水质　丙烯酰胺的测定　液相色谱-串联质谱法DB37／T 4145—2020.pdf

ICS 13.060 C 51 DB37 山东省地方标准 DB37/T 4145 2020 水质 丙 烯酰胺的 测定 液相色谱-串联质谱 法 Water quality Determination of acrylamide Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020-09-25 发布 2020-10-25 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 4145 2020 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 方 法原 理.1 4 试 剂和 材料.1 5 仪 器与 设备.2 6 样品.2 7 分 析步 骤.2 8 结 果计 算与 表示.4 9 精 密度 与准 确度.5 10 质 量保 证和 质量 控制.5 DB37/T 4145 2020 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 住房 和城 乡建设 厅提 出并 组织 实施。本标准 由山 东省 城镇 给水 排水标 准化 技术 委员 会归 口。本标准 起草 单位：山东 省 城市供 排 水 水质 监测 中心、国 家城 市供 水水 质监 测 网青岛 监测 站、国 家城市供水 水质 监测 网杭 州监 测站、山 东省 分析 测试 中 心、山东 省济 南生 态环 境 监测中 心、国 家城 市供 水 水质监测 网武 汉监 测站。本标准 主要 起草 人：辛晓 东、贾 瑞宝、孙 韶华、赵 清华、许燕、宋 艳、王晓 芳、黄 允河、赵 汝松、张厚勇、陈 露、葛璇、王 晓利、李小 敏、梁玉。DB37/T 4145 2020 1 水质 丙 烯酰胺的 测定 液相色谱-串 联质谱 法 警告：实 验中 使用 的溶 剂 和试剂 均具 有一 定的 毒性，对 健康 具有 潜在 的危 害，应 尽量 避免 与这 些化学品的 直接接 触。样品制 备过程 应在通 风橱 中进行，操作 时应按 规定 要求佩 戴防护 器具,避免接 触皮 肤和衣物。1 范围 本标准 规定 了测 定生 活饮 用水及 其水 源水 中丙 烯酰 胺的液 相色 谱-串联 质谱 法。本标准 适用 于生 活饮 用水 及其水 源水 中丙 烯酰 胺的 测定。进样量10 L时，本 标准 的方法 检出 限为0.036 g/L，测 定下 限为0.15 g/L。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 5750.2 2006 生 活 饮用水 标准 检验 方法 水 样的采 集与 保存 GB/T 5750.3 2006 生 活 饮用水 标准 检验 方法 水 质分析 质量 控制 GB/T 32465 化 学分 析方 法验证 确认 和内 部质 量控 制要求 GB/T 33087 仪 器分 析用 高纯水 规格 及试 验方 法 HJ/T 91 地表 水和 污水 监 测技术 规范 HJ/T 164 地下 水环 境监 测技术 规范 3 方法原 理 样品经0.22 m 滤膜 过滤 后直接 进样，经液 相色谱 仪 分离后 进入 串联 质谱 仪，采 用多反 应监 测（MRM）模式，根据 保留 时间 和特 征离子 峰进 行定 性分 析，内标法 定量 分析。4 试剂 和 材料 4.1 一次性 针头 过滤 器：0.22 m，聚四 氟乙 烯（PTFE）材质。4.2 一次性 注 射 器：2.5 mL。4.3 高纯水：水 质应 满 足 GB/T 33087 的 规定。4.4 甲醇：色谱 纯。4.5 载气：高纯 氮，纯度 99.999%。DB37/T 4145 2020 2 4.6 丙烯酰 胺标 准溶 液：=1 000 mg/L，溶剂 为甲 醇，有 证标准 物质。4.7 丙烯酰 胺同 位素（D3-丙 烯 酰胺）标 准 溶液：=1 000 mg/L，溶 剂为 甲醇，有 证 标准物 质。4.8 丙烯酰 胺标 准贮 备 液：=10.0 mg/L。取 1.00 mL 丙 烯酰胺 标准 溶液（4.6），用甲醇（4.4）稀释并定容 至 100 mL，配 制10.0 mg/L 丙烯 酰胺 标准 贮备 液。于 4 以下 冷藏 密封 避光保 存。4.9 D3-丙 烯酰 胺 标 准贮 备液：=10.0 mg/L。取1.00 mL D3-丙 烯酰 胺标 准溶 液（4.7），用甲 醇（4.4）稀释并 定容 至 100 mL，配 制10.0 mg/L D3-丙 烯酰 胺 标准贮 备液。于4 以下 冷藏密 封避 光保 存。4.10 丙烯酰 胺标 准使 用液：=10.0 g/L。取 100 L 丙 烯酰胺 标准 贮备 液（4.8），用 高纯 水（4.3）稀释并 定容 至 100 mL，配 制10.0 g/L 丙烯 酰胺 标 准使用 液。4.11 D3-丙 烯酰 胺标 准使 用 液：=10.0 g/L。取 100 L D3-丙 烯酰 胺标 准贮 备液（4.9），用 高纯 水（4.3）稀 释并 定容 至100 mL，配 制 10.0 g/L D3-丙 烯酰胺 标准 使用 液。5 仪器与 设备 5.1 液相色 谱-串联 质谱 仪：配 有电喷 雾离 子源。5.2 色谱柱：C18 色 谱柱 或其 他 性能等 效的 色谱 柱。5.3 样品瓶：2 mL。5.4 容量瓶：100 mL 和 10 mL。