腐植酸含量快速检测技术规程DB21／T 3239—2020.pdf

ICS 65.020.20 B 05 DB21 辽宁省地方标准 DB21/T 3239 2020 腐植酸含 量快速检 测技术规 程 Technical specification for rapid detection of humic acid content 2020-03-30 发布 2020-04-30 实施 辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB21/T 3239 2020 1 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的 规 则编 写。本标准 由辽 宁省 农 业 农村 厅 提出 并归 口管理。本标准 起草 单位：辽 宁省 农业科 学院、辽 宁顺 屹农 业科技 有限 公司。本标准 起草 人：郝晓 莉、陈芳、张馨 予、李丽 娜、卜庆状、詹 德江、王 在亮、邢华、李 晴晴、郭 书立、郝 明。本标准 发布 实施 后，任何 单 位和个 人如 有问 题和 意见 建议，均可 以通 过来 电和 来 函等方 式进 行反 馈，我们将 及时 答复 并认 真处 理，根 据实 际情 况依 法进 行评估 及复 审。归口管 理部 门通 讯地 址：辽 宁省农 业农 村厅（沈阳 市和 平区太 原北 街2 号），联系 电话：024-23447862 标 准起 草单 位通 讯地 址：辽宁省 沈阳 市沈 河区 东陵84 号，联系 电话：024-31029902 DB21/T 3239 2020 2 腐 植酸含 量快速检 测技术 规 程 1.范围 本标准 规定 了矿 物源 总腐 植酸、可溶 性腐 植酸、游 离腐植 酸的 快速 测定 方法。本标准 适用 于矿 物源 腐植 酸原料（风 化煤、褐 煤和 泥炭）中总 腐植 酸、游离 腐植酸 含量 和腐 植酸 盐制品中 的可 溶性 腐植 酸含 量的快 速测 定。2.规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分析 实验 室用 水规格 和试 验方 法 GB/T 8170 数值 修约 规则 与极限 数值 的表 示和 判定 HG/T 2843 化肥 产品 化 学 分析常 用标 准滴 定溶 液、标准溶 液、试剂 溶液 和指 示剂溶 液 GB/T 34766 矿 物源 总腐 植 酸的测 定 GB/T 35106 矿 物源 游离 腐 植酸含 量的 测定 GB/T 35107 矿 物源 腐植 酸 肥料中 可溶 性腐 植酸 的测 定 3.试剂 和 材料 3.1 实验用 水 本标准 所用 水应 符 合 GB/T 6682 中三 级水 的规 定。3.2 试剂 所用试 剂 及 溶液 的配 制，在未注 明规 格和 配制 方法 时，除 非另 有说 明，均指 分析纯 试剂。实 验中 所使用的 标准 溶液，按HG/T 2843 规 定制 备。1.2.DB21/T 3239 2020 3 3.3.1.3.2.3.2.1.硫酸（H2SO4），=1.84 g/mL 3.2.2.硫酸溶 液，c（H2SO4）=0.5 mol/L 量取2.70 mL 浓 硫酸，沿 烧 杯壁缓 缓加 入水 中，不断 搅拌，冷却 至室 温后 定容 至100 mL。3.2.3.硫酸溶 液，c（H2SO4）=0.05 mol/L 量取2.70 mL 浓 硫酸，沿 烧 杯壁缓 缓加 入水 中，不断 搅拌，冷却 至室 温后 定容 至1000 mL。3.2.4.焦磷酸 钠碱 液(Na4P2O7 lOH20)称取15 g 焦磷 酸钠 和7 g 氢 氧化钠 溶于 适量 水中，将 溶液转 入1 000 mL容 量瓶 中，用 水定 容至 刻度，摇匀。3.2.5.氢氧化 钠溶 液w NaOH 1%称取10 g 氢 氧化 钠溶 于适 量水中，冷 却至 室温 后 转 移至1 000 mL的 容量 瓶中，定容 至刻 度，摇匀，储存于 塑料 瓶中。注 意密 封、避 光存 放，两个 月内 用完。3.2.6.