水质　肠球菌的测定　酶底物法DB37／T 4153—2020.pdf

ICS 13.060 C 51 DB37 山东省地方标准 DB37/T 4153 2020 水质 肠 球菌的测 定 酶底 物法 Water quality Determination of enterococcus Enzyme substrate method 2020-09-25 发布 2020-10-25 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 4153 2020 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 方 法原 理.1 4 试 剂和 材料.1 5 仪 器和 设备.2 6 样品.2 7 分 析步 骤.2 8 结 果计 算与 报告.2 9 精 密度 和准 确度.3 10 质 量保 证和 质量 控制.3 11 废 物处 理.3 附录A（规 范性 附录）51 孔定 量盘 法不 同阳 性结 果的最 可能 数（MPN）及95%可 信范 围.4 附录B（规 范性 附录）97 孔定 量盘 法MPN 表.6 DB37/T 4153 2020 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 住房 和城 乡建设 厅提 出并 组织 实施。本标准 由山 东省 城镇 给水 排水标 准化 技术 委员 会归 口。本标准 起草 单位：山东 省 城市供 排水 水质 监测 中心、潍 坊市 公用 事业 产品 服 务质量 监测 中心、国家城市供 水水 质监 测网 杭州 监测站、国 家城 市供 水水 质 监测网 福州 监测 站、山东 省 济南生 态环 境监 测中 心、聊城水 务水 质检 测有 限公 司。本标准 主要 起草 人：赵 清 华、贾瑞 宝、孙 韶华、褚 福敏、逯 南南、田立 平、翁天楚、兰榕 星、战 锡林、刘 伟、谷荣 焕、郑琳 琳、吴 锦铃、孟 炯、王晓 波。DB37/T 4153 2020 1 水质 肠 球菌的测 定 酶 底物法 警告：肠 球菌 为致 病微 生 物，应该 在相 应级 别的 生 物安全 实验 室中 检测，操 作时应 按要 求佩 戴生 物防护用 品，注意 废弃 物的 生物消 毒。1 范围 本标准 规定 了 测 定生 活饮 用水及 其水 源水 中肠 球菌 的酶底 物法。本标准 适用 于生 活饮 用水 及其水 源水 中肠 球菌 的测 定。当水样 体积 为100 mL 时，本方法 的检 测限 为1 MPN/100 mL。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 5750.2 2006 生 活 饮用水 标准 检验 方法 水 样的采 集与 保存 GB/T 6682 分析 实验 室 用水规 格和 试验 方法 3 方法原 理 肠球菌 在41 温度 条件下 培 养24 h，能 够产生-D-葡糖苷 酶，将 选择 性培养 基中荧 光底物4-甲基伞形酮-D-葡 糖苷（4-MUG）分解，分 解后 的荧 光底 物在366 nm 紫外 光下 产生 荧光，统 计阳 性反 应数 量，通过查 询MPN 表，计 算样 品 中的肠 球菌 浓度。4 试剂和 材料 4.1 市售Enterolert 培 养基，也可以 使用 其他 等效 产品。4.2 生理盐 水：氯化 钠浓 度 为0.85%。4.3 标准菌 株：粪肠 球菌 有证 标准菌 株，大肠 埃希 氏菌 有证标 准菌 株。4.4 无菌水：实 验用 水满足GB/T 6682 二 级及 以上 分析 实 验室用 水要 求，经121 高 压蒸汽 灭菌20 min，备用。4.5 硫代硫 酸钠：纯 度98%。4.6 硫代硫 酸钠 溶液（5.0 g/L）：称 取0.5 g 硫代 硫酸 钠（4.5），精 确至0.1 g，溶于 适量 水中，定容至100 mL，121 高压 灭菌 20 min，备 用。4.7 磷酸盐 缓冲 液（PBS）：氯化钠 8.01 g 氯化钾 0.2 g 磷酸氢 二钠 1.44 g 磷酸二 氢钾 0.24 g DB37/T 4153 2020 2 上述成 分溶 解于950 mL无 菌水（4.4）中，用 盐酸 调 节溶液pH值到7.4 后 加无 菌 水（4.4）定 容至1 000 mL，121 高压 灭菌20 min，备用。5 仪器和 设备 5.1 采样瓶：具 螺旋 盖或 磨口 塞的 100 mL、500 mL 玻璃 瓶。