非林地人参种植 第1部分：产地环境技术条件DB22／T 1736-2012.pdf

ICS 65.020.20 B 38 备案号：36027-2013 DB22 吉林省 地方标准 DB 22/T 1736 2012 非林地人参种植 第 1部分：产地环境技术条件 Nonforest land plant ginseng Part1：Environmental Technology 2012-12-21发布 2013-01-01实施 吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 1736 2012 I 前 言 本部分按 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。非林地人参种植标准共 4部分：第 1部分：产地环境技术条件；第 2部分：种子、种苗技术要求；第 3部分：种植管理技术规范；第 4部分：鲜参质量。本部分为非林地人参种植的第 1部分 本部分由吉林省质量技术监督局提出。本部分由吉林省农业委员会归口。本部分起草单位：吉林省集安益盛药业股份有限公司、吉林农业大学。本部分主要起草人：张益胜、任跃英、李国君、林成日、张洪娟、白亚静、刘子湫、刘大亮、张明 宇、孙立军、徐彤。DB22/T 1736 2012 1 非林地人参种植 第 1部分：产地环境技术条件 1 范围 本标准规 定了 非林地人参种植产地环境技术条件的 选 地、整 地、质量要求、检验方法、检验 规则、判定 规则。本标准 适用于 人参主产 区 非林地人参种植产地环境技术条件的 选择。2 规范性引用文件 下列文 件 对于 本 文 件的 应用是必不可少 的。凡是注 日 期 的 引用文 件，仅注 日 期 的 版 本 适用于 本 文 件。凡是不注 日 期 的 引用文 件，其最新版 本（包括所 有的 修改 单）适用于 本 文 件。GB 3095 环境 空气 质量标准 GB/T 4285 农药安 全使用 标准 GB/T 6920 水 质 PH值 的 测定 玻璃电极法 GB/T 7467 水 质 六价铬 的 测定 二苯碳酰二肼 分 光光度法 GB/T 7475 水 质 铜、锌、铅、镉 的 测定 原 子 吸收 分 光光度法 GB/T 7484 水 质 氟化物 的 测定 离 子 选择电极法 GB/T 7485 水 质 总砷 的 测定 二乙基二硫代氨基甲酸银 分 光光度法 GB/T 14550 土壤中六六六和滴滴涕 的 测定 气相 色谱 法 GB/T 17134 土壤 质量 总砷 的 测定 二乙基二硫代氨基甲酸银 分 光光度法 GB/T 17136 土壤 质量 总 汞 的 测定 冷 原 子 原 子 吸收 分 光光度法 HJ 491 土壤 总铬 的 测定 火焰 原 子 吸收 分 光光度法 HJ 597 水 质 总 汞 的 测定 冷 原 子 吸收 分 光光度法 GB/T 17138 土壤 质量 铜、锌 的 测定 火焰 原 子 吸收 分 光光度法 GB/T 17141 土壤 质量 铅、镉 的 测定 石墨炉 原 子 吸收 分 光光度法 NY/T 395 农 田 土壤 环境质量监 测 技术规范 NY/T 396 农 田 水 源 环境质量监 测 技术规范 NY/T 397 农 区 环境 空气 质量监 测 技术规范 NY/T 1121.2 土壤检测 第 2部分:土壤 pH的 测定 NY/T 1121.4 土壤检测 第 4部分:土壤 容重 的 测定 NY/T 1121.6 土壤检测 第 6部分:土壤 有 机 质的 测定 NY/T 1604 人参产地环境技术条件 NY/T 1616 土壤中 9种 磺 酰 脲类除 草 剂残留 量的 测定 液 相 色谱 质 谱 法 NY/T 8170 数 值修 约 规则 与 极 限 数 值 的 表示 和判定 3 术语和定义 下列 术 语 和定 义 适用于 本 文 件。