资源描述
ICS 65.020.01 B23 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3863 2020 甘薯抗 茎 线虫病鉴 定技术规 程 Technical regulation for evaluation on sweetpotato resistance to stem nematode disease 2020-10-13 发布 2020-11-13 实施 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB32/T 3863-2020 I 前 言 本 标准 按 照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本 标准 由江 苏徐 州甘 薯研 究中心 提出。本标准 有 江 苏省 农作 物标 准化技 术委 员会 归口。本 标准 起草 单位：江 苏徐 州甘薯 研究 中心。本 标准 起草 人：孙厚 俊、谢逸萍、张 成玲、杨 冬静、徐振、赵 永强、马 居奎、谢睿 寰、唐伟、孙井康。DB32/T 3863-2020 1 甘薯 抗 茎 线虫病鉴 定技术 规程 1 范围 本 标准 规定 了甘 薯品 种（系）对 茎线 虫病 抗性 鉴定 的鉴定 方法、抗性 评 价标 准 和鉴 定记 载表 格。本 标准 适用 于甘 薯品 种（系）对 茎线 虫病 抗病 性的 田间自 然诱 发鉴定 和 室内 接种 鉴 定。2 规范性 引用 标准 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日 期的引 用文 件，仅注 日期 的 版本适 用于 本文 件。凡是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有 的修改 单）适用 于本 文件。GB 4406 种薯 GB 7413 甘薯 种苗 产地检 疫规程 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 感病 对 照品 种 susceptible control variety 为检验 试验 的可 靠性，在 品种 抗 病性 鉴定 时附 加 的 已知抗 性 为 感病 的品 种，本标准 中感 病对 照 品 种为栗子 香。3.2 人工接 种鉴 定 evaluation of artificial inoculation 用人工 繁殖 或 收 集病 原线虫，按一 定量 接种，创造 发 病条件，根据 茎线 虫病 发 病程度 确定 品种 抗病性。3.3 高温愈 合 heat treated to wound healing 在甘薯 入窖 初期，采 用人 工加温 方法 促进 伤口 迅速 愈合的 一种 措施。3.4 相对病 情指 数 将 供试 品种（系）的 病情 指数与 高感 对照 病情 指数 进行比较，经过 公式 计算 而换算 出的 病情指数。3.5 体积 比 DB32/T 3863-2020 2 人工 接 种鉴 定时 茎线 虫侵 染 的体 积与 薯块 体积 的比 值。4 鉴定方 法 4.1 自然 诱发 鉴定 4.1.1 病圃选 择 选择排 灌方 便，肥力 中等，甘薯 茎线 虫病 发生 较重 且均匀 的田 块 作 为鉴 定圃。4.1.2 薯苗准 备 将符合GB 4406 要求 的种薯 在无病 苗床 排种 育苗，将 待鉴定 品种 薯苗 离苗 床土 层3 cm 5 cm 剪下，长度20 cm 25 cm。外寄 鉴定材 料应 按照GB 7413 要 求进行 检疫。每 品种 剪取 三组薯 苗，每组6 株8株，按名单 编号 分别 挂上 名称、编号、试 验重 复的 牌子，备用。4.1.3 栽种及 管理 5月上 中旬 起垄 栽种，垄 宽75 cm 85 cm，每 垄划 分 成不同 的小 区，小 区之 间 留隔离 部分50 cm。采用 字形 方式 栽种，试 验 设3次 重复，随 机区 组排 列，每重复 供 试品 种（系）6 株8 株，株距23 cm 25 cm，选用 栗子 香 为 高感 对照品 种，每 隔10个 鉴定 品种（系）栽种 栗子 香一 垄，栽 种后 正常 管理。4.1.4 病情调 查与 分级 10 月中 旬 进 行调 查薯 块发 病情况。人 工将 薯块 刨出，用刀 将薯 块横 切两 刀，目测线虫 侵 染的 面 积，根据侵 染横 截面 积 进 行分 级，每 个薯 块均 需调 查，记载发 病情 况。