5.2 恒温培 养箱：允 许 温 度偏 差 41 1。5.3 高压蒸 汽灭 菌器：121 可调。5.4 程控定 量封 口机：用 于定 量盘的 封口。5.5 紫外灯 及配 套灯 箱：366 nm。5.6 定量盘：51 孔或 97 孔。5.7 天平：精确 至0.001 g。5.8 容量瓶：10 mL 和100 mL。6 样品 使用灭 菌处 理的 玻璃 瓶（也 可选用 有效 期内 市售 无菌 采样瓶 和采 样袋）采 集水 样，采样 量不 少于200 mL。加 入硫 代硫 酸钠 溶液（4.6）去 除残 留余 氯（每125 mL 容积 加入20 L的 硫 代硫酸 钠溶 液，水源 水肠球菌测 定忽 略此 步），样 品采集 与保 存按 照GB/T 5750.2 2006 中微 生物 指标 要 求执 行。7 分析步 骤 7.1 定性分 析 用灭菌 处理过 的100 mL采 样瓶（5.1）量取100 mL 水 样，加 入一包 培养基（4.1），混 摇均匀 使之 完全溶解，放 入恒 温培 养箱（5.2）中41 1 培 养24 h。7.2 定量分 析 7.2.1 用灭菌 处理 过 的100 mL 采 样瓶（5.1）量 取 100 mL 水 样，加 入一 包培 养基（4.1），混摇 均匀 使之完全 溶解。7.2.2 将上 述100 mL 水样 全部 倒 入 51 孔无 菌定 量盘（5.6）内，抚平 定量 盘背 面以 赶除孔 穴内 气泡，然后用 程控 定量 封口 机（5.4）封 口，放入 恒温 培养 箱（5.2）中 41 1 培养 24 h。7.3 空白对 照 选用无 菌水（4.4）按照7.1 7.2 步骤 进行 空白 对照 测定。8 结果计 算与 报告 8.1 定性结 果 定性分 析（7.1）的 样品，在紫外 灯（5.5）下 观察，产生荧 光，则判 定为 阳性 反应；不产 生荧 光，则判定 为阴 性反 应。定性 反应结 果以 肠球 菌“阳性（+）”或“阴 性（-）”报告。8.2 定量结 果 DB37/T 4153 2020 3 定量分 析（7.2）的 样品，在紫外 灯（5.5）下 观察 培 养24 h 的定 量盘，计数 有 荧光反 应的 孔数，参照附录A 表A.1 计 数定 量，结果以MPN/100 mL 表 示。如 所有孔 穴均 未产 生荧 光，则报告 肠球 菌“未 检出”。若荧光 不明 显，可 以延 长 培养时 间至28 h 进行 结果 判读，超 过28 h 后 出现的 颜 色反应，不作 为阳 性结 果。注：对 于 肠 球 菌 浓度 较 高 的样 品，可 选 用97 孔 定量 盘 或 采用 无 菌生 理 盐 水（4.2）对样 品1:10 梯度 稀 释 后 进 行多 梯度检测，其他操作步骤同51孔 定量盘法一致，结果检索表见附录B 表B.1 表B.4，乘以稀释 倍数报告。9 精密度 和准 确度 9.1 精密度 6 个 实 验 室 对 肠 球 菌 浓 度 30 MPN/100 mL 的 样 品 定 性 结 果 一 致，对 浓 度 为20.4 MPN/100 mL 46.3 MPN/100 mL、73.1 MPN/100 mL 146.0 MPN/100 m/L 的样品7 次 重 复 测 定，相 对 标 准 偏 差 分 别 为1.4%11.2%和1.4%6.4%。9.2 准确度 6个实 验室 分别 测定 浓度 为16632 MPN/100 mL 的肠 球 菌质控 样品，测 定结 果与 认 证值的 相对 误差 在-4.8%0.8%范 围内。注：微生物检测数据为偏态分布，上述精密度、准确度均为对测定结果以10取对数后进行计算。10 质量保 证和 质量 控制 10.1 空白对 照 每批样 品进 行空 白对 照测 定，选 用无 菌水（4.4）按 照7.3 步骤 进行 空白 对照 测 定，培 养后 的取 样瓶或定量 盘应 为阴 性。否则，该批 次样 品测 定结 果无 效，应 查明 原因 后重 新测 定。10.2 阳性对 照 和 阴性 对照 定期使 用粪 肠球 菌标 准菌 株（4.3）和大 肠埃 希氏 菌 标准菌 株（4.3）作 为阳 性 和阴性 对照 菌株，对检测质 量进 行控 制。将标 准菌株 制备 成菌 浓度 10 MPN/100 mL 的菌 悬液，按 照7.17.2 步 骤进 行分 析测定，阳 性菌 株呈 阳性 反应，阴性 菌株 呈阴 性反 应。否则，该批 次样 品测 定结 果无效，应 查明 原因 后 重 新测定。