DB22/T 1736 2012 2 3.1 非林地 non-forest land 伐 林地 或 林地 以外坡 度 低 于 25的 土 地，如 农 田 地、荒 地 等。3.2 基准线 datum line 为 确 定 参 床 位 置，按 预做 参 床走向划 出的 一 条 直线。3.3 端线 end line 在 基 准 线 的 两端各做一 条 与 其 垂直 的 线。3.4 土壤质地 soil texture 土壤物 理 性 质 之一，不 同 大 小直径 的 土壤 颗粒 的 组合状况。一 定 容积 的 土壤（包括土 粒及粒间 的 孔 隙）烘干后 的 重 量 与同容积 水 重 的 比 值。4 选地 4.1 适宜栽培区 非林地人参 适 宜栽培 区应选择 位 处 15个 人参主产 区，10 积温 范 围 为 1900-2800，年平均 气 温 1.5-7.5，年降雨 量 600 mm-1200 mm，无霜 期 90 d-150 d，年 日 照时数 为 2250 h-2500 h。海拔高 度 100 m-1500 m。4.2 环境质量 人参 生 产 基 地 应选择 大 气、水 质、土壤 无 污染 的地 区。大 气 环境标准 符 合 GB 3095中二 级 标准。灌溉 水 标准 应 符 合 NY/T 1604要求。非林地人参种植 土壤 质地 应 为 微沙 壤土、轻 壤土、中壤土、重 壤土。土壤中 农药 残留 和 重 金属 限量 应 符 合 NY/T 1604中 要求。选 地 前 对 除 草 剂 限量 控制，土壤中不 得 检 出 磺酰 脲类除 草 剂、均 三氮 苯 类除 草 剂、咪唑啉酮 类除 草 剂，选择 排 水 透 气 性 良好，呈弱 酸 性，pH在 5.0-6.5之间。4.3 地势 选择 地 势 平 坦，坡 度 25以 下，不 易发生 水 灾、旱灾、风灾 及 冻害 的地 块。4.4 前茬作物 适 宜 作 物 为 禾 本 科（玉米、麦 类等）、豆科（大 豆 等）；不适 宜 作 物 为白 菜、萝卜 等 叶 类 植 物。4.5 场地区划 根据 整 个 场 地的地 形进行 区 划，划 出 整 个 地 块 的种植 区 域 及 排 水 沟，确 保 区 划后 的 场 地 得到 合 理 利 用，既 有 利 于 人参 生长，合 理 利 用光 照，又能防止 水土 流失。见图 1。DB22/T 1736 2012 3 图 1 场地区划图 5 整地 5.1 挖排水沟 确 定 地 块 后在 其 周 围 挖排 水 沟，排 水 沟宽 度 为 150 cm-250 cm，深 度 为 150 cm-200 cm。5.2 土地休闲 休闲 时间 不 得 低 于 1 年。5.3 翻地 每 年 4月 中 旬到 5月上旬开始，对土 地 进行翻 地，翻 地 次 数 累计达到 15 次 以 上，每次翻 地 深 度不 低 于 30 cm，相 邻 两 次翻 地的 方 向 不 能 一 致，不 得遗漏死角。5.4 旋地 旋 地 在 施 用 秸 秆、有 机 肥、绿肥、土壤 消毒 剂之后及做床之 前 均 要 进行，旋 地 后 达到 地 面 平 整 的 效果。5.5 清除杂石 将 土壤中 直径 大 于 6 cm的 石 头清 除。5.6 土壤消毒 5.6.1 时间 DB22/T 1736 2012 4 做床 前，结 合 翻 地 和 旋 地 进行。5.6.2 方法 土壤 消毒 一 方 面通过 翻 耕暴晒完 成，另 一 方 面通过 药 剂 消毒完 成。5.6.3 要求 药 剂 的 选用应 符 合 GB/T 4285的规 定。禁 止 使用 农药参 见 附录 A。5.7 增施秸秆 5.7.1 种类 采 用 秸 秆 进行 还 田,一 般 作 物 有：大 豆、玉米、小 麦 等。5.7.2 方法 将 秸 秆切 成 长 度 为 5 cm-10 cm后 施 入 土壤中。5.7.3 用量 干 秸 秆 施 入 量要 根据 土壤 有 机 质 含 量 确 定。具体 施 用 量 见 表 1。