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郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 企 业 标 准Q /ZZNDQ/ZZND 010-2018混 合 型 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌2018-05-05发 布 2018-05-15实 施郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 发 布备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-2018I前 言本 标 准 起 草 单 位 : 郑 州 农 大 兽 药 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 : 王 小 玉 。本 标 准 为 首 次 发 布 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-20181混 合 型 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌1 范 围本 标 准 规 定 了 混 合 型 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌 的 原 料 要 求 、 技 术 要 求 、 试 验 方 法 、 检 验 规 则 、 标 签 、包 装 、 运 输 和 贮 存 。本 标 准 适 用 于 以 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌 为 主 要 原 料 , 以 蒙 脱 石 或 沸 石 粉 、 玉 米 芯 粉 等 为 载 体 , 经 混合 加 工 而 成 的 混 合 型 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 , 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本 ( 包 括 所 有 的 修 改 单 ) 适 用 于 本 文 件 。GB/T 5917.1 饲 料 粉 碎 粒 度 测 定 两 层 筛 筛 分 法GB/T 5918 饲 料 产 品 混 合 均 匀 度 的 测 定GB/T 6435 饲 料 中 水 分 的 测 定GB 10648 饲 料 标 签GB/T 13079 饲 料 中 总 砷 的 测 定GB/T 13080 饲 料 中 铅 的 测 定 原 子 吸 收 光 谱 法GB/T 13091 饲 料 中 沙 门 氏 菌 的 检 测 方 法GB/T 13092 饲 料 中 霉 菌 的 检 测 方 法GB/T 14699.1 饲 料 采 样GB/T 20195 动 物 饲 料 试 样 的 制 备GB/T 1 8 8 2 3 饲 料 检 测 结 果 判 定 的 允 许 误 差中 华 人 民 共 和 国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 令 ( 2005) 第 75号 定 量 包 装 商 品 计 量 监 督 管 理 办 法 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 1773号 饲 料 原 料 目 录 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 1849号 混 合 型 饲 料 添 加 剂 生 产 企 业 许 可 条 件 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 公 告 第 2045号 饲 料 添 加 剂 品 种 目 录 ( 2013) 3 原 料 要 求生 产 产 品 所 用 原 料 应 符 合 饲 料 原 料 目 录 的 规 定 , 所 用 添 加 物 应 符 合 饲 料 添 加 剂 品 种 目 录 ( 2013) 的 规 定 , 严 禁 使 用 国 家 明 令 禁 止 的 添 加 物 和 化 学 制 品 。4 技 术 要 求4.1 感 官粉 状 物 , 色 泽 均 匀 一 致 , 无 结 块 、 发 霉 变 质 及 异 味 、 异 嗅 。4.2 成 品 粒 度全 部 通 过 2.50 mm编 织 筛 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-201824.3 混 合 均 匀 度混 合 应 均 匀 , 经 测 试 后 其 均 匀 度 之 变 异 系 数 ( CV) 不 大 于 7%。