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ICS 65.0 20.20 B 38 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 1857 2018 岩黄连组培苗生产技术规程 Techinical regulation of tissue culture seedling production on Corydalis saxicola Bunting 2018-10-20 发布 2018-11-20 实施广西壮族自治区质量技术监督局 发布 DB 45/T 1 85 7 20 18 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引 用文件.1 3 组培.1 4 移栽育苗.2 5 出圃.3 6 运输.3 7 生产档案.3 附录 A（规范 性附录）培养基配方.4 DB 45/T 1 85 7 20 18 III 前 言 本标准按照G B/T 1.1 200 9 给出的规 则起草。本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。本标准由广西卫生标准化技术委员会归口。本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园。本标准主要起草人：李翠、李林轩、张占江、郭晓云、韦莹、王一诺。DB 45/T 1 85 7 20 18 1 岩黄连组培苗生产技术规程 1 范围 本标准规定了岩黄连（C or yd al is sa x ic ol a B un ti n g）组培苗的组培、移栽育苗、出圃、运输和 生 产档案等的要求。本标准适用于广西境内岩黄连组培苗的生产。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 3 09 5 环 境空气质量标准 GB 5 08 4 农 田灌溉水质标准 NY/T 3 93 绿色食品农药使用准则 国家药品监督管理局第 3 2 号令（2 00 2 年）中药 材生产质量管理规范（试行）3 组培 3.1 外植体选材 晴天上午9 10时采集为 宜。选择健 壮、无病虫危害的岩黄连植株，选取2 c m3 c m 茎尖为外植体。记录采集号、采集地点、生长环境、采集时间、采集人，建立外植体采集信息档案，记录表见表1。表1 岩黄连取材记录表 序号 采集号 采集地点 生长环境 采集时间 采集人 备注 3.2 外植体灭菌 3.2.1 材料预处理 用3%表面去 污剂将外植体搅拌1 m in、再用棉花擦洗茎尖表面污垢，线状清水冲洗8 mi n1 0 mi n，置于超净台上。3.2.2 灭菌 取岩黄连茎尖为外植体；用75%乙醇浸 泡30 s，无菌水冲洗1遍，浸 泡 在0.1%的 HgC l 2 溶液 灭菌8 m in 12 mi n（添加 2滴吐温-20）、无菌水冲洗35次后 放 于灭菌好的不锈钢碟子上。DB 45/T 1 85 7 20 18 2 3.3 接种 在 超净台上，切 去岩黄连茎尖 伤 口和 灭菌 剂 接触部分，保留 茎尖长1 cm 1.5 cm，茎 尖 朝 上，接种到诱导 培养基中，培 养 基 按附录A 中A.1 的 要 求配 制，每瓶接种 35 个，拧紧瓶盖，培养30 d3 5 d。3.4 培养条件 光 照 强度 为1 50 0 l x1 800 l x，培养 温度 为23 27，每 天 光 照时间10 h 1 2 h。3.5 诱导培养 在 超净 台上 将 已灭 菌后 的茎尖 插入诱 导 培养 基中 进 行培 养,3 0 d 3 5 d 接种到 增殖 培 养 基，培养基按 附 录 A 中 A.2 的要求配 制。3.6 增殖培养 将长 势良好 的无 菌 苗 剪切成 1.0 cm 1.5 c m长的不 定 芽接入继代增殖 培养基中培养，1 0 d 15 d长 出 丛 生 芽，培养30 d3 5 d 接种到 壮苗生 根 培养基，培 养 基 按 附 录 A 中 A.3 的要 求配 制。3.7 生根培养 将 增殖 培养 后叶片 展开、生长 健壮、高 3 cm5 cm的无 根 苗 剪切成 带叶 片 的 芽 苗，接入 生 根 培养 基中培养。当 苗 高 5 cm 时，移 至大棚炼 苗。4 移栽育苗 4.1 苗圃地 选择 背风向阳、排 灌 良好 的地方为出圃地，配 备遮阳网 和 防 虫 网。环境空气质量应 符合 GB 3 0 95 的规定，灌溉水的使用应 符合 GB 5 0 84 的规定。4.2 移栽基质 pH 5.5 pH 6.5的 泥炭土 和 蛭石，且含 量 比 为1:1，对基质 淋施杀菌 剂。4.3 移栽容器 选择规 格 为6 0 孔 的 穴盘 为移 栽 容器。4.4 炼苗 选择生长健壮的 带根瓶 苗，在室温 为25 的 室 内 炼 苗2 d3 d 后打开瓶盖，在瓶 中 加入 清水，再 炼 苗3 d 5 d，开盖后 注 意喷雾保湿。4.5 移栽 宜 在春季、初夏或秋季，将组培苗洗 掉根部 培养基，单株栽 入穴盘 基质中，淋透 定 根 水。4.6 日常管护 4.6.1 环境控制 温度 18 30；湿度 60 80；透光率 为2 0 30。DB 45/T 1 85 7 20 18 3 4.6.2 水肥管理 生长季节每月施0.10.5 含氮叶 面肥12次，保持土壤湿润，夏季应多喷叶面肥，保持空气适 度湿度60 80。4.6.3 病虫害防治 按照NY/T 3 9 3的要求 执行。5 出圃 苗高8 cm，茎杆粗壮、叶色浓绿、根数4根，根长4 cm，具3 张以上完全叶的植株可出圃，出 圃苗按苗高整齐分装入规格统一、高出苗顶面5 cm 以上的竹 筐或塑料筐内，并及时浇透水，贴上有品种 名称、生产日期、生产单位名称及地址的标签。6 运输 有序叠放，不得过度挤压、随意堆叠；长途运输应有防风、防晒、防雨措施。7 生产档案 按照国家药品监督管理局第32 号令（200 2 年）中第九章的要求执行，并对组培苗生产的各 环 节进行记录，记录表见表2。表2 岩黄连组培苗生产记录表 序号/批次 数量/株 日期 施肥 病虫害防治 负 责 人员 炼苗 移 栽 出圃 种类 施用时间 浓度 方法 病虫害种类 用药名称 施用时间 浓度 施 药 方法 A DB 45/T 1 85 7 20 18 4 A B 附 录 A（规范性附录）培养基配方 A.1 诱导培养基 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IA A 白糖 3 琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。A.2 增殖培养基 MS+0.6 mg/L 6-BA+0.2 mg/L I BA+0.2 mg/L I AA 白 糖 3%琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。A.3 生根培养基 1/2 MS+0.5 mg/L I BA+0.3 mg/L N AA+0.5%活 性 碳白 糖 3%琼脂 4.6 g/L，pH 5.8。中华人民共和国广西地方标准 岩黄连组培苗生产技术规程 DB45/T 1857 2018 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究
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