10.3 培养基 质量 控制 对每批 次培 养基 须选 用有 证标准 菌株 或标 准样 品进 行培养 基质 量检 验。11 废物处 理 实验中 产生 的废 弃物 经高 压蒸汽 灭菌 器（5.3）121 灭菌20 min 后，作 为一 般废物 处理。DB37/T 4153 2020 4 A A 附 录 A（规范 性附 录）51 孔 定量 盘法 不同 阳性 结 果的最 可能 数（MPN）及95%可 信范 围 51孔定 量盘 法不 同阳 性结 果的最 可能 数（MPN）及95%可信 范围 见表A.1。表A.1 51 孔 定量 盘法 不同 阳性 结 果的最 可能 数（MPN）及95%可 信范 围 阳性数 肠球菌 MPN/100 mL 95%置信范围 MPN/100 mL 下限 上限 0 1 0.0 3.7 1 1.0 0.3 5.6 2 2.0 0.6 7.3 3 3.1 1.1 9.0 4 4.2 1.7 10.7 5 5.3 2.3 12.3 6 6.4 3.0 13.9 7 7.5 3.7 15.5 8 8.7 4.5 17.1 9 9.9 5.3 18.8 10 11.1 6.1 20.5 11 12.4 7.0 22.1 12 13.7 7.9 23.9 13 15.0 8.8 25.7 14 16.4 9.8 27.5 15 17.8 10.8 29.4 16 19.2 11.9 31.3 17 20.7 13.0 33.3 18 22.2 14.1 35.2 19 23.8 15.3 37.3 20 25.4 16.5 39.4 21 27.1 17.7 41.6 22 28.8 19.0 43.9 23 30.6 20.4 46.3 24 32.4 21.8 48.7 25 34.4 23.3 51.2 26 36.4 24.7 53.9 27 38.4 26.4 56.6 28 40.6 28.0 59.5 DB37/T 4153 2020 5 表A.1 51 孔定 量盘 法不 同阳性 结果 的最 可能 数（MPN）及 95%可 信范 围（续）阳性数 肠球菌 MPN/100 mL 95%置信范围 MPN/100 mL 下限 上限 29 42.9 29.7 62.5 30 45.3 31.5 65.6 31 47.8 33.4 69.0 32 50.4 35.4 72.5 33 53.1 37.5 76.2 34 56.0 39.7 80.1 35 59.1 42.0 84.4 36 62.4 44.6 88.8 37 65.9 47.2 93.7 38 69.7 50.0 99.0 39 73.8 53.1 104.8 40 78.2 56.4 111.2 41 83.1 59.9 118.3 42 88.5 63.9 126.2 43 94.5 68.2 135.4 44 101.3 73.1 146.0 45 109.1 78.6 158.7 46 118.4 85.0 174.5 47 129.8 92.7 195.0 48 144.5 102.3 224.1 49 165.2 115.2 272.2 50 200.5 135.8 387.6 51 200.5 146.1 DB37/T 4153 2020 6 B B 附 录 B（规范 性附 录）97 孔 定量 盘法MPN 表 97孔定 量盘 法MPN 表 见表B.1 表B.4。表B.1 97 孔 定量 盘法MPN 表（MPN/100mL）（小 孔011）大孔阳性数 小孔阳性数 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 0 1.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 1 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.1 8.1 9.1 10.1 11.1 12.1 2 2.0 3.0 4.1 5.1 6.1 7.1 8.1 9.2 10.2 11.2 12.2 13.3 3 3.1 4.1 5.1 6.1 7.2 8.2 9.2 10.3 11.3 12.4 13.4 14.5 4 4.1 5.2 6.2 7.2 8.3 9.3 10.4 11.4 12.5 13.5 14.6 15.6 5 5.2 6.3 7.3 8.4 9.4 10.5 11.5 12.6 13.7 