4.4 水 分不 大 于 12.0%4.5 卫 生 指 标总 砷 不 大 于 10mg/kg, 铅 不 大 于 20mg/kg,霉 菌 总 数 不 大 于 4.0 104, 沙 门 氏 菌 不 得 检 出 。4.6 主 要 营 养 成 分主 要 营 养 成 分 指 标 见 表 1。 表 1 主 要 营 养 成 分 指 标产 品 名 称 混 合 型 饲 料 添 加 剂 粪 肠 球 菌 型 型 型 型粪 肠 球 菌 , CFU/g 1.00 103 1.50 103 1.00 105 1.50 1055 试 验 方 法5.1 感 官取 适 量 样 品 , 在 非 阳 光 直 射 条 件 下 , 观 其 色 泽 、 形 态 , 嗅 其 气 味 。5.2 成 品 粒 度成 品 粒 度 的 测 定 按 GB/T 5917.1执 行 。5.3 混 合 均 匀 度混 合 均 匀 度 的 测 定 按 GB/T 5918执 行 。5.4 水 分水 分 的 测 定 按 GB/T 6435执 行 。5.5 粪 肠 球 菌粪 肠 球 菌 的 测 定 按 附 录 A 执 行 。5.6 总 砷总 砷 的 测 定 按 GB/T 13079 执 行 。5.7 铅铅 的 测 定 按 GB/T 13080 执 行 。5.8 沙 门 氏 菌沙 门 氏 菌 的 测 定 按 GB/T 13091 执 行 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-201835.9 霉 菌 总 数霉 菌 总 数 的 测 定 按 GB/T 13092 执 行 。6 检 验 规 则6.1批 次以 同 批 原 料 、 同 一 配 方 、 相 同 设 备 的 每 日 生 产 量 为 一 个 批 次 。6.2采 样按 GB/T 14699.1执 行 。6.3检 验6.3.1 出 厂 检 验出 厂 产 品 由 本 公 司 质 检 部 门 负 责 检 验 , 检 验 项 目 为 感 官 、 粒 度 、 水 分 和 粪 肠 球 菌 。 产 品 检 验 合 格 后方 可 出 厂 , 每 批 出 厂 产 品 应 附 有 质 量 检 验 合 格 证 ( 章 ) 和 使 用 说 明 。6.3.2 型 式 检 验型 式 检 验 为 全 项 目 检 验 , 每 年 不 得 少 于 一 次 。 如 有 下 列 情 况 之 一 时 , 应 进 行 型 式 检 验 :a) 主 要 原 、 辅 材 料 , 配 方 , 生 产 工 艺 或 设 备 发 生 较 大 改 变 时 ;b) 停 产 半 年 以 上 再 恢 复 生 产 时 ;c) 出 厂 检 验 结 果 与 上 次 型 式 检 验 结 果 有 较 大 差 异 时 ;d) 国 家 有 关 部 门 监 督 检 验 与 抽 查 时 。6.4 判 定 规 则检 测 结 果 判 定 的 允 许 误 差 按 GB/T 18823执 行 。6.5 复 检 规 则产 品 在 检 验 中 如 有 一 项 指 标 不 符 合 本 标 准 时 , 应 重 新 加 倍 抽 样 进 行 复 检 。 复 检 结 果 中 仍 有 一 项 指 标不 符 合 本 标 准 时 , 则 该 批 产 品 判 为 不 合 格 品 。7 标 签 、 包 装 、 运 输 和 贮 存7.1 标 签按 GB 10648执 行 。7.2 包 装包 装 物 采 用 无 毒 、 无 害 , 对 产 品 质 量 无 影 响 的 材 料 。 包 装 规 格 ( 净 含 量 ) 为 : 100g、 200g、 300g、400g、 500g、 1Kg、 2Kg等 , 也 可 根 据 用 户 提 出 的 净 含 量 要 求 进 行 包 装 。 包 装 净 含 量 允 许 误 差 应 符 合 定量 包 装 商 品 计 量 监 督 管 理 办 法 的 规 定 。7.3 运 输备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-20184产 品 在 运 输 过 程 中 应 防 止 日 晒 雨 淋 、 包 装 破 损 , 严 禁 与 有 毒 、 有 害 物 质 混 运 。7.4 贮 存产 品 应 贮 存 于 常 温 、 通 风 、 干 燥 处 , 严 禁 与 有 毒 、 有 害 物 质 混 贮 。 