饲料级氯化胆碱含量的测定 凯氏定氮法DB22／T 1995-2014.pdf

ICS 65.120 B 46 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 1995 2014 饲料级氯化胆碱含量的测定 凯氏定氮法 Determination of the content of the feed grade choline chloride Kjeldahl method 2014 02 28发布 2014 04 30实施 吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 1995 2014 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和 GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：吉林产品质量监督检验院、吉林农业大学、吉林省农业机械研究院。本标准主要起草人：潘明杰、王宇、金哲勇、华蕾、张涛、李滢倩、张爽、任明月、柴竹林、刘静 秋、王岩、康 文欣、杨波、王 洪昌、陈嵩嵩。DB22/T 1995 2014 饲料级氯化胆碱含量的测定 凯氏定氮法 1 范围 本标准规定 了 凯氏定氮法测定饲料级氯化胆碱含量的测定方法。本标准 适用于以三甲胺盐酸盐水溶液与环氧乙烷反应生成 的氯化胆碱 水剂 和 以 氯化胆碱 水剂为原料 加入玉米芯粉、脱脂米糠、稻壳粉、麸皮、二氧 化 硅适于 饲料 用 的 赋形剂制成 的氯化胆碱 粉剂。分子式：C6H14NClO 结构式：相对分子 质量：139.63（按 2001年国际相对分子 质量）2 规 范性引用文件 本标准 中引用 的 文件对于 本标准的 应用是必不可少 的。凡是注日期 的 引用文件，仅所注日期 的 版 本 适用于 本 文件。凡是不注日期 的 引用文件，其最新版 本（包括所有 的 修改 单）适用于 本标准。GB/T 601 化学 试剂 标准 滴 定 溶液 的 制备 GB/T 6682 分析 实验 室用水 的规 格 和 试 验方法 3 原理 在催 化 加 热条 件 下 用 硫 酸 破坏 有 机 物，使 含氮 物转 化 成 硫 酸 铵。碱化 蒸馏使氨逸 出，用 硼 酸溶液 吸 收后，强 酸 标准 滴 定 溶液滴 定，测出 总 氮含量。减去氨态 氮含量，乘 以 换算系数，计算 出氯化胆碱含量。4 试剂 和 材 料 除另 有 规定 外，本方法 所用试剂 均 为分析 纯，水为 GB/T 6682规定的 三 级 水。4.1 硫 酸（H2SO4密度 为 1.84 g/L）。4.2 盐酸（HCl）。4.3 95%乙 醇（C2H5OH）。4.4 硫 酸 铜（CuSO4 5H2O）。4.5 硫 酸 钾（K2SO4）。4.6 氢 氧 化 钠（NaOH）。4.7 硼 酸（H3BO3）。4.8 甲 基红指示 剂（C15H15N3O2）。4.9 溴 甲 酚绿指示 剂（C21H14Br4O5S）。DB22/T 1995 2014 2 4.10 硫 酸 铵(NH4)2SO4：优 级 纯，用 前 在（105 2）干燥至恒重。4.11 盐酸溶液（1+1）：量 取 100 mL盐酸（4.2），缓缓 地 注入 100 mL水中，边 加 边搅拌。4.12 硼 酸溶液（20 g/L）：称取 20 g硼 酸（4.7），加水溶 解后 并 稀释至 1000 mL。4.13 氢 氧 化 钠 溶液（400 g/L）：称取 40 g氢 氧 化 钠（4.6）加水溶 解后，放冷，并 稀释至 100 mL。4.14 甲 基红 乙 醇 溶液（1 g/L）：称取 0.1 g甲 基红（4.8），溶于 95%乙 醇，用 95%乙 醇稀释至 100 mL。