重铬酸 钾溶 液，c（1/6 K2Cr2O7）=1 mol/L 取重铬 酸钾49 g 置于1L烧 杯中，加入600 mL 800 mL 水，不 断搅 拌（必要 时可 加热溶 解），待 其完全溶解，当 溶液 处于 室温 时，转 移到1 000 mL 容量 瓶中，用水 定容 至刻 度，摇匀。3.2.7.有机碳 标准 溶液，c（C）=5.000 g/L 称取105 烘 干2 h 的苯 甲 酸钠（C6H5CO2Na，分析 纯）8.5714g（准 确至0.1mg）加水 溶解 后，用水定容到1L，此溶 液需 现用 现配。4.仪器 4.1 紫外-可见 分光 光度 计 4.2 分析 天平：感量 0.0 1 g，感 量0.000 1 g。4.3 离心 机：转速3000rpm 转/分以 上。DB21/T 3239 2020 4 5.标准曲 线 分别吸 取有 机碳 标准 溶液（4.7）0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL 至 50 mL玻璃试 管中，加 水补 至 2.5 mL，相应碳 含量 分别 为 0 mg、2.5 mg、5.0 mg、7.5 mg、10.0 mg、12.5 mg。向 试管 中准 确加 入 5 mL 重铬 酸钾 溶液（4.6），然后 沿管 壁缓 慢加 入 8 mL 硫酸（4.1），避免溅出，摇 匀（此 过程 激 烈放热，注 意实 验安 全）。将试 管置 于100 2 恒 温箱中，加 热氧 化 90 min 后 将试 管取 出，放入 冷水中 冷却 至室 温，将试 管内液 体全 部转 移 至50 ml 容量 瓶中，定 容、摇匀。在590 nm 波长 处测 定 吸光度 值，以测 出的 吸光 度值对 碳含 量绘 制标 准曲 线。6.总腐植 酸的 测定 1.2.3.4.5.6.6.1 方法原理 采用焦 磷酸 钠碱 液提 取含 矿物源 腐植 酸样 品中 的总 腐植酸，得到 提取 液，在 酸性条 件下 沉淀，分离除去非 腐植 酸的 可 溶 性物 质，在 强酸 条件 下，用重 铬酸钾 氧化 提取 的总 腐植 酸，在590 nm 的 波长 处产 生最强吸 光度 值，用 苯甲 酸 钠标准 溶液 配制 标准 曲线，查 找出 对应 样品 在标 准 曲线上 的碳 含量 值，其 结 果用总腐 植酸 碳含 量表 示。4.5.6.DB21/T 3239 2020 5 7.8.9.10.10.1.6.2 分析步 骤 6.2.1 试样制备 试样经 多次缩 分后，取出200 g，将其粉 碎（研磨）全部通 过80目 标准 筛，置 于干燥 样品瓶 中，备用。6.2.2 提取 称取试 样1.0 g（精 确至0.0 1 g）于300 mL 锥形 瓶中，加入70 mL 焦 磷酸 钠碱 液（4.4），摇动 使样品润湿，于 锥形瓶 口加 小 漏斗，沸水 浴中加 热30 min，期间 摇动34 次。取 出 锥形瓶，冷却 后平 均转 移至 两只50 mL塑 料离心 管中离 心分离，离心速度 为3000 r/min，离 心时 间为10 min，将离 心后的上 清液合并 转移 至250 mL 容量 瓶中，然后 用水 分多 次洗 涤 锥形瓶 中残 渣至 离心 管中，对沉淀 物进 行洗 涤离 心,至可溶 物萃取 率大 于98%（固液体 积比=1：10，洗涤 两次，每次洗 涤要 将沉淀 物摇匀），合 并上 清液于250 mL 容量 瓶中，加 水定 容，备 用。6.2.3 沉淀 吸取上 述容 量瓶 中试 样液 体 10 mL（样品 碳含 量大 于 30%，可 根据 样品 含量 适当减 少吸 取量）至 25 mL 玻 璃离 心管 中,加入 0.5 mol/L 硫酸 溶液（4.2）4 mL 酸化，混匀 后静 置10 min，离 心速 度 3000 r/min，离心时 间 10 min，弃去 上 清液。用 0.05 mol/L 的 硫 酸溶液（4.3）分多 次洗 涤 沉淀、离心 后弃 去上 清液，保 留沉 淀，至可溶 物 萃取率 大 于 98%（固 液体 积 比=1：10，洗涤 两次，每 次洗涤 要将 沉淀 物摇 匀）。6.2.4 测定 加入5 mL 重铬酸 钾溶 液（4.6）至上 述玻 璃离 心管 中，然后 沿管 壁缓 慢加 入 8 mL 硫酸（4.1），避免溅出，摇 匀（此过 程 激 烈放热，注 意实 验安 全）。