表 1 秸秆施入量 有 机 质 含 量 g/kg 秸 秆 施 入 量 t/ha 有 机 质 含 量 g/kg 秸 秆 施 入 量 t/ha 21-30 4.5-6 11-20 6-7.5 6-10 7.5-10.5 6 10.5-13.5 5.8 施肥 5.8.1 种类 选择 能 够满足 人参种植 土壤改 良 对 养 分 及 有 机 质 含 量 基 本 需 求的、完 全 腐熟 的有 机 肥料。5.8.2 方法 有 机 肥 在 5月-6月 整 地 时 施 用，要 保 证撒 施 均 匀；在 土壤 消毒通过 安 全 间 隔 期 后，进行 土壤 灌施生 物 肥料。5.8.3 用量 有 机 肥 使用 量 根据 土壤 有 机 质 含 量 及 有 机 肥 有 机 质 含 量 一同确 定，一 般 30 t/ha-120 t/ha；生 物肥 施 用 量 根据 不 同 生 物 肥料活菌 数确 定 施 用 量，施 用 次 数 2 次-3 次。5.9 做床 5.9.1 参床 走向 根据 坡向确 定 参 床走向，平 地参 床以 东偏南 30 为 宜。棚式 和 排 水 确 定 参 床走向，一 般拱 形 棚 根据 排 水 确 定 参 床走向；一 面 坡 参 床走向以 为 优。DB22/T 1736 2012 5 5.9.2 定基准线 一 般 使用 罗盘 测定，将罗盘放 在 地 块 的 一端 作 为 端 点，使 参 床 要求 方 向与 罗盘指针 方 向一 致，池绳 与 罗盘指针 方 向平 行 后，将池绳 两端 固 定，固 定 后，沿池绳 方 向 放 上 白 灰即 为 基 准 线。5.9.3 挂 端线 从 基 准 线端 点 起，沿 端线 方 向 用 池绳 标出参 床 的 宽 度 及 作 业 道 宽 度，立 标 杆，以 此 类 推，在端线两 端 上 立 好 标 杆。5.9.4 方 式 在 播 种 或 移 栽 前 按 照 参 床 规 格，用 机 械 或 人 工 做床。5.9.5 规 格 床 宽 100 cm-150 cm，床高 30 cm-50 cm，作 业 道 60 cm-80 cm，床 面 平 整。5.10 挖排水沟 做床时在 运输道 两 边 挖排 水 沟，排 水 沟宽 度 为 50 cm-150 cm，深 度 为 50 cm-150 cm。6 质量要求 改 良 后 土壤 有 机 质 含 量 不 低 于 3%，土壤 pH在 5.0-6.5之间，土壤 容重在 0.9-1.0，有 效贮 水 量 40%-50%。7 检验 方法 7.1 空气 质量 按 照 GB 3095中二 级 标准 执 行。7.2 灌溉 水质量 7.2.1 pH 按 照 GB/T 6920执 行。7.2.2 总汞 按 照 HJ 597执 行。7.2.3 总镉、总铅 按 照 GB/T 7475执 行。7.2.4 总砷 按 照 GB/T 7485执 行。7.2.5 六价镉 按 照 GB/T 7467执 行。DB22/T 1736 2012 6 7.2.6 氟化 物 按 照 GB/T 7484执 行。7.3 土壤质量 7.3.1 质地 土壤 质地的分 类 可 以 根据 测定 分 析结果 确 定，也 可 以 用 经 验法 来 确 定。7.3.2 容重 土壤 容重 的 测定 按 NY/T 1121.4 执 行。7.3.3 pH 按 NY/T 1121.2方法 进行 测定。7.3.4 有机 质 按 NY/T 1121.6方法 进行 测定。7.3.5 总汞 按 照 GB 17136执 行。7.3.6 铅、镉 按 照 GB 17141执 行。7.3.7 总砷 按 照 GB 17134执 行。7.3.8 铬 按 照 HJ 491执 行。7.3.9 六六六、滴滴涕 按 照 GB/T 14550执 行。7.3.10 磺酰脲 类除 草剂残留 量 的测 定 按 照 NY/T 1616执 行。