5.5 采样瓶：棕 色玻 璃瓶，具 玻璃塞。5.6 微量注 射器：1 000 L。6 样品 6.1 样品 的 采集 与保 存 按照HJ/T 91和HJ/T 164 的 相关规 定采 集样 品。用采样 瓶（5.5）采 集样 品。按照GB/T 5750.2 2006 的 相关规 定保 存样 品。样品 采集后 在4 以 下冷藏 保 存，24 h内 完成 水样 过滤处理 并上 机测 试。若水 样中存 在残 留氯，加 入抗 坏血酸 去除 余氯。6.2 试样制 备 样品经 一次 性针 头过 滤器（4.1）过 滤，取样 品于10 mL 容 量瓶 中，加入400 L D3-丙 烯酰 胺标 准使用液（4.11），用样 品定 容至刻 度。置于 进样 瓶中，待测。如水 样浓 度较 高 或基体 复杂，可 将样 品适 当稀释后，再 经过 一次 性针 头过滤 器 过 滤。6.3 空白试 样制 备 用高纯 水（4.3）代 替样 品，按照 与试 样制 备（6.2）相同的 步骤 制备 空白 试样。7 分析步 骤 DB37/T 4145 2020 3 7.1 色谱 分 析条 件 7.1.1 流动相：A 相 甲 醇（4.4），B 相 水（4.3），A:B=10:90（V:V），等 度洗脱。7.1.2 流速：0.3 mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样体 积：10 L。7.2 质谱分 析条 件 7.2.1 离子源：电 喷雾 离子 源，正离子 模式。7.2.2 离子源 温度：350。7.2.3 扫描方 式：MRM，多 反应 监 测条件 见 表 1。表1 质谱分 析参 考条 件 物质名称 母离子 子离子 Fragment V CE V 丙烯酰胺 72.1 55.1 43 9 27.1 43 17 D3-丙烯酰胺 75 58 44 9 43.8 44 15 7.3 校准 曲 线的 绘制 7.3.1 本方法 使用 内标 法定量。7.3.2 校准系 列的 配制：取5 个10 mL 容 量瓶，用 微量 注射 器（5.6）依次 准确 加入 200 L、500 L、1 000 L、1 500 L 和2 000 L 丙 烯酰 胺标 准使 用液（4.10）及 400 L D3-丙烯 酰胺标 准使 用液（4.11），用高纯 水（4.3）定容 至刻 度，配 制浓 度为0.20 g/L、0.50 g/L、1.00 g/L、1.50 g/L 和2.00 g/L 的 校准 曲线 系列。现 用现配。7.3.3 按照质 量浓度 从低到 高依 次进样，以标 准系 列溶液 中目标 组分的 浓度 与内标 物浓度 的比值 为横坐标，以其 对应 的峰 面积 与内标 物 峰 面积 的比 值为 纵坐标，建 立校 准曲 线。7.4 试样测定 7.4.1 采用自 动进 样器 进样，进 样量 为10 L。7.4.2 按照与 校 准 曲线 的绘制（7.3）相 同的 步骤 进行 试样（6.2）的 测定。7.4.3 丙烯酰 胺 和 D3-丙烯 酰胺MRM 色 谱图 见图1、图 2 所 示。DB37/T 4145 2020 4 图1 丙烯酰 胺MRM 色 谱图 图2 D3-丙 烯酰 胺MRM 色 谱图 7.5 空白试 验 按照与 试样 测定（7.4）相 同的步 骤进 行空 白试样（6.3）的 测定。8 结果计 算与 表示 8.1 定性结 果 根据丙 烯酰 胺和D3-丙烯 酰 胺MRM 色谱 图中 的保 留时 间 和特征 离子 对进 行定 性分 析。8.2 定量结 果 根据计 算公 式（1）计算 样 品中组 分的 含量，结 果以 微 克每 升（g/L）表示。丙烯酰 胺的 定量 离子对为72.1 55.1，D3-丙烯酰胺的定 量离子对为75 58。测定结果位数的保 留与测定下限 一致，最多 保留三位 有效 数字。=x isisAfA RF.(1)式中：水样 中目 标化 合物 的质量 浓度，单 位为 微克 每升（g/L）；is 水样 中同 位素 内标 化 合物的 质量 浓度，单 位为 微克 每 升（g/L）；xA 水样 中目 标化 合物 对 应的离 子峰 面积；isA 水样 中同 位素 内标 化 合物对 应的 离子 峰面 积；DB37/T 4145 2020 5 RF 目标 化合 物的 平均 相 对响应 因子；f 稀释 倍数。9 精密度 与准 确度 9.1 精密度 5 家 实 验 室 分 别 测 定 浓 度 为0.1 g/L 2.0 g/L 的 纯 水 加 标 样 品，实 验 室 内 相 对 标 准 偏 差 为2.0%12%；实验 室间 相 对标准 偏差 为6.8%12%；重 复性 限为0.029 g/L、0.07 g/L 和0.35 g/L；再现性 限为0.042 g/L、0.078 g/L 和0.80 g/L。9.2 准确度 5家实 验室 分别 测定 地表 水、地 下水 及生 活饮 用水 加 标样品。加标 浓度为0.1 g/L 2.0 g/L，加标回收 率为85.6%119%。10 质量保 证和 质量 控制 10.1 空白试 验 每批次 样品 应做 空白 试验，测定 结果 不能 超过 方法 的检出 限。10.2 校准曲 线要 求 分析样品 之前，应建立能够覆盖样 品浓度范围的至少5 个浓度点的校 准曲线，曲线的相 关系数r2应大于0.995。10.3 平行样 平行双 样测 定结 果的 相对 偏差满 足GB/T 5750.3 2006 的要 求。10.4 基体加 标 基体加 标样 品的 加标 回收 率范围 满足GB/T 32465 的 要求。_