14.7 15.8 16.9 6 6.3 7.4 8.4 9.5 10.6 11.6 12.7 13.8 14.9 16.0 17.0 18.1 7 7.5 8.5 9.6 10.7 11.8 12.8 13.9 15.0 16.1 17.2 18.3 19.4 8 8.6 9.7 10.8 11.9 13.0 14.1 15.2 16.3 17.4 18.5 19.6 20.7 9 9.8 10.9 12.0 13.1 14.2 15.3 16.4 17.6 18.7 19.8 20.9 22.0 10 11.0 12.1 13.2 14.4 15.5 16.6 17.7 18.9 20.0 21.1 22.3 23.4 11 12.2 13.4 14.5 15.6 16.8 17.9 19.1 20.2 21.4 22.5 23.7 24.8 12 13.5 14.6 15.8 16.9 18.1 19.3 20.4 21.6 22.8 23.9 25.1 26.3 13 14.8 16.0 17.1 18.3 19.5 20.6 21.8 23.0 24.2 25.4 26.6 27.8 14 16.1 17.3 18.5 19.7 20.9 22.1 23.3 24.5 25.7 26.9 28.1 29.3 15 17.5 18.7 19.9 21.1 22.3 23.5 24.7 25.9 27.2 28.4 29.6 30.9 16 18.9 20.1 21.3 22.6 23.8 25.26.2 27.5 28.7 30.0 31.2 32.5 17 20.3 21.6 22.8 24.1 25.3 26.6 27.8 29.1 30.3 31.6 32.9 34.1 18 21.8 23.1 24.3 25.6 26.9 28.1 29.4 30.7 32.0 33.3 34.6 35.9 19 23.3 24.6 25.9 27.2 28.5 29.8 31.1 32.4 33.7 35.0 36.3 37.6 20 24.9 26.2 27.5 28.8 30.1 31.5 32.8 34.1 35.4 36.8 38.1 39.5 21 26.5 27.9 29.2 30.5 31.8 33.2 34.5 35.9 37.3 38.6 40.0 41.4 22 28.2 29.5 30.9 32.3 33.6 35.0 36.4 37.7 39.1 40.5 41.9 43.3 23 29.9 31.3 32.7 34.1 35.5 36.8 38.3 39.7 41.1 42.5 43.9 45.4 24 31.7 33.1 34.5 35.9 37.3 38.8 40.2 41.7 43.1 44.6 46.0 47.5 25 33.6 35.0 36.4 37.9 39.3 40.8 42.2 43.7 45.2 46.7 48.2 49.7 26 35.5 36.9 38.4 39.9 41.4 42.8 44.3 45.9 47.4 48.9 50.4 52.0 27 37.4 38.9 40.4 42.0 43.5 45.0 46.5 48.1 49.6 51.2 52.8 54.4 28 39.5 41.0 42.6 44.1 45.7 47.3 48.8 50.4 52.0 53.6 55.2 56.9 DB37/T 4153 2020 7 表B.1 97 孔定 量盘 法 MPN 表（MPN/100mL）（小孔0 11）（续）大孔阳性数 小孔阳性数 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 29 41.7 43.2 44.8 46.4 48.0 49.6 51.2 52.8 54.5 56.1 57.8 59.5 30 43.9 45.5 47.1 48.7 50.4 52.0 53.7 55.4 57.1 58.8 60.5 62.2 31 46.2 47.9 49.5 51.2 52.9 54.6 56.3 58.1 59.8 61.6 63.3 65.1 32 48.7 50.4 52.1 53.8 55.6 57.3 59.1 60.9 62.7 64.5 66.3 68.2 33 51.2 53.0 54.8 56.5 58.3 60.2 62.0 63.8 65.7 67.6 69.5 71.4 34 53.9 