7.3.11 均三氮苯 类除 草剂残留 量 的测 定 参 照 附录 B.1 7.3.12 咪唑啉酮 类除 草剂残留 量 的测 定 参 照 附录 C.1 8 检验 规 则 DB22/T 1736 2012 7 8.1 采样 方法 8.1.1 空气 质量 按 照 NY/T 397执 行。8.1.2 灌溉 水质量 按 照 NY/T 396执 行。8.1.3 土壤质量 按 照 NY/T 395执 行。8.2 检验结果的数值修约 按照 NY/T 8170执行。9 判 定规 则 对所 获 得 的 各 项 检验 结果 做 出分 析报告，并 进行 结果 判定。若 检验 结果 均 符 合 本标准要求，则 判定 该 环境 适 宜 非林地人参种植。若 检验 结果 不 在合 格 的 指 标范 围，允许 对不 合 格项目 重 新 取样复 测，复 测仍 为 不 合 格 的，则 判 该 环境 不适 宜 非林地人参种植。DB22/T 1736 2012 8 A A 附 录 A（规范性 附录）吉林省人参 安全优 质规范 化生 产 禁 用 农药名录 表 A.1 吉林省人参 安全优 质规范 化生 产 禁 用 农药名录 种 类 农药 名称 禁 用原 因 有 机 氯杀虫 剂 滴滴涕、六六六、林 丹、艾氏 剂、狄试 剂 高残 毒 有 机 磷杀虫 剂 甲 拌磷、乙 拌磷、久 效 磷、对硫 磷、甲基对硫 磷、甲 胺 磷、甲基 异柳磷、治螟磷、氧 化 乐 果、磷铵、地 虫 硫 磷、灭克磷（益 收 宝）、水 胺 硫 磷、氯 唑 磷、硫 线 磷、杀扑磷、特丁 硫 磷、克 线 丹、苯 线 磷、甲基硫 环 磷 剧 毒、高 毒 氨基甲酸 酯杀虫 剂 涕 灭威、克百威、灭多威、丁 硫 克百威、丙 硫 克百威 剧 毒、高 毒 或 代 谢 物 高 毒 二甲基甲 脒 类 杀虫杀螨 剂 杀虫脒 慢 性 毒 性、致 癌 卤 代 烷 类 熏蒸杀虫 剂 二 溴 乙 烷、环 氧 乙 烷、二 溴氯丙烷、溴 甲 烷 致 癌、致 畸、高 毒 无机 砷 杀虫 剂 阿维 菌 素 砷酸 钙、砷酸铅 高 毒 有 机 砷 杀 菌 剂 甲基 胂 酸锌（稻脚青）、甲基 胂 酸 钙（稻宁）、甲基 胂 酸 铁铵（田 安）、福美 甲 胂、福美胂 高残 毒 有 机汞 杀 菌 剂 氯 化乙基 汞（西力 生）、醋 酸苯 汞（赛力散）剧 毒、高 毒 氟 制 剂 氟化 钙、氟化 钠、氟乙酸 钠、氟 氯 酸 胺、氟 硅 酸 钠 剧 毒、高 毒，易 产 生 药 害 有 机 氯杀螨 剂 三 氯杀螨醇 我 国产 品 含 滴滴涕 有 机 磷杀 菌 剂 稻瘟净、异稻瘟净（异嗅 米）高 毒 取 代苯 类 杀 菌 剂 五氯硝 基苯、稻瘟醇（五氯 苯甲 醇）致 癌、高残留 有 机 锡杀 菌 剂 三 苯基 醋 酸 锡（薯瘟锡）、三 苯基 氯 化 锡、三 苯基 氢 基锡（毒菌 锡）高残留、慢 性 毒 性 2,4D类 化 合 物 除 草 剂，或 植 物 生长 调节 剂 杂 质 致 癌 克螨特 慢 性 毒 性 拟 除 虫菊酯杀虫 剂 所 以 拟 除 虫菊酯 类 杀虫 剂 对水 生 物 毒 性 大 二苯 醚 类除 草 剂 除 草 醚、草 枯醚 慢 性 毒 性 植 物 生长 调节 剂 有 机合 成的植 物 生长 调节 剂 DB22/T 1736 2012 9 B B 附 录 B（资料 性 附录）高效液相色谱 法 测 定土壤 中均三氮苯 类除 草剂 B.1 材料与 方法 B.1.1 主 要 仪器与试剂 高 效 液 相 色谱 仪；二极 管 阵 列检测 器；色谱 柱：Wa-ters Symmetry C18，5 m，4.6 mm 250 mm；索氏 提 取 器：250 mL；旋 转蒸 发 器；氮 吹仪；瓷 制 研磨器；250 mL广 口 棕 色 玻璃 瓶(聚四 氟乙 烯衬里)；固 相 萃 取 小 柱：中 性 氧 化 铝，3cc 1 000 mg。