番木瓜组培苗生产技术规程DB45／T 1963-2019.pdf

ICS 65.0 20.20 B 31 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 19632019 番木瓜组培苗生产技术规程 Technical regulations of Carica papaya L tissue culture seedling production 2019-05-31 发布 2019-06-30 实施广西壮族自治区市场监督管理局发布DB 45/T 1 96 3 20 19 II 前 言 本标准根据 G B/T 1.12 0 09 给出的规 则编写。本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所、广西植物组培苗有限公司。本标准主要起草人：林茜、韩晓华、高营营、黄天琨、张露、潘永杰、牟海飞、张进忠、王艳、林贵美、罗松、谢宏昭、韦泽昭。DB 45/T 1 96 3 20 19 1 番木瓜组培苗生产技术规程 1 范围本技术规程规定了番木瓜（Ca ri ca p ap ay a L.）组 培苗生产的术语和定义、外植体要求、组培苗生 产、营养杯苗育苗技术、病虫害及其防治、出圃、包装及运输。本技术规程适用于广西番木瓜组培苗生产。2 术语和定义下列术语和定义适用于本规程。2.1 番木瓜 C ari ca p ap ay a L.又称木瓜、乳瓜、万寿果，番木瓜科、番木瓜属大型多年生草本植物。2.2 外植体 e xplan t 用于接种培养的各种离体植物材料，本规程中的外植体为番木瓜嫩芽茎尖。2.3 番木瓜组培瓶苗 C ar ica p ap ay a L.ti ss ue c ult ur e bo tt le se ed li ng s 通过植物组织培养技术使之在培养容器内生长且达到整齐、均一、健壮的番木瓜组培继代苗。2.4 番木瓜组培袋苗 C ar ica p ap ay a L.ti ss ue c ult ur e ba g see dl in gs 已达室外炼苗标准且根、茎、叶俱全的袋装番木瓜组培小植株。2.5 番木瓜组培营养杯苗 Ca ri ca p ap aya L.ti ss ue cu lt ur e nut ri ti ve c up se ed li ng s 将组培袋装番木瓜无菌小植株植入营养杯中，经室外育苗，达可出圃供大田定植的番木瓜杯苗。2.6 继代培养 su bc ultu re 在培养过程中，将培养物周期性地转接在新鲜培养基上进行再培养，从而使之得以成倍增殖的过程。2.7 生根培养 ro ot in g cu ltu re DB 45/T 1 96 3 20 19 2 将继代增殖苗转移至生根培养基中，诱导根的分化和根系的形成，最终发育成完整小植株的培养过 程。2.8 玻璃化 v itr if ic at io n 试管苗呈半透明水渍 状，外 观 形 态异常 的 现象。2.9 番木瓜病毒病 C ar ic a p ap ay a L.vi ru s di se ase 又称番木瓜 环斑花 叶病（PR SV（P apa ya r in gs pot v ir us），是 番木瓜的一种 毁灭 性病害。3 外植体要求 3.1 种质园的选定 品 种 纯正，无病虫害的番木瓜 母 本 园。3.2 外植体的选取 取 自 母 本 园 农艺性 状表现优良、无番木瓜 环斑花 叶病病 毒、经多年 筛选 的 品 种 纯正、高产成年植株 为 采 芽 母 株，以 当 年生嫩芽为外植体。3.3 外植体的消毒 用 市售洗涤液（洗衣液、洗洁精等）对 外植体进行前期 清洁处理，随 之在无菌 条件 下 依次 以75 酒 精溶液浸泡 30 s、5 次氯 酸钠溶液浸泡 3 mi n、0.1 氯 化 汞溶液浸泡 10 m in消 毒（每 种 消毒液浸泡后，均 需 用无菌水 冲洗 外植体4 5 次），获 得无菌外植体。3.4 外植体的接种 将无菌外植体在 实 体 显微镜 下 挑取 1 mm 大小茎尖 生长 点，接种在诱导培养基中。3.5 病毒检测 无菌外植体经继代培养增殖一代 后，对母 株及其 相应 无菌外植体进行 P RSV 病 毒检测，经 检测 无 PR SV 病 毒 的植株增殖芽方可继 续 进行继代培养。4 组培苗生产 4.1 番木瓜组培瓶苗 将外植体组 培诱导 获 得的 正常、健 壮、无 玻璃 化 丛 芽进行 继代培养，切 成2 3芽/丛 转接到 瓶 装新 鲜培养基上，以6 丛/瓶 为 宜，培养 温度 26 2、光照强度 1 50 0 lx 3 00 0 lx、增 殖系 数 2.0 2.5、继代周期18 d 22 d。组培 瓶 苗质量要求 参见 附录A。4.2 番木瓜组培袋苗 DB 45/T 1 96 3 20 19 3 选择叶色浓绿正常、茎秆粗壮、枝叶舒展、株高1.5 cm 3.0 cm 的组培瓶 苗进行生根培养。将丛苗 切成单株，6株/袋，高度均匀摆放。培 养 温度26 2、光 照强度1 5 00 lx 3 0 00 lx，袋苗培养5 d 7 d有根生成，培养周期以10 d15 d 为宜。