4.15 溴 甲 酚绿 乙 醇 溶液（1 g/L）：称取 0.1 g溴 甲 酚绿（4.9），溶于 95%乙 醇，用 95%乙 醇稀释至 100 mL。4.16 硼 酸溶液（全自动程序 用）：称取 10 g硼 酸（4.7），加水溶 解后 并 稀释至 1000 mL，加入 溴 甲酚绿 乙 醇 溶液（4.15）10 mL，甲 基红 乙 醇 溶液（4.14）7 mL，混匀后置 于 阴凉处，保存 期为 1个 月。4.17 硫 酸 c(1/2 H2SO4)=0.1000 mol/L或者 盐酸 标准 滴 定 溶液（0.1000 mol/L）：按照 GB/T 601制备。4.18 混合指示 剂：10 mL甲 基红 乙 醇 溶液（4.14）与 50 mL溴 甲 酚绿 乙 醇 溶液（4.15）临 用 时混合。4.19 混合催 化 剂：0.4 g硫 酸 铜（4.4），6 g硫 酸 钾（4.5），磨碎混匀。5 仪器设 备 5.1 全自动 凯氏定氮 仪。5.2 定氮 蒸馏装置：如图 1所 示。5.3 电 子分析 天平：感 量 为 0.1 mg。5.4 凯氏 消 化 炉。6 试 料 制备 氯化胆碱 粉剂 选 取 具 有 代表 性 的 样 品 200 g，粉 碎后全 部通过 40目筛，充 分 混匀后装 于 密 封容 器 中，防止 试 样 成分 的 变 化。氯化胆碱 水剂 混匀后 直接 测定。7 分析 步骤 DB22/T 1995 2014 7.1 凯氏定氮法 7.1.1 试 样 的 处 理 氯化胆碱 粉剂 称取在（105 2）下干燥 2 h的 试 料 约 1 g（精确 至 0.2 mg），置 于 250 mL具塞 三 角瓶 中，加水 70 mL，摇 匀，在 70 水 浴 加 热 15 min，塞紧瓶塞，在 电 动 振荡 器 上振荡 10 min，将 溶液 转 移 至 100 mL容 量 瓶 中，用水 稀释至 刻 度，摇 匀，用 干燥 的 滤纸 和 漏斗过滤，弃 去 初滤 液，准 确 吸 取 两份 25.0 mL滤 液于 凯氏 烧瓶 中。一份 加入 6.4 g混合催 化 剂（4.19），与试 样 混合均匀，再 加入 10 mL硫 酸（4.1）和 2粒玻璃珠，将 凯氏 烧瓶 置 于 电炉上 加 热，开始小火，待样 品 焦 化，泡沫消失 后，再 加强 火力（360 410）直 至 呈透 明的 蓝 绿 色，然 后 再继续 加 热，至 少 1 h。氯化胆碱 水剂 称取 两份约 0.25 g（精确 至 0.2mg）试 料，于 凯氏 烧瓶 中，一份 加入 6.4 g混合催 化 剂（4.19），与试 样 混合均匀，再 加入 10 mL硫 酸（4.1）和 2粒玻璃珠，将 凯氏 烧瓶 置 于 电炉上 加 热，开始小火，待样 品 焦 化，泡沫消失 后，再 加 强 火力（360 410）直 至 呈透 明的 蓝 绿 色，然 后 再继续 加 热，至 少 1 h。另 一份 用于 氨态 氮的测定，加入盐酸溶液（4.11）10 mL震荡 10 min。7.1.2 氨 的 蒸馏 将 试 料 消 化 液 冷 却，加入 60 100 mL蒸馏 水，摇 匀，冷 却。用于 氨态 氮测定的 可 直接 加入 60 100 mL蒸馏 水，摇 匀。将 蒸馏装置 的 末端浸 入 装 有 25 mL硼 酸溶液（4.12）和 2滴 混合指示 剂（4.18）的锥 形 瓶内。然 后 小心 地 向 凯氏 烧瓶 中加入 60 mL氢 氧 化 钠 溶液（4.13），轻轻摇 动 凯氏 烧瓶，使 溶液 混 匀后 再 加 热蒸馏，直 至 流 出 液 体积 为 100 mL。降 下 锥 形 瓶，使冷 凝管末端离开 液 面，继续 蒸馏 1 2 min，并 用 蒸馏 水 冲洗 冷 凝管末端，洗 液 均 需流 入 锥 形 瓶内，然 后 停止 蒸馏。