标准 物 质：含 西 玛津、莠去津、扑灭 通、莠 灭净、扑灭 津、扑 草 净、去 草 净，质量 浓 度 均 为 100 mg/L；溶 剂：甲 醇、乙 腈(流 动 相)(色谱 纯)，水 为 Milli-Q纯 水；提 取 试 剂：乙 腈(农 残 级)或 甲 醇-乙 腈(体 积比 3 7)(农 残 级)；硫酸 钠，用二 氯 甲 烷 洗涤，置 浅 盘 中 在 400 加热 4 h进行 纯 化。B.1.2 样品采集、保存与处理 采 集 适 量 土壤于 采样 瓶 中，4 冷 却，最 多 可 保 存 14 d；土壤 样 品 如 含 水 较 多，倾斜弃去 样 品 上 面 的 水 层，慢慢 沥 干 水 分，充 分 混 合 样 品，弃去 异 物；适 合 研磨 的 土壤 样 品，用 瓷 制 研磨器研磨，使其 通过 1 mm 的标准 筛。测定水 分 百 分 率：某些情 况 下，样 品 结果 要求 以干重 计，若需 要 这 种 数 据，则 应 在 称 取 作 分 析 测定 用 样 品 的 同时，称 取 一 份 样 品 进行 水 分 测定。水 分 测定方法：在 称 取 用于 提 取 的 样 品 之后，立 即 称 取 5-10 g样 品 于 一个 称 重 过 的 坩埚 中，在 105 烘干 过 夜 以 测定其水 分 百 分 率。在 称 重 前 放 于 干 燥 器 中 冷 却 30 min。处 理 方法：将 10 g样 品 和 10 g无 水硫酸 钠 混 合，放 于 提 取 套筒 中，于 250 mL圆底烧瓶 中，加 入 3-4粒 沸 石，加 入 150 mL提 取 溶 剂，将 烧瓶连接 在 提 取 器 上，提 取样 品 16-24 h，提 取完 成 后，让 提 取 液冷 却，取 下 圆底烧瓶；将 250 mL圆底烧瓶连接 在 旋 转蒸 发 器 上，以 60 水 浴，减压浓缩至 5 mL以 下。转移 浓缩 液 至 氮 吹 管 中，再 用 5 mL提 取 液 分 2-3次 洗涤烧瓶，一 并将 洗涤 液 转 移 至 氮 吹 管 中；在 60 水 浴中，将 浓缩 液 用 氮 气 吹 至近 干，加 二 氯 甲 烷 4 mL至 氮 吹 管 中，充 分 溶解。用 6 mL二 氯 甲 烷 活 化 氧 化 铝小 柱，淋洗 液 弃去，在 氧 化 铝填 料 快 要 露 出 二 氯 甲 烷 液 面 时，将 氮 吹 管 中二 氯 甲 烷 浓缩 液 上 柱，让 其 依靠 重 力 作 用 缓 慢 流 下，收 集 流 出 液，再加 6 mL二 氯 甲 烷 分 两 次 对 氮 吹 管 进行 洗涤，一 并 上 柱，收 集 洗脱液 至 氮 吹 管 中；在 35 左右 水 浴 中，用 氮 气 将 二 氯 甲 烷吹 至近 干，用甲 醇 定 容 至 1 mL，供 液 相 色谱 分 析。B.1.3 仪器 条件 流 动 相 为 A乙 腈、B纯 水，梯 度 淋洗，梯 度 洗脱 见 表 B.1。脱 气方 式 为 在线 脱 气；色谱 柱 温：3 5；进 样 量：10 L；二极 管 阵 列检测 器，检测 波 长 224 nm。表 B.1 流动相梯 度 表 时间 min 流 量 ml min-1 A(乙 腈)%B(水)%曲 线-1.00 20 80-DB22/T 1736 2012 10 表 B.1 流动相梯 度 表（续）时间 min 流 量 ml min-1 A(乙 腈)%B(水)%曲 线 2.00 1.00 20 80 6 11.00 1.00 35 65 6 12.00 1.00 43 57 6 16.00 1.00 43 57 6 30.00 1.00 60 40 6 31.00 1.00 65 35 6 38.00 1.00 75 25 6 43.00 1.00 100 0 6 55.00 1.00 20 80 10 B.2 结果 B.2.1 标准 曲 线 的 制 作 配 制 7 种 均 三氮 苯 类除 草 剂 标准 溶 液，质量 浓 度 范 围 分 别 为 0.10-2.00 mg/L。检测 结果 表 明，均 三氮 苯 类除 草 剂各组 分的标准 曲 线 相 关系 数均在 0.9992以 上，见 表 B.2。