55.7 57.6 59.4 61.3 63.1 65.0 67.0 68.9 70.8 72.8 74.8 35 56.8 58.6 60.5 62.4 64.4 66.3 68.3 70.3 72.3 74.3 76.3 78.4 36 59.8 61.7 63.7 65.7 67.7 69.7 71.7 73.8 75.9 78.0 80.1 82.3 37 62.9 65.0 67.0 69.1 71.2 73.3 75.4 77.6 79.8 82.0 84.2 86.5 38 66.3 68.4 70.6 72.7 74.9 77.1 79.4 81.6 83.9 86.2 88.6 91.0 39 70.0 72.2 74.4 76.7 78.9 81.3 83.6 86.0 88.4 90.9 93.4 95.9 40 73.8 76.2 78.5 80.9 83.3 85.7 88.2 90.8 93.3 95.9 98.5 101.2 41 78.0 80.5 83.0 85.5 88.0 90.6 93.3 95.9 98.7 1001.4 104.3 107.1 42 82.6 85.2 87.8 90.5 93.2 96.0 98.8 101.7 104.6 107.6 110.6 113.7 43 87.6 90.4 93.2 96.0 99.0 101.9 105.0 108.1 111.2 114.5 117.8 121.1 44 93.1 96.1 99.1 102.2 105.4 108.6 111.9 115.3 118.7 122.3 125.9 129.6 45 99.3 102.5 105.8 109.2 112.6 116.2 119.8 123.6 127.4 131.4 135.4 139.6 46 106.3 109.8 113.4 117.2 121.0 125.0 129.1 133.3 137.6 142.1 146.7 151.5 47 114.3 118.3 122.4 126.6 130.9 135.4 140.1 145.0 150.0 155.3 160.7 166.4 48 123.9 128.4 133.1 137.9 143.0 148.3 153.9 159.7 165.8 172.2 178.9 186.0 49 135.5 140.8 146.4 152.3 158.5 165.0 172.0 179.3 187.2 195.6 204.6 214.3 表B.2 97 孔 定量 盘法MPN 表（MPN/100mL）（小 孔12 23）大孔阳性数 小孔阳性数 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 0 12.0 13.0 14.1 15.1 16.1 17.1 18.1 19.1 20.2 21.2 22.2 24.3 1 13.2 14.2 15.2 16.2 17.3 18.3 19.3 20.4 21.4 22.4 23.5 24.5 2 14.3 15.4 16.4 17.4 18.5 19.5 20.6 21.6 22.7 23.7 24.8 25.8 3 15.5 16.5 17.6 18.6 19.7 20.8 21.8 22.9 23.9 25.0 26.1 27.1 4 16.7 17.8 18.8 19.9 21.0 22.0 23.1 24.2 25.3 26.3 27.4 28.5 5 17.9 19.0 20.1 21.2 22.2 23.3 24.4 25.5 26.6 27.7 28.8 29.9 6 19.2 20.3 21.4 22.5 23.6 24.7 25.8 26.9 28.0 29.1 30.2 31.3 7 20.5 21.6 22.7 23.8 24.9 26.0 27.1 28.3 29.4 30.5 31.6 32.8 8 21.8 22.9 24.1 25.2 26.3 27.4 28.6 29.7 30.8 32.0 33.1 34.3 9 23.2 24.3 25.4 26.6 27.7 28.9 30.0 31.2 32.3 33.5 34.6 35.8 10 24.6 25.7 26.9 28.0 29.2 30.3 31.5 32.7 33.8 35.0 36.2 37.4 11 26.0 27.2 28.3 