在 常 温 条 件 下 , 产 品 保 质 期 为 8个 月 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-20185附 录 A( 规 范 性 附 录 )粪 肠 球 菌 的 测 定A.1 菌 种A.1.1 粪 肠 球 菌 (Enterococcus faecalis)A.1.1.1菌 体 形 态 特 征镜 检 细 胞 呈 球 形 , 呈 对 状 或 短 链 状 排 列 , 革 兰 氏 染 色 阳 性 , 无 芽 孢 , 不 运 动 , 兼 性 厌 氧 。A.1.1.2菌 落 形 态 特 征菌 落 较 小 , 圆 形 , 直 径 率 1.0 2.5mm,乳 白 色 , 边 缘 整 齐 无 褶 皱 , 可 有 淡 淡 的 晕 。A.1.2 杂 菌菌 落 特 征 不 同 于 有 效 菌 的 其 他 所 有 菌 落 均 视 为 杂 菌 。A.2 样 品 制 备准 确 称 取 待 测 样 品 10g放 入 装 有 90ml灭 菌 水 ( 或 0.9%无 菌 生 理 盐 水 ) 和 玻 璃 珠 的 锥 形 瓶 中 并 在震 荡 器 内 振 摇 20min, 即 成 10-1稀 释 液 ; 再 用 移 液 器 准 确 吸 取 10-1稀 释 液 1mL 注 入 装 有 9mL 无 菌 水 的 试管 中 , 充 分 混 匀 即 成 10-2稀 释 液 ; 以 此 类 推 , 连 续 稀 释 , 每 稀 释 一 步 更 换 无 菌 枪 头 , 制 成 10-3、 10-4、10-5、 10-6、 10-7、 10-8等 一 系 列 稀 释 度 菌 液 , 供 平 板 接 种 用 。A.3 倒 平 板用 lmL无 菌 吸 管 分 别 吸 取 不 同 稀 释 度 菌 悬 液 1mL, 分 别 加 至 直 径 为 9cm的 平 皿 中 , 当 培 养 基 冷 却 至40 左 右 , 在 每 个 培 养 皿 中 各 倒 入 约 15mL 培 养 基 , 然 后 迅 速 旋 动 培 养 皿 , 使 菌 悬 液 与 培 养 基 充 分 混 匀 ,置 水 平 位 置 静 止 后 使 之 凝 固 , 每 个 稀 释 度 平 行 做 2个 平 皿 。A.4培 养待 培 养 基 凝 固 后 , 倒 置 于 37 厌 氧 培 养 箱 内 培 养 48h 后 取 出 。A.5 计 数 培 养 基MRS培 养 基 : 葡 萄 糖 2.0%, 蛋 白 胨 1.0%, 牛 肉 膏 1.0%, 酵 母 膏 0.5%, 柠 檬 酸 二 铵 0.2%,乙 酸 钠 0.5%,磷 酸 氢 二 钾 0.5%, 硫 酸 锰 0.005%, 硫 酸 镁 0.02%, 土 温 -800.1%, 2%琼 脂 粉 , pH=5.7 6.0,121 灭 菌30min。A.6 计 数以 平 板 上 出 现 30 300个 菌 落 数 的 稀 释 度 平 板 为 计 数 标 准 。只 有 一 个 稀 释 度 , 其 平 均 菌 落 数 在 30 300之 间 时 , 则 以 该 平 均 菌 落 乘 以 其 稀 释 倍 数 。当 若 有 两 个 稀 释 度 , 其 平 均 菌 落 数 均 在 30 300 之 间 , 应 按 两 者 菌 落 总 数 之 比 值 来 决 定 。 若 其 比 例小 于 2 应 计 数 两 者 的 平 均 数 , 若 大 于 2 则 计 数 其 中 稀 释 度 较 小 的 菌 落 总 数 。若 三 个 稀 释 度 的 平 均 菌 落 数 均 大 于 300, 则 应 按 稀 释 度 最 高 的 平 均 菌 落 数 乘 以 稀 释 倍 数 。若 三 个 稀 释 度 的 平 均 菌 落 数 均 小 于 30, 则 应 按 稀 释 度 最 低 的 平 均 菌 落 数 乘 以 稀 释 倍 数 。若 三 个 稀 释 度 的 平 均 菌 落 数 均 不 在 30 300之 间 , 则 以 最 接 近 的 平 均 菌 落 数 乘 以 稀 释 倍 数 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分Q/ZZND 010-20186A.7计 算 公 式 每 克 样 品 中 粪 肠 球 菌 数 按 式 ( 1) 计 算 :A B V1X= m V2式 中 :X-每 克 样 品 中 粪 肠 球 菌 个 数 , 单 位 为 个 每 克 ( CFU/g) ;A-菌 落 平 均 数 , 单 位 为 个 ;B-稀 释 倍 数 ;V1-母 液 悬 菌 液 的 体 积 , 单 位 为 毫 升 ( ml) ;m-试 液 质 量 , 单 位 为 克 ( g) ;V2-接 种 量 , 单 位 为 毫 升 ( ml) 。备案 2018年07月07日 10点23分备案 2018年07月07日 10点23分
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