表 B.2 标准 曲 线 与 方法 检 出限 除 草 剂 标准 曲 线 相 关系 数 r 检 出限 g kg-1 西 玛津 1.07 105x-7.03 102 0.9997 1.68 莠去津 1.01 105x+2.22 103 0.9997 0.84 扑灭 通 7.99 104x-2.53 103 0.9992 2.07 莠 灭净 9.45 104x-5.65 102 0.9996 1.65 扑灭 津 9.78 104x-3.84 102 0.9990 0.84 扑 草 净 9.57 104x-1.37 103 0.9997 1.68 去 草 净 9.13 104x-1.06 103 0.9996 1.77 B.2.2 方法 检 出限 在 10 g土壤中 添加 各类除 草 剂 0.1 g，使 得 土壤中 各类除 草 剂 质量分 数均 为 10.0 g/kg，按 照 土壤 处 理 方法 平 行 分 析 7 份 加 标 样 品，计 算 检 出限，结果 见 表 2。B.2.3 方法 回收率、精密度 方法 的 精密 度和 回 收 率 试 验 结果 见 表 B.3。DB22/T 1736 2012 11 表 B.3 精密度、回收率 试验（n=7）添加 量 0.1 g 添加 量 0.5 g 除 草 剂 平均 回 收 率%RSD%平均 回 收 率%RSD%西 玛津 105.0 5.33 106.9 5.02 莠去津 103.1 2.72 97.8 2.27 扑灭 通 101.0 6.83 100.9 5.60 莠 灭净 100.0 5.50 97.1 3.92 扑灭 津 95.3 2.95 95.0 1.24 扑 草 净 100.0 5.60 101.0 5.20 去 草 净 96.5 6.15 98.0 5.10 B.2.4 提取 方法和 提取溶 剂的 选 择 提 取 溶 剂 为 正己 烷-丙 酮(体 积比 1 1)，甲 醇-乙 腈(体 积比 3 7)，乙 腈。提 取 方法：超声 仪 超声萃 取 和 索氏 提 取，结果 见 表 B.4。结果 表 明，超声萃 取 先 用 提 取 溶 剂 浸 提 20 h，超声波萃 取 20 min，无论 采 用 哪 种 溶 剂 效果 都 不 理 想。索氏 提 取 时间 为 1620 h，经 反 复 试 验 正己 烷-丙 酮 萃 取效果 较 差。最 终 选 取 乙 腈 或 甲 醇-乙 腈(体 积比 3 7)作 为提 取 溶 剂，两 种提 取 溶 剂 的提 取结果 几乎 一 致。表 B.4 提取 方法和 提取溶 剂的 选 择 超声萃 取 回 收 率%索 式 提 取 回 收 率%除 草 剂 乙 腈 正己 烷-丙 酮 乙 腈 甲 醇-乙 腈 正己 烷-丙 酮 西 玛津 7.6 ND 106.9 105.0 59.2 莠去津 25.4 8.4 97.8 103.1 71.6 扑灭 通 ND ND 100.9 101.1 56.2 莠 灭净 9.7 ND 97.1 100.0 62.8 扑灭 津 60.4 27.7 95.0 95.3 82.0 扑 草 净 37.7 11.6 101.0 100.0 109.2 去 草 净 20.1 6.5 98.0 96.5 76.4 注：正己 烷-丙 酮（体 积比 为 1:1）；甲 醇-乙 腈（体 积比 为 3:7）.B.3 结 论 采 用 索氏 提 取 法可 以 将 土壤中 均 三氮 苯 类除 草 剂 污染 物 有 效 提 取；中 性 氧 化 铝 柱 分 离可 较 好 净 化 提 取 液；采 用 高 效 液 相 色谱 对 均 三氮 苯 类除 草 剂 的 定 性、定 量有 良好 的 抗 干 扰 能 力，而且 具 有 操 作 简便、分 离 完 全、峰 形好、线性 范 围 宽、精密 度 好、灵敏 度和 准 确 度 高等 特 点，是 分 析 土壤中 均 三氮 苯 类除 草 剂 的 一 种 较 为理 想 的 方法。