7.1.3 滴 定 将 蒸馏后 的 吸收 液 立即 用 硫 酸 或者 盐酸 标准 滴 定 溶液（4.17）滴 定，溶液 由 蓝 绿 色变 成 灰 红 色 为 终 点，记录 消 耗 标准 滴 定 溶液 的 体积(V2)。同 时 做 试剂 空白，记录 消 耗 标准 滴 定 溶液 的 体积(V1)。根据公 式（1）计算总 氮（N）和 氨态 氮（N1）。7.2 自动 凯氏定氮 仪 法 7.2.1 试 样 的 消 煮 氯化胆碱 粉剂 称取在（105 2）下干燥 2 h的 试 料 约 1 g（精确 至 0.2 mg），置 于 250 mL具塞 三 角瓶 中，加水 70 mL，摇 匀，在 70 水 浴 加 热 15 min，塞紧瓶塞，在 电 动 振荡 器 上振荡 10 min，将 溶液 转 移 至 100 mL容 量 瓶 中，用水 稀释至 刻 度，摇 匀，用 干燥 的 滤纸 和 漏斗过滤，弃 去 初滤 液，准 确 吸 取 两份 25.0 mL滤 液于 消 化 管 中。一份 加入 6.4 g混合催 化 剂（4.19），与试 样 混合均匀，再 加入 10 mL硫 酸（4.1），置 于 420 的 消 化 炉上消 化 1 h。另 一份 用于 氨态 氮的测定，加入盐酸溶液（4.11）10 mL震荡 10 min。氯化胆碱 水剂 称取 两份约 0.25 g（精确 至 0.2 mg），于 消 化 管 中，一份 加入 6.4 g混合催 化 剂（4.19），与试 样 混合均匀，再 加入 10 mL硫 酸（4.1），置 于 420 的 消 化 炉上消 化 1 h。另 一份 用于 氨态 氮的测定，加入盐酸溶液（4.11）10 mL震荡 10 min。7.2.2 氨 的 蒸馏 采 用 全自动 定氮 仪，按 仪器 本 身 程序 进行 测定。仪器 参考 条 件为 硼 酸 吸收 液（4.16）30 mL，蒸馏水 80 mL，氢 氧 化 钠 溶液（4.13）60 mL，蒸馏时 间 5 min。按照 仪器自动计算总 氮（N）和 氨态 氮（N1）。DB22/T 1995 2014 4 7.3 蒸馏 步骤 的验 证 检验 精确 称取 0.2 g硫 酸 铵（4.10），代 替 试 样，按 7.1.2或 7.2.2步骤 进行操作，测 得 硫 酸 铵 含氮量 为(21.19 0.2)%，否 则 应 检 查 加 碱、蒸馏 和 滴 定 每 个 步骤 是 否正 确。8 结 果 计算 以 质量 百 分 数（%）表 示 的氮含量 X按 式（1）计算：21()0.0140100 VVCNm-=（1）式中：N 试 料 中 的氮含量，单位 为 克每百克（%）。V2 滴 定 试 样 时 所 需 标准 酸溶液 体积，单位 为 毫升（mL）；V1 滴 定 空白 时 所 需 标准 酸溶液 体积，单位 为 毫升（mL）；C 硫 酸 或者 盐酸 标准 滴 定 溶液 的 浓 度，单位 为 摩尔每升（mol/L）；m 试 样 质量，单位 为 克（g）；0.0140 1.0毫升 硫 酸 c(1/2H2SO4)=1.000 mol/L或者 盐酸 c(HCl)=1.000 mol/L标准 滴 定 溶液 相 当 的氮的质量，单位 为 克（g）；以 质量 百 分 数（%）表 示 的氯化胆碱含量 Y按 式（2）计算：19.97 YNN=（-）（2）式中：Y 试 料 中 氯化胆碱的含量，单位 为 克每百克（%）。N 试 料 中 总 氮的含量，%；N1 试 料 中 氨态 氮的含量，%9.97 氮 换算 成 氯化胆碱的 系数。取重 复 性 条 件 下 两 次 结 果 的 算 术 平 均 值作 为 测定 结 果，结 果 保 留 三 位 有 效 数 字。9 精 密度 在重 复 性 条 件 下 获得 的 两 次独立 测定 结 果 的 绝 对 值 不 得超 过 算 术 平 均 值 的 2。