29.5 30.7 31.9 33.0 34.2 35.4 36.6 37.8 39.0 DB37/T 4153 2020 8 表B.2 97 孔定 量盘 法 MPN 表（MPN/100mL）（小孔12 23）（续）大孔阳性数 小孔阳性数 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 12 27.5 28.6 29.8 31.0 32.2 33.4 34.6 35.8 37.0 38.2 39.5 40.7 13 29.0 30.2 31.4 32.6 33.8 35.0 36.2 37.5 38.7 39.9 41.2 42.4 14 30.5 31.7 33.0 34.2 35.4 36.7 37.9 39.1 40.4 41.6 42.9 44.2 15 32.1 33.3 34.6 35.8 37.1 38.4 39.6 40.9 42.2 43.4 44.7 46.0 16 33.7 35.0 36.3 37.5 38.8 40.1 41.4 42.7 44.0 45.3 46.6 47.9 17 35.4 36.7 38.0 39.3 40.6 41.9 43.2 44.5 45.9 47.2 48.5 49.8 18 37.2 38.5 39.8 41.1 42.4 43.8 45.1 46.5 47.8 49.2 50.5 51.9 19 39.0 40.3 41.6 43.0 44.3 45.7 47.1 48.4 49.8 51.2 52.6 54.0 20 40.8 42.2 43.6 44.9 46.3 47.7 49.1 50.5 51.9 53.3 54.7 56.1 21 42.8 44.1 45.5 46.9 48.4 49.8 51.2 52.6 54.1 55.5 56.9 58.4 22 44.8 46.2 47.6 49.0 50.5 51.9 53.4 54.8 56.3 57.8 59.3 60.8 23 46.8 48.3 49.7 51.2 52.7 54.2 55.6 57.1 58.6 60.2 61.7 63.2 24 49.0 50.5 52.0 53.5 55.0 56.5 58.0 59.5 61.1 62.6 64.2 65.8 25 51.2 52.7 54.3 55.8 57.3 58.9 60.5 62.0 63.6 65.2 66.8 68.4 26 53.5 55.1 56.7 58.2 59.8 61.4 63.0 64.7 66.3 67.9 69.6 71.2 27 56.0 57.6 59.2 60.8 62.4 64.1 65.7 67.4 69.1 70.8 72.5 74.2 28 58.5 60.2 61.8 63.5 65.2 66.9 68.6 70.3 72.0 73.7 75.5 77.3 29 61.2 62.9 64.6 66.3 68.0 69.8 71.5 73.3 75.1 76.9 78.7 80.5 30 64.0 65.7 67.5 69.3 71.0 72.9 74.7 76.5 78.3 80.2 82.1 84.0 31 66.9 68.7 70.5 72.4 74.2 76.1 78.0 79.9 81.8 83.7 85.7 87.6 32 70.0 71.9 73.8 75.7 77.6 79.5 81.5 83.5 85.4 87.5 89.5 91.5 33 73.3 75.2 77.2 79.2 81.2 83.2 85.2 87.3 89.3 91.4 93.6 95.7 34 76.8 78.8 80.8 82.9 85.0 87.1 89.2 91.4 93.5 95.7 97.9 100.2 35 80.5 82.6 84.7 86.9 89.1 91.3 93.5 95.7 98.0 100.3 102.6 105.0 36 84.5 86.7 88.9 91.2 93.5 95.8 98.1 100.5 102.9 105.3 107.7 110.2 37 88.8 91.1 93.4 95.8 98.2 100.6 103.1 105.6 108.1 110.7 113.3 115.9 38 93.4 95.8 98.3 100.8 103.4 105.9 108.6 111.2 113.9 116.6 119.4 122.2 