DB22/T 1736 2012 12 C C 附 录 C（资料 性 附录）固 相 萃取-超 高效液相色谱-串联 质 谱 法 测 定土壤 中咪唑 乙烟酸 的残留 量 C.1 材料与 方法 C.1.1 仪器与药剂 咪唑 乙 烟 酸 标准 品（纯 度 99.0%）；甲 醇、甲酸 为 色谱 纯；水（超纯 水）；C18（AGT/Cleanert ODS-SPE）SPE 柱；正己 烷 和二 氯 甲 烷 为分 析 纯。超 高 效 液 相 色谱-串联 四 极 杆 液 质 联 用 仪；Acquity UPLC R BEHC18 色谱 柱 1.7 m，2.1 mm 50 mm（Waters）；KQ-500型 超声波 清 洗 器；TG16-WS 台 式 高 速 离 心 机；BF-2000 氮 气 吹 干 仪；Filter Unit 滤膜（0.22 m，MILLEX-GV）。C.1.2 液相色谱/质 谱检测 条件 C.1.2.1 液相色谱 条件 柱 温 45；流 动 相 为 VA（甲 醇）：VB（0.2%甲酸水 溶 液）；流 速 0.3 mL min-1；进 样 量 3 L。二 元 梯 度 洗脱 分 离：0-2.5 min，10%A；2.5-2.6 min，90%A；2.6-4.6 min，10%A。C.1.2.2 质 谱 条件 电 喷雾 离 子 源，正 离 子 电离（ESI+）；毛细 管 电 压 3.0 kV；离 子 源温 度 120；去溶 剂温 度 350；去溶 剂 气 流 量 N2=500 L h-1；锥 孔 反 吹 气 N2=50 L h-1；碰撞 气 为 氩 气。定 性 离 子 对 290245、定 量离 子 对 290176，采 用 MRM 多 反 应离 子 检测 模 式。C.1.3 标 样 溶 液的 配制 准 确 称 取 咪唑 乙 烟 酸（99.0%）标准 品 0.010 1 g，用甲 醇（色谱 纯）做 溶 剂 定 容 到 100 mL，配 置成 浓 度 为 100 mg L-1 的 储备 液，置 于 4 冰箱 保 存。准 确 移取 适 量标准 储备 液，配 置 浓 度 为 0.01、0.02、0.05、0.1、0.5、2 mg L-1 的 咪唑 乙 烟 酸 标准 溶 液 系 列。C.1.4 样品 前 处理 方法 提 取：准 确 称 取 土壤 样 品 10 g 于 50 mL 聚四 氟乙 烯 具 塞 离 心 管 中，加 入 25 mL 0.1 mol L-1 的氯 化 铵 与 氨水 缓 冲 液（pH=10），涡 旋 振荡 l min，超声波 提 取 20 min，置 于 台 式 高 速 离 心 机以 6 000 r min-1 的 速 度离 心 3 min，抽 取 10 mL 上 清 液 于 试 管 中，加 盐 酸酸化 到 pH=2，待 用。净 化：500 mg/6 mL C18（AGT/Cleanert ODS-SPE）SPE 柱 依 次 用 6 mL 正己 烷、二 氯 甲 烷、甲 醇、水、0.01mol L-1 盐 酸水溶 液 活 化，上 样 5 mL。然 后 用 6 mL 水、6 mL 正己 烷 洗涤，抽 干 30 s。最 后 用 13 mL 二 氯 甲 烷 洗脱至 具 塞 试 管 中，氮 吹 至 干，用甲 醇 定 容，过 0.22 m 有 机 系 滤膜 于 自 动 进 样 瓶 中，待 测。C.2 结果与 分 析 C.2.1 检测 条件 的 选 择 DB22/T 1736 2012 13 为 了 获 得 最 佳 的 灵敏 度和 分 离 效果，采 用 直 接 进 样 方 式，扫描 范 围 m/z 为 150-650；选择 的 离 子 源 为 电 喷雾 离 子 源，正 离 子 电离（ESI+）；流 动 相 为 二 元（甲 醇 和 0.2%甲酸水 溶 液）梯 度 洗脱。试 验 结果 表 明，在表 C.1 所 示 的 选择 监 控 离 子、锥 孔 电 压 及 碰撞 能 量 下，电 喷雾 离 子 化可使 咪唑 乙 烟 酸 具 有 较 好 的 电离 效果并获 得 特 征 离 子 峰。