组培袋苗质量要求参见附录A。4.3 增殖代数 增殖代数控制在12代内。5 营养杯苗育苗技术 5.1 育苗时期 春季宜在3月 5月，夏秋 季宜在8月 11月。5.2 育苗条件 5.2.1 温度及光照 番木瓜育苗温度15 32，最适温度 25 30；光照强度5 00 0 lx 10 00 0 lx。5.2.2 基质 应保湿、疏松、透气，以草炭：园土：河沙：有机肥=5:3.5:1:0.5 的微酸 性至中性基质为宜。5.2.3 水分 培养基质宜保持湿润、不积水，含水量应控制在最大持水量的 70。5.3 育苗管理 5.3.1 基质与育苗杯的处理 将装好基质的育苗杯淋透水后，用多菌灵1 00 0倍 液+农用链霉 素 2 0 00倍 液喷淋杀菌。5.3.2 假植 将经炼苗驯化后的组培袋装生根苗用清水洗净基部培养基，以5 000 倍 高锰酸钾溶液浸泡消毒 20 s，装杯假植。5.3.3 假植期管理 假植后淋定根水，用多菌灵1 0 00倍 液+农用链霉 素2 0 00倍液喷 淋 植株叶面，搭小拱棚并用薄膜覆盖 密封。假 植 后 3 d5 d，在棚顶薄膜上 打 小 孔 透 气，每 天 依次扩大小孔开口面积，1 5 d后可 初 次打开拱棚两侧薄膜，1 7 d后全部打 开，若中午强光影响小苗正常生长，可适度盖膜保湿，避免小苗叶片失水。小 苗管理期内应特别注意遮阳工作，光照强度严格控制在5.2.1所提范围 内。待苗成活后，可 逐步增加光照，进 入 正常管理，每 7 d淋 水肥（N:P 2 O 5:K 2 O=15:15:15）一次，每 5 d 7 d喷 杀 菌药（多菌灵 1 00 0 倍 液+农用 链霉素 2 000 倍 液）一次，每 15 d喷 杀 虫剂一次。6 病虫害及其防治 DB 45/T 1 96 3 20 19 4 6.1 病害 育苗中出 现 的病害主要有茎 腐 病及 炭疽 病。防治方法 参见 附录B。6.2 虫害 育苗中出 现 的虫害主要有叶 蛾、红蜘蛛。防治方法 参见 附录B。7 出圃 7.1 杯苗规格 番木瓜组培 营养杯苗的 出圃规 格 要 求无病虫害、株高以1 5 cm 为 宜、叶 片 5 7张、根系 正常并盘 绕住 营养杯中基质。番木瓜组培苗生产工艺流程图 参见 附录C。8 包装、运输及贮藏 8.1 产品包装 将达到出圃 规 格 的营养 杯苗装入 打 有透 气孔 的 泡沫箱 内，60株/箱，每件 包装 箱 内附 含 标 签，标 签 内容包 括品 种、种苗规 格、数 量、检验证书、生产单位、出 厂或 出圃 日 期 等信息。8.2 产品运输 组培营养杯苗装 车时务必 小 心轻放，运输 车辆应具备车篷，并保证 通 风 透 气，运输中 避免日晒雨淋，运输 时间 以2 d 内为 宜。8.3 产品贮藏 番木瓜组培营养杯苗在出 厂（圃）包装 后应 及 时 在 当日安排 运输，到达 目 的地 后立刻卸车，放置 在 通 风阴凉处，打开 包装，及 时 种植。如不能按时 定植，应放 于通 风、有 漫反射光线 的 荫棚，适 当保湿保 温，存放时间不超 过7 d。DB 45/T 1 96 3 20 19 5 A A 附 录 A（资料性附录）番木瓜组培苗质量要求 番木瓜组培苗质量要求见表 A.1。表A.1 番木瓜组培苗质量要求 规格 项目 指标 规格 项目 指标 组 培 瓶 苗 品种纯度 98 组 培 袋 苗 品种纯度 98 真菌污染 无 真菌污染 无 细菌污染 无 细菌污染 无 培养代数 13 茎段形态 舒展 培养时间 12 个月 叶片颜色 青绿 叶柄形态 舒展 叶脉颜色 黄绿 叶片形态 舒展 株高（cm）34 茎部颜色 黄绿 叶片数量 3 叶 叶片颜色 翠绿 根数 4 条 玻璃化 无 根系形态 白皙无膨化 变异率 3 变异率 3 DB 45/T 1 96 3 20 19 6 B B 附 录 B（资料性附录）番木瓜育苗期病虫害防治方法 番木瓜育苗期病虫害防治方法 见表 B.1。表B.1 番木瓜育苗期病虫害防治方法 病虫害种类 防治方法 备注 茎腐病 金雷多米尔 800 倍液每 15 d 喷施一次 下午 17:00 后 喷施 炭疽病 大生（代森锰锌）1 000 倍液每 15 d 喷施一次 叶蛾 棉铃虫核形多角体病毒 1 000 倍液喷施叶面一次 下午喷施 红蜘蛛 阿维菌素 1 000 倍液喷施 DB 45/T 1 96 3 20 19 7 附 录 C（资料性附录）番木瓜组培苗生产工艺流程图 番木瓜组培苗生产工艺流程图见图 C.1。外植体（1代芽）PRSV病毒检测继代培养（丛生芽）炼苗及育苗生根培养（切割分株）出圃大 田种植 消毒灭菌 诱导培养外植体（嫩芽）脱病母本园（隔离区）优良母株 图 C.1 番木瓜组培苗生产工艺流程图 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 中华人民共和国广西地方标准 番木瓜组培苗生产技术规程 DB45/T 1963 2019 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究