分级 标准 如下：0 级：无病；1 级：0%为害 面积 占薯 块横切 面积 比率 25%；3 级：25%为害 面积 占薯 块横切 面积 比率 50%；5 级：50%为害 面积 占薯 块横切 面积 比率 75%；7 级：75%为害 面积 占薯 块横切 面积 比率 100%。4.1.5 病情指 数 及 防治 效果 计算 依 据病 情调 查情 况，按式（1）计算 病情 指数。式中：DI-病情指数；Ni-第 i 病害级别 的薯块 数；i-为害级别值；M-调查的总 薯块 数。依据病 情指 数结 果，按式（2）计算 相对 病情 指数。相 对病 情指 数 精 确至 0.1，对 照品 种 病 情指 数 为 鉴 定圃中 所有 对照 的平 均 病 情指数。4.1.6 鉴定有 效性 判断 田间鉴 定对 照品 种的 平均 病情指 数大 于 60，鉴定 结果 判定 有效。DB32/T 3863-2020 3 4.2 室内 接种 鉴定 4.2.1 病原 线虫 分离 及消 毒 人工采 集病 薯块，采 用贝 曼 漏斗法 分离 线虫。将 分离 好 的线虫 用 400 目 筛网 过滤，筛网内 收集 线虫，用灭菌 水冲 洗 3 次，放 入 0.1%青霉 素+0.1%链霉 素的 消毒液 中，4 环境 放置 12 h，用 400 目 筛网 过滤，灭菌水 冲 洗 3 次，灭 菌水 配成 200 条/ml 的线虫 悬浮 液备用。4.2.2 鉴定 材料 准备 选用大 小300 g 400 g薯 块 作为鉴 定用 薯块，每 个供 试品种（系）选3块，洗 净 晾干后 编号 备用。选用栗子 香为 高感 对照 品种。鉴定 薯块 随机 或顺 序排 列在80 cm 40 cm 的塑料 筐 内，每 筐放 置对 照品 种 薯块2个 3个，每 份鉴 定材 料重复3次，每 重复2 个薯 块。接 种前 用75%酒 精对 薯块表 面进 行消 毒处 理。4.2.3 接种 材料 接种时 需要5 mm 螺纹打孔 器，12 cm 玻璃 培养 皿若 干 套，手 术刀、手 术镊 各1 把，1 ml 移液枪一 支及枪头 若干，酒 精灯1只，电磁搅 拌器1台。将 打孔 器、培养 皿、烧杯、手 术刀、手术 镊灭 菌后 备用。4.2.4 接 种方 法 用打孔 器垂 直在 薯块 中部 打孔，深度 至薯 块中 下 部，用移 液枪 将1 ml 配好的 线虫悬 浮液 加入 孔 中，将打出 的薯 条切 除下方1.5 cm，再用剩 余薯 条 封 住孔 口，用融 化的 石蜡 密封 孔 口缝 隙，放入 用75%酒精消毒过 的塑 料筐 内。接种 后将筐 置于26 28 鉴 定室内 保湿 培养。线 虫悬 浮液应 处于 搅拌 状态，且每打孔 一个 薯块 后 打 孔器 需用酒 精灯 消毒。4.2.5 病情 调查 接 种后45 d 调查 薯块 发病情 况。先 将薯 块沿打 孔部位 横切，分别 量取横 切面薯 块直 径和 线 虫 侵 染 直径，再 将薯 块沿 中心 纵切，量取 薯块 纵切 面的 薯块 长度和 线虫 侵染 长度。4.2.6 发病 体积 比计 算 依据病 情调 查结 果，按式（3）计算 茎线 虫病 发病 体 积 比：按式（4）计算 相对 比：品种（系）体积 比 精 确至 0.1%。5 抗性评 价 标 准 5.1 自然 诱发 鉴定 评价 标 准 根据 相 对病 情指 数 评 价甘 薯茎线 虫病 抗 侵 入性，将 甘薯品 种（系）划分 为免疫、高抗、中 抗、高感，4个类 型，评定 标准 如下：免疫：相对 病情 指数 为 100；高抗：70 相 对病 情指 数100；中抗：相 对病 情指 数70；高感：相 对病 情指 数30。DB32/T 3863-2020 4 5.2 室内 接种 鉴定 评价 标准 根据 品 种（系）侵染 比评 价甘薯 茎线 虫病 抗扩展 性，将甘 薯品 种（系）划分 为免疫、高 抗、中 抗、高感，4个 类型，评 定标 准 如下：免疫：相对 体积 比 100%高抗：70%相对 体积 比 100%；中抗：30%相对 体积 比 70%；高感：相 对体 积比 30%。6 鉴定记 载表 格 甘薯抗 茎线 虫病 鉴定 记载 表格见 表1 和表2。表1 甘薯抗 茎线 虫病 鉴定 记载 表（自 然诱 发鉴 定）编号 品种（系名称）重复 病 情 级 别 病情指数 相对病情指数 平均相对病指 抗性评价 0 1 3 5 7 栽种日期：调查日期：鉴定人（签字）：表2 甘薯抗 茎线 虫病 鉴定 记载 表（室 内接 种鉴 定）编号 品种（系名称）重复 发病情况（cm）体积比 相对体积比 平均相对体积比 抗性评价 薯块 直径 病斑 直径 薯块 长度 病斑 长度 接种日期：调查日期：鉴定人（签字）：_
展开阅读全文