39 98.4 101.0 103.6 106.3 109.0 111.8 114.6 117.4 120.3 123.2 126.1 129.2 40 103.9 106.7 109.5 112.4 115.3 118.2 121.2 124.3 127.4 130.5 133.7 137.0 41 110.0 113.0 116.0 119.1 122.2 125.4 128.7 132.0 135.4 138.8 142.3 145.9 42 116.9 120.1 123.4 126.7 130.1 133.6 137.2 140.8 144.5 148.3 152.2 156.1 43 124.6 128.1 131.7 135.4 139.1 143.0 147.0 151.0 155.2 159.4 163.8 168.2 44 133.4 137.4 141.4 145.5 149.7 154.1 158.5 163.1 167.9 172.7 177.7 182.9 45 143.9 148.3 152.9 157.6 162.4 167.4 172.6 178.0 183.5 189.2 195.1 201.2 46 156.5 161.6 167.0 172.5 178.2 184.2 190.4 196.8 203.5 210.5 217.8 225.4 47 172.3 178.5 185.0 191.8 198.9 206.4 214.2 222.4 231.0 240.0 249.5 259.5 48 193.5 201.4 209.8 218.7 228.2 238.2 248.9 260.3 272.3 285.1 298.7 313.0 49 224.7 235.9 248.1 261.3 275.5 290.9 307.6 325.5 344.8 365.4 387.3 410.6 DB37/T 4153 2020 9 表B.3 97 孔 定量 盘法MPN 表（MPN/100mL）（小 孔24 35）大孔阳性数 小孔阳性数 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 0 24.3 25.3 26.4 27.4 28.4 29.5 30.5 31.5 32.6 33.6 34.7 35.7 1 25.6 26.6 27.7 28.7 29.8 30.8 31.9 32.9 34.0 35.0 36.1 37.2 2 26.9 27.9 29.0 30.0 31.1 32.2 33.2 34.3 35.4 36.5 37.5 38.6 3 28.2 29.3 30.4 31.4 32.5 33.6 34.7 35.8 36.8 39.7 39.0 40.1 4 29.6 30.7 31.8 32.8 33.9 35.0 36.1 37.2 38.3 39.4 40.5 41.6 5 31.0 32.1 33.2 34.3 35.4 36.5 37.6 38.7 39.9 41.0 42.1 43.2 6 32.4 33.5 34.7 35.8 36.9 38.0 39.2 40.3 41.4 42.6 43.7 44.8 7 33.9 35.0 36.2 37.3 38.4 39.6 40.7 41.9 43.0 44.2 45.3 46.5 8 35.4 36.6 37.7 38.9 40.0 41.2 42.3 43.5 44.7 45.9 47.0 48.2 9 37.0 38.1 39.3 40.5 41.6 42.8 44.0 45.2 46.4 47.6 48.8 50.0 10 38.6 39.7 40.9 42.1 43.3 44.5 45.7 46.9 48.1 49.3 50.6 51.8 11 40.2 41.4 42.6 43.8 45.0 46.3 47.5 48.7 49.9 51.2 52.4 53.7 12 41.9 43.1 44.3 45.6 46.8 48.1 49.3 50.6 51.8 53.1 54.3 55.6 13 43.6 44.9 46.1 47.4 48.6 49.9 51.2 52.5 53.7 55.0 56.3 57.6 14 45.4 46.7 48.0 49.3 50.5 51.8 53.1 54.4 55.7 57.0 58.3 59.6 15 47.3 