尖叶胡枝子总黄酮制备与检测DB15／T 1074-2016.pdf

ICS 65.020 B38 备案号：52136-2017 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB 15/T 1074 2017 尖叶胡枝 子总黄酮 制备与检 测 Preparation and Detection of Total Flavonoids from Lespedeza hedysaroides 2016-11-28 发布 2017-02-28 实施 内 蒙 古 自 治 区 质 量 技 术 监 督 局 发布 DB15/T 1074 2017 I 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本 标准 由中 国农 业科 学院 草原研 究所 提出。本标准 由内 蒙古 自治 区质 量技术 监督 局归 口。本标准 起草 单位：中 国农 业科学 院草 原研 究所。本标准 主要 起草 人：阿拉 木斯、吴洪 新、王育 青、乌兰巴 特尔、常 春、戴雅 婷、赵 金梅、张 晓庆、赵海霞、孙 娟娟、刘 洪林。DB15/T 1074 2017 1 尖叶胡枝 子总黄 酮制备与 检测 1 范围 本标准 主要 规定 了尖 叶胡 枝子总 黄酮 的命 名、制备、性状、鉴 别、检查 及含 量测定。本标准 适用 于尖 叶胡 枝子 总黄酮 的实 验室 提取 与应 用。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。中国 药典 2005 年 版一 部附录IXH“水 分测 定法”中国 药典 2005 年 版一 部附录IXJ“炽 灼残 渣检 查 法”中国 药典 2005 年版 一 部附录 IXE“重 金属 检查 法”中国 药典 2005 年 版一 部附录IXF“砷 盐检 查法”中国 药典 2005 年 版一 部附录VA“分光 光度 法”3 术语和 定义 下列术 语与 定义 适用 于本 文件 尖叶胡 枝子 总黄 酮 total flavonoids of Lespedeza hedysaroides 以植物 材料 名称 加所 得中 间 体的 来源 形式 命名。4 制法 4.1 提取 取干燥 尖叶 胡枝 子（地上 部分），粉 碎至 过 40 目 筛，用 70%乙 醇、加热 温度 为 70、固液 比为1：20 回流 提取 三次，总 提取时 间大 于 4 h。合并 提取液，加 热减 压浓 缩回 收乙醇 至无 醇。4.2 纯化 用与提 取液 等体 积的 石油 醚萃 取 3 次 除叶 绿素，加 热减压 浓缩 提取 液至 适于 上柱，将提 取液 加于 已经处理 好 的D101 大 孔吸 附 树脂柱 上，先 用 2 倍 柱体 积量的 水洗 脱除 杂，再 用80%乙 醇洗 脱至 大孔 吸附树脂柱 无黄 色，收集 乙醇 洗脱液，按 上述 条件 回收 乙醇，浓缩 至稠 膏，在室 温下真 空干 燥，粉碎 即 得。5 性状 DB15/T 1074 2017 2 本产品 为棕 黄色 至棕 褐色 粉末，微苦。6 鉴别 6.1 化学鉴 别 盐酸-镁粉 反应：取样 品与 荭草苷 对照 品各 少量，分 别用甲 醇溶 解，加 镁粉 25 mg，滴加 浓盐 酸 1-2 滴，观 察颜 色变 化,样品 与 对照品 均为 红色。6.2 薄层鉴 别 取样品 50 mg，加 甲醇 25 mL 使溶 解，超声 处理 10 min，滤 液作 为供 试品 溶 液。另 取尖 叶胡 枝子粉碎物5 g，按照4.1 方法 制备提 取液，作 为待 测溶 液；取 荭草 素、牡荆 苷各2 mg，加甲 醇溶解，制 成 每 1 mL含 0.2 mg 的对 照溶 液。吸取上 述4 种溶 液各3 L，分别点 于同 一正 相硅 胶板 上，以 氯仿-甲醇-水(8:1:1)混合 液作 为展 开 剂展开，展距 10 cm，取出，晾干。喷以5%硫酸 醇溶 液 显色，斑点清 晰。供 试品 色谱中，在与 对照 品相 应的位置 上呈 现与 对照 品相 同颜色 的斑 点，同时 供试 品色谱 在与 提取 液色 谱相 应的位 置上，显 相同 颜 色 的斑点，提示 尖叶 胡枝 子在 处理过 程中 其主 要黄 酮成 分均保 留。7 检查 7.1 水分检 查 水分检 查按 中国药 典2005 年版 一部 附录IXH“水 分测定 法”第 一法 之烘干 法检查。限定 其含 水量应低 于5.0%。7.2 炽灼残 渣检 查 炽灼残 渣检查 按中 国药 典2005 年版 一部 附录IXJ“炽灼 残渣检 查法”检查。限定 其炽灼 残渣应低于1.0%。7.3 重金属 检查 取炽灼 残渣，按 中国 药 典2005 年 版一 部附 录 IXE“重 金属 检查 法”第 二 法检查，重 金属 限量 应低于百 万分 之五。7.4 砷盐检 查 取炽灼 残渣，按中 国药 典2005 年版 一部 附录IXF“砷盐 检查法”第 一法之 古蔡法 检查，砷盐 限量应低 于百 万分 之一。8 含量测 定 DB15/T 1074 2017 3 8.1 芦丁标 准贮 备液 的制 备 精密称 取 120 干 燥至恒 重的芦 丁标准 样品20 mg，用70 乙醇 溶解后 移至 100 mL 棕色容 量瓶中，用 70 乙 醇定 容至 刻度，放入 冰箱 中备 用。8.2 供试品 溶液 的制 备 称取本 品约0.5 g，精确 至0.1 mg，置 于50 mL容 量瓶 中，加50%乙醇 溶解 并稀 释至刻 度，摇匀，备用。8.3 测定方 法 分别精 密吸取 芦丁标 准溶 液和供 试品溶 液，按照分 光光度 法(中国 药典2005 年 版一部 附录VA)，选择510 nm 为 测定 波长 测定。本品 按干 燥品 计尖 叶胡 枝子总 黄酮 应高 于 35%。