在 此 基 础 上，进 一 步 优 化 色谱 和 质 谱 参 数。通过 试 验 证 明，采 用甲 醇-甲酸水 体 系 为 流 动 相，在 梯 度 洗脱 条件 下，可 得到 较 高 的 灵敏 度、重 现 性及 峰 形（图 C.1）。表 C.1 咪唑 乙烟酸 的 选 择 监 控离子、锥孔电压及碰撞能 量 项目 母 离 子 m/z 子 离 子 m/z 锥 孔 电 压 V 碰撞 能 量 V 1 290 176 33 22 2 290 245 33 22 注：A为 咪唑 乙 烟 酸 标准 品 浓 度 0.05mg/L，保 留时间 2.27min；B为 土壤空 白；C为 添加 土壤 样 品 0.05mg/kg 图 C.1 咪唑 乙烟酸 总 离子 流 图 DB22/T 1736 2012 14 注：A为 咪唑 乙 烟 酸 标准 品 浓 度 0.05mg/L，保 留时间 2.27min；B为 土壤空 白；C为 添加 土壤 样 品 0.05mg/kg 图 C.1 咪唑 乙烟酸 总 离子 流 图（续）C.2.2 分 析 方法线性 关系 的测 定 采 用 外 标 法定 量，在 上 述 仪器 条件 下 进行 测定，以 MS/MS 定 量 离 子 色谱 峰 面 积（y）对 质量 浓 度（x）绘 制 标准 曲 线。结果 显 示，咪唑 乙 烟 酸 在 0.01-2 mg L-1 范 围 内 线性 关系 良好，线性 方 程 为 y=70 919x+3 437.4，相 关系 数 r 为 0.997 9。C.2.3 方法 的 回收率 和 检 出限 根据咪唑 乙 烟 酸 在 UPLC-MS/MS 的 响 应 情 况，在 0.01-0.5 mg kg-1 范 围 内 分 别 设 定了 3 种 添加浓 度，每 个 添加浓 度 设 5 个重 复。然 后 按 上 述 提 取、净 化 及 测定 步骤，进行 添加回 收 率 试 验。得到 土壤 样 品 中 咪唑 乙 烟 酸 的 添加回 收 率 和相对 标准 偏 差（RSD），见 表 C.2。由 表 C.2 可 知，咪唑 乙 烟 酸 在土壤中 的 平均 回 收 率 为 83.47%-101.70%，相对 标准 偏 差 为 4.15%-5.28%。基 质的 添加回 收和空 白的 色谱 图见图 1。以 最 低 添加浓 度 0.01 mg kg-1 的 添加回 收 率 的 色谱 图进行 衡 量，该 方法 的 灵敏 度 以 噪音信号 的 10 倍 确 定，得 出 最 低 检测 浓 度（LOQ）为 0.075 g kg-1。因 此该 方法 完 全 满足 农药 残留 分 析 中对 准 确 度、精密 度和 灵敏 度 的要求。表 C.2 咪唑 乙烟酸在 土壤 中的 回收率及 相 对 标准 偏差（n=5）回 收 率%添加浓 度 mg/kg 1 2 3 4 5 平均 回 收 率%相对 标准 偏差%0.01 108.34 107.14 95.63 102.14 103.25 101.70 5.28 0.05 81.63 81.63 82.35 86.07 82.83 83.47 4.54 0.5 86.71 86.71 82.45 83.67 81.28 83.87 4.15 C.3 结 论 建 立了土壤中 咪唑 乙 烟 酸 残留 量的 超 高液 相 色谱-串联 四 级 杆 质 谱 测定方法。该 方法 咪唑 乙 烟 酸 在0.01-2 mg L-1 浓 度 范 围 内 呈良好 的 线性 关系，在 土壤中 的 平均 回 收 率 为 83.47%-101.70%，相对 标准偏 差 为 4.15%-5.28%，最 低 检测 浓 度（LOQ）为 0.075 g kg-1。该 方法 操 作 简便，准 确 可 靠、可 满DB22/T 1736 2012 15 足 农药 残留 分 析 的要求，并 可用于 大量 样 品 的 快 速 检测。_