48.6 49.9 51.2 52.5 53.8 55.1 56.4 57.8 59.1 60.4 61.8 16 49.2 50.5 51.8 53.2 54.5 55.8 57.2 58.5 59.9 61.2 32.6 64.0 17 51.2 52.5 53.9 55.2 56.6 58.0 59.3 60.7 62.1 63.5 64.9 66.3 18 53.2 64.6 56.0 57.4 58.8 60.2 61.6 63.0 64.4 65.8 67.2 68.6 19 55.4 56.8 58.2 59.6 61.0 62.4 63.9 65.3 66.8 68.2 69.7 71.1 20 57.6 59.0 60.4 61.9 63.3 64.8 66.3 67.7 69.2 70.7 72.2 73.7 21 59.9 61.3 32.8 34.3 65.8 67.3 68.8 70.3 71.8 73.3 74.9 76.4 22 62.3 63.8 65.3 66.8 68.3 69.8 71.4 72.9 74.5 76.1 77.6 79.2 23 64.7 66.3 67.8 69.4 71.0 72.5 74.1 75.7 77.3 78.9 80.5 82.2 24 67.3 68.9 70.5 72.1 73.7 75.3 77.0 78.6 80.3 81.9 83.6 85.2 25 70.0 71.7 73.3 75.0 76.6 78.3 80.0 81.7 83.3 85.1 86.8 88.5 26 72.9 74.6 76.3 78.0 79.7 81.4 83.1 84.8 86.6 88.4 90.1 91.9 27 75.9 77.6 79.4 81.1 82.9 84.6 86.4 88.2 90.0 91.9 93.7 95.5 28 79.0 80.8 82.6 84.4 86.3 88.1 89.9 91.8 93.7 95.6 97.5 99.4 29 82.4 84.2 86.1 87.9 89.8 91.7 93.7 95.6 97.5 99.5 101.5 103.5 30 85.9 87.8 89.7 91.7 93.6 95.6 97.6 99.6 101.6 103.7 105.7 107.8 31 89.6 91.6 93.6 95.6 97.7 99.7 101.8 103.9 106.0 108.2 110.3 112.5 32 93.6 95.7 97.8 99.9 102.0 104.2 106.3 108.5 110.7 113.0 115.2 117.5 33 97.8 100.0 102.2 104.4 106.6 108.9 111.2 113.5 115.8 118.2 120.5 122.9 34 102.4 104.7 107.0 109.3 111.7 114.0 116.4 118.9 121.3 123.8 126.3 128.8 35 107.3 109.7 112.2 114.6 117.1 119.6 122.2 124.7 127.3 129.9 132.6 135.3 DB37/T 4153 2020 10 表B.3 97 孔定 量盘 法 MPN 表（MPN/100mL）（小孔24 35）（续）大孔阳性数 小孔阳性数 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 112.7 115.2 117.8 120.4 123.0 125.7 128.4 131.1 133.9 136.7 139.5 142.4 37 118.6 121.3 24.0 126.8 129.6 132.4 135.3 138.2 141.2 144.2 147.3 150.3 38 125.0 127.9 130.8 133.8 136.8 139.9 143.0 146.2 149.4 152.6 155.9 159.2 39 132.2 135.3 138.5 141.7 145.0 148.3 151.7 155.1 158.6 162.1 165.7 169.4 40 140.3 143.7 147.1 150.6 154.2 157.8 161.5 165.3 169.1 173.0 177.0 181.1 41 149.5 153.2 157.0 160.9