小黑麦耐盐性鉴定技术规程DB 3705／T 12-2023.pdf

ICS 65.020.20 CCS B 05 DB3705 东营市地方标准 DB 3705/T 122023 小黑麦耐 盐性鉴定 技术规程 Technical code of practice for identification of salt tolerance in triticale 2023-10-26 发布 2023-11-26 实施 东营市市 场监督 管 理局 发 布 DB 3705/T 12 2023 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规 范性 引用 文件.1 3 术 语和 定义.1 4 鉴 定准 备.1 培养 容器 的选 择.1 4.1 种子 选择 与处 理.1 4.2 盐溶 液的 制备.1 4.3 5 萌 发期 处理.2 播种.2 5.1 培养.2 5.2 性状 调查.2 5.3 测定 值计 算.2 5.4 6 苗 期处 理.3 播种.3 6.1 培养.3 6.2 性状 调查.4 6.3 测量 值计 算.4 6.4 7 耐 盐性 鉴定.4 种子 萌发 期耐 盐性 鉴 定.4 7.1 苗期 耐盐 性鉴 定.5 7.2 附录A（规 范性）AMurashige&Skoog 营养 液组 分含量 表.6 DB 3705/T 12 2023 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任。本文件 由东 营市 农业 农村 局提出、归 口并 组织 实施。本文件 起草 单位：黄 河三 角洲农 业高 新技 术产 业示 范区盐 碱地 综合 利用 服务 中心、中国 农业 科 学 院烟草研 究所、山东 盐碱地 现代农 业有限 责任 公司、国家盐 碱地综 合利 用技术 创新中 心、山 东师 范大 学、青岛农 业大 学、东营 市市 场监管 事务 服务 中心。本文件主要起草人：徐宗昌、王萌、孟晨、李义强、陈敏、杨辉、鲁雪莉、张成省、王宝山、冯晓菲、郑睿超、李影、韩国梁、肖静、唐璐璐、王晓林、崔帅、李玉玲、孙孟海。DB 3705/T 12 2023 1 小 黑麦耐 盐性鉴定 技术规 程 1 范围 本文件 描述 了小 黑麦 萌发 期和苗 期耐 盐性 鉴定 的鉴 定前准 备、萌 发期 和苗 期 处理、测 定值 计算、规定了耐 盐性 的分 级标 准等。本文件 适用 于小 黑麦 种质 资源萌 发期 和苗 期耐 盐性 鉴定。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB/T 3543.4 农作 物种 子 检验规 程 发芽 试验 GB 5749-2022 生活 饮用 水卫生 标准 GB 6142-2008 禾本 科草 种子质 量分 级 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。耐盐性 salt tolerance 植物在 盐胁 迫下 其生 长发 育和产 量形 成对 盐害 的耐 受能力。4 鉴定准 备 培养容 器的 选择 4.1 使用长、宽、深 为18.0 cm 14.0 cm 6.0 cm 规格 的 塑料盘 作为 培养 床，介质 使用粒 径为1.0 mm2.0 mm 的蛭 石。种子选 择与 处理 4.2 4.2.1 种子选 择 种子质 量应 符合GB 6142-2008 中 一级 要求。每 份待 测 样品选 取种 子600 粒，置 于 干燥器 中。4.2.2 种子处 理 播种前 使用符 合GB 5749-2022 中表1和表3规定 的自来 水冲洗 小黑麦 种子3 min，洗掉种 子表面 附着的灰尘 和病 原菌。盐溶液 的制 备 4.3 DB 3705/T 12 2023 2 首先配 制1/20 MS（Murashige&Skoog，pH=5.8,配 方 见附录A）液体 培养 基溶 液 做为对 照溶 液，搅拌待充 分溶 解；配制0.9%（w/v）的NaCl 溶 液：9 g NaCl（分 析纯，纯度大 于等于99.5%）定 容 到1000 mL 1/20 MS培养基 中（pH=5.8），搅 拌待充 分溶 解；配制1.2%（w/v）的NaCl 溶 液：12 g NaCl（分 析纯，纯度大 于等 于99.5%）定 容 到1000 mL 1/20 MS培养基 中（pH=5.8），搅 拌待充 分溶 解。5 萌发期 处理 播种 5.1 使用对 照溶 液和0.9%的NaCl 溶液 将其 完全 浸透 备用。然后用 镊子 将预 处理 的种 子插于 培养 床中，播深1.5 cm。处理 和对 照均 设3次 重复，每 个重 复30 粒 种子。培养 5.2 将小黑 麦苗 盘置 于光 照培 养箱中 培养，昼/夜温 度为28/25,相对 湿度80%，光源为 白光，光照 强度750 lx 1250 lx，每 天 光照时 数16 h（光）/8 h（暗）。性状调 查 5.3 培养第2 d 开始，统 计当天 正常发 芽的 种子 数（胚根 突破种 皮2 mm 3 mm）。种 子萌发 统计 到第8 d，并测量 第8 d 胚 根长(种子 下部到 根顶 端的 长度)。测定值 计算 5.4 5.4.1 发芽率（G）计 算 按式（1）计算。式中：G 发 芽率，单 位为 百分 号（%）；N8 第8 d 发芽 种子 数，单 位为粒；Ns 供 检种 子数，单 位为 粒。