将玻 璃离 心管 置 于100 2 恒温 箱中，90 min 后DB21/T 3239 2020 6 将离心 管取 出，放 入冷 水 中冷却 至室 温，将 玻璃 离 心管内 液体 全部 转移 至 50 ml 容 量瓶 中，定容、摇匀。在 590 nm 波长 处测 定吸 光 度值。根据 标准 曲线 获得 样品的 碳含 量值。除 不加 试样外，使 用同 样的 试剂，进行空 白试 验。7.可溶性 腐植 酸的 测定 7.1 方法 原理 用蒸馏 水提 取含 矿物 源腐 植酸样 品中 的可 溶性 腐植 酸，得到 提取 液，在酸 性 条件下 沉淀，分离 除去非腐植 酸的 可溶 性物 质，在强酸 条件 下，用重 铬酸 钾氧化 提取 的可 溶性 腐植 酸，在 590 nm 的波 长处 产生最强 吸光 度值，用 苯 甲 酸钠标 准溶 液配 制 标 准曲 线，查找 出对 应样 品在 标 准曲线 上的 碳含 量值，其 结果用可 溶 性 腐植 酸碳 含量 表示。7.2 分 析步 骤 7.2.1 试 样制 备 按6.2.1 操 作。7.2.2 提取 除 提取 剂采 用蒸 馏水 之外，其他 过程 按6.2.2 操作。7.2.3 沉淀 吸取上 述容 量瓶 中试 样液 体 10 mL（样品 碳含 量大 于 30%，可 根据 样品 含量 适当减 少吸 取量）至 25 mL 玻 璃离 心管 中,加入 2 mL 0.5 mol/L 硫 酸溶 液（4.2）酸 化，混 匀后 静置 10 min，离 心速 度 3000 r/min，离心时 间 10 min，弃去 上 清液。用 0.05 mol/L 的 硫 酸溶液（4.3）分多 次洗 涤 沉淀、离心 后弃 去上 清液，保 留沉 淀，至可溶 物 萃取率 大 于 98%（固 液体 积 比=1：10，洗涤 两次，每 次洗涤 要将 沉淀 物摇 匀）。7.2.4 测定 按6.2.4 操 作。8.游离腐 殖酸 的测 定 DB21/T 3239 2020 7 8.1 方法 原理 采用稀 碱溶 液提 取含 矿物 源腐植 酸样 品中 的游 离腐 植酸，得 到提 取液，在 酸 性条件 下沉 淀，分 离除去非腐 植酸 的可 溶性 物质，在强 酸条 件下，用 重铬 酸钾氧 化提 取的 可溶 性腐 植酸，在 590 nm 的 波长 处产生最 强吸 光度 值，用 苯 甲酸钠 标准 溶液 配制 标准 曲线，查 找出 对应 样品 在 标准曲 线上 的碳 含量 值，其结果用 可溶 性腐 植酸 碳含 量表示。8.2 分析 步骤 8.2.1 试 样制 备 按6.2.1操作。8.2.2 提取 除了提 取剂 采用 氢氧 化钠 溶液（4.5）之 外，其他 过 程按6.2.2 操作。8.2.3 沉淀 吸取上 述容 量瓶 中试 样液 体 10 mL（样品 碳含 量大 于 30%，可 根据 样品 含量 适当减 少吸 取量）至 25 mL 玻 璃离 心管 中,加入 5 mL 0.5 mol/L 硫 酸溶 液（4.2）酸 化，混 匀后 静置 10 min，离 心速 度 3000 r/min，离心时 间 10 min，弃去 上 清液。用 0.05 mol/L 的 硫 酸溶液（4.3）分多 次洗 涤 沉淀、离心 后弃 去上 清液，保 留沉 淀，至可溶 物 萃取率 大 于 98%（固 液体 积 比=1：10，洗涤 两次，每 次洗涤 要将 沉淀 物摇 匀）。8.2.4 测定 按6.2.4 操作。9.结果计 算和 表述 分析样 品中 总腐 植酸、可 溶性腐 植酸、游离 腐植 酸 碳的质 量分 数 w，数值 以%表示，按以 下公 式计算。DB21/T 3239 2020 8 式中：w 总 腐植 酸、可溶 性腐 植酸、游离 腐植 酸碳 的质 量分数，单 位为%；c 由 标准 曲线 查得 或回 归方程 算得 试样 测定 液中 碳的质 量，单位 为毫 克（mg）；m 试 样的 质量，单 位为 克（g）；D 分 取倍 数，试样 定容 体积与 分取 体积 之比；1000 将 mg 换 算为g 的 系数。取 两次 平行 测定 结 果 的算 术平均 值作 为测 定结 果。计算结 果保留 到 小数 点后 两位。10.允许差 在重复 性条 件下 获得 的两 次独立 测定 结果 的绝 对差 值不得 超过 算术 平均 值的3%。_