0 c m 时，即 可 进 行 移 栽。7 培 养 条 件无 菌 培 养 室 白 天 的 温 度 控 制 在 2 3 2，夜 间 不 低 于 1 5，相 对 空 气 湿 度 控 制 在 6 0%8 0%，光 照 强度 为 2 0 0 0 L u x 3 0 0 0 L u x，光 照 时 间 为 1 2 h/d 1 4 h/d，黑 暗 时 间 为 1 0 h/d 1 2 h/d。8 移 栽D B 2 3/T 2 5 3 9 2 0 1 938.1 炼 苗将 生 根 培 养 瓶 转 移 到 过 渡 培 养 间，半 开 瓶 口 1 d 2 天 后，敞 开 瓶 口 炼 苗 2 d 3 d 后 可 移 栽。8.2 移 栽 基 质 的 制 备基 质 选 择 草 炭、珍 珠 岩 和 蛭 石 混 合，体 积 比 约 为 2:2:1，栽 植 前 用 0.5%的 高 锰 酸 钾 溶 液 浇 透 消 毒 2 4 h。8.3 组 培 苗 移 栽在 温 室 取 出 生 根 的 小 苗，用 清 水 洗 净 根 部 培 养 基，清 洗 时 应 避 免 伤 根。将 洗 净 的 生 根 苗 移 栽 至 装 基质 的 1 2 8 穴 盘，移 栽 后 压 实 小 苗 周 围 的 基 质，浇 透 水，覆 7 0%遮 阳 网。8.4 移 栽 苗 管 理保 证 温 室 内 幼 苗 水 分 供 需 平 衡，育 苗 水 分 管 理 按 G B/T 6 0 0 1 执 行。移 栽 5 d 7 d 后，去 掉 遮 阳 网，浇1/2 M S 营 养 液 1 次，温 度 2 2 2 8，相 对 空 气 湿 度 6 0%8 0%，温 室 环 境 应 保 持 清 洁，2 1 d 2 8 d 新 生 根系 长 出，将 穴 盘 苗 装 入 营 养 钵，常 规 管 理 即 可。9 生 产 档 案建 立 针 叶 天 蓝 绣 球 组 织 培 养 繁 殖 技 术 档 案，包 括 繁 殖 培 养 条 件、培 养 基 配 制、外 植 体 接 种、增 殖 数量、种 苗 驯 化 移 栽 及 管 理 等。
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