5.4.2 发芽指 数（GI）计算 按式（2）计算。式中：GI 发 芽指 数；Gt 发 芽指 数，处理 后第 t天的 绝对 发芽 数，单位 为 粒；Dt 相 应的 发芽 天数，从 培养的 第2 d开 始统 计，至 第8 d，单 位为 天（d）。5.4.3 相对发 芽率（RG）计 算 按式（3）计算（1）（2）DB 3705/T 12 2023 3 式中：RG 相 对发 芽率；Gt 盐 处理 发芽 率，单位 为百分 号（%）；Gck 对 照发 芽率，单 位为 百分号（%）。5.4.4 相对发 芽势（RGF）计算 按式（4）计算。式中：RGF 相对 发芽 势；GFt 盐处 理发 芽势；GFck 对照 发芽 势。5.4.5 相对发 芽指 数（RGI）按式（5）计算。式中：RGI 相对 发芽 指数；GIt 盐处 理发 芽指 数；GIck 对照 发芽 指数。5.4.6 相对胚 根长（RRL）按式（6）计算。式中：RRL 相对 胚根 长；RLt 盐处 理胚 根长，单 位 为厘米（cm）；RLck 对照 胚根 长,单 位为 厘米（cm）。6 苗期处 理 播种 6.1 使用对 照溶液 将其 完全浸 透备用。然后 用镊 子将4.2 中的种 子插于 蛭石 中，播 深1.5 cm。处 理和 对照均设3次 重复，每 个重 复30粒种 子。培养 6.2（3）（4）（5）（6）DB 3705/T 12 2023 4 将苗盘 放至5.2 中的 培养 箱 内，每3 d 每 个培养 床补 充 对照溶 液100 mL。萌发 至14 d（二 叶一 心期）时，处 理组浇500 mL 1.2%NaCl 溶 液，对照组 浇500 mL 对照 溶液浇 透，1 h 后 倒 掉多余 的对照 和处 理溶液。性状调 查 6.3 处理后 第7 d 测定根 长（种 子下部 到根顶 端的 长度）、苗高（种子 基部 到幼苗 顶端的 长度），称 量地上干 生物 量（蛭石 表面 以上幼 苗所 有部 分的 干重）。测量值 计算 6.4 6.4.1 相对苗 高（RMSL）计 算 按式（7）计算。式中：RMSL 相对 苗高；MSLt 盐处 理苗 高，单位 为厘米（cm）；MSLck 对照 苗高，单 位为 厘米（cm）。6.4.2 相对根 长（RMRL）计 算 按式（8）计算。式中：RMRL 相对 根长；MRLt 盐处 理根 长，单位 为厘米（cm）；MRLck 对照 根长，单 位为 厘米（cm）。6.4.3 相对地 上干 重（RSDW）计 算 按式（9）计算。式中：RSDW 相对 地上 干重；SDWt 盐处 理地 上干 重，单位为 克（g）；SDWck 对照 地上 干重，单 位为克（g）。7 耐盐性 鉴定 种子萌 发期 耐盐 性鉴 定 7.1 耐盐指 数按 式（10）进行 计算。（7）（8）（9）DB 3705/T 12 2023 5 式中：STIg 萌发 期耐 盐指 数；RG 相 对发 芽率；RGF 相对 发芽 势；RGI 相对 发芽 指数；RRL 相对 胚根 长。根据萌 发期 耐盐 指数 对小 黑麦种 质进 行耐 盐性 分级，见表1。表1 小黑麦 萌发 期耐 盐性 鉴定 标准 耐盐级 别，级 萌发期 耐盐 指数（STIg）耐盐性 1 0.80STIg 高耐盐 2 0.60STIg0.80 中耐盐 3 0.40STIg0.60 低耐盐 4 0.20STIg0.40 敏感 5 STIg0.20 高敏感 苗期耐 盐性 鉴定 7.2 耐盐指 数按 式（11）进行 计算。式中：STIs 苗期 耐盐 指数；RMSL 相对 苗高；RMRL 相对 根长；RSDW 相对 地上 干重。根据苗 期耐 盐指 数对 小黑 麦种质 进行 耐盐 性分 级，见表2。表2 小黑 麦苗 期耐 盐性 鉴 定标准 耐盐级 别，级 苗期耐 盐指 数（STIS）耐盐性 分级 1 0.80STIS 高耐盐 2 0.60STIS0.80 中耐盐 3 0.40STIS0.60 低耐盐 4 0.20STIS0.40 敏感 5 STIS0.20 高敏感（10）（11）DB 3705/T 12 2023 6 A 附录A（规范 性）AMurashige&Skoog 营 养 液组分 含量 表 组分 工作浓 度（mg/L）Potassium Nitrate/硝酸钾 1900 Ammonium Nitrate/硝酸铵 1650 Potassium Phosphate Monobasic/磷酸二 氢钾 170 Magnesium Sulfate/硫酸镁 370 Calcium Chloride/氯化 钙 440 Potassium Iodide/碘化钾 0.83 Boric Acid/硼酸 6.2 Manganese Sulfate/硫 酸锰 22.30 Zinc Sulfate/硫酸锌 8.6 Sodium Molybdate/钼酸钠 0.25 Cupric Sulfate/硫酸铜 0.025 Cobalt Chloride.6H2O/氯化钴 0.025 Na2EDTA/乙二 胺四 乙酸 二 钠 37.3 Ferrous Sulfate/硫酸亚 铁 27.8 Myo-Inositol/肌醇 100 Glycin/甘氨酸 2 Thiamine.HCl/盐 酸硫 胺素 0.1 Pyridoxine.HCl/盐酸吡 哆醇 0.5 Nicotinic Acid/烟酸 0.5 A