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ICS 65.020.01 B 05 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 23002015 苹果梨授粉用花粉 Ping guoli pollen for the pollinating 2015-04-07发布 2015-05-01实施吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 23002015 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由延边朝鲜族自治州质量技术监督局提出。本标准由吉林省农业委员会归口。本标准起草单位：延边朝鲜族自治州农业科学院（延边特产研究所）、延边朝鲜族自治州产品质量检验所。本标准主要起草人：朴宇、刘冰雁、杨林先、李雄、朴永振、周兰、白龙律。DB22/T 23002015 1 苹果梨授粉用花粉 1 范围 本标准规定了苹果梨授粉树品种、花的采集、花药脱出与精选、花粉制取、花粉包装、贮存和运输、质量检测、等级划分及使用量。本标准适用于苹果梨授粉用花粉的制备和应用。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。2.1 苹果梨 pingguoli 原产于吉林省龙井市的蔷薇科（Rosaceae）梨属(Pyrus)植物。注：乔木，花序有花812朵；花白色，雄蕊2030枚，花药粉红色；果实扁圆形，果皮黄绿色，部分着红色，皮孔和果皮黄色，子房5个心室。2.2 初花期 initial bloom stage 梨树5%花朵开放日期。2.3 盛花期 full-bloom stage 梨树50%花朵开放日期。2.4 花药 anther 着生于雄蕊上部，长在花丝顶端的囊状体。2.5 花粉 pollen 花药里的粉状颗粒。2.5.1 粗花粉 crude pollen 花药开裂散的出花粉与花药壳等的混合物。2.5.2 精花粉 pure pollen 将粗花粉用0.317 mm孔径的筛网过筛出去花药壳等杂质后，获得的含量95%以上的纯净花粉。2.6 粗花粉精粉率 pure pollen ratio in crude pollen 粗花粉中精花粉占其重量的百分数。2.7 精粉纯度 pure pollen purity DB22/T 23002015 2 在精花粉中梨花粉占的比值，以百分率表示。2.8 花粉发芽率 pollen germination rate 花粉在适宜的条件下培养一定时间，长出花粉管（亦称花粉发芽）的花粉粒数占培养花粉粒数的比值，以百分率表示。3 授粉树品种 3.1 完全亲和的授粉品种 与苹果梨的S基因不重复的品种，如鸭梨、雪花梨、朝鲜洋梨等。3.2 半亲和的授粉品种 两个S基因中一个S基因不重复品种，如早酥梨、谢花甜、苹博香、延香梨和蔗梨等。4 花的采集 4.1 采集时期 初花期开始采集花朵，直至盛花期。4.2 采集方法 4.2.1 花朵采集时，间隔 20 cm 左右留一花序，收集采下的花朵，存放在阴凉处不得过厚堆压。4.2.2 收集的花应及时脱离花药，如不能及时脱离，临时存放在阴凉处，并每隔 1 h 翻动一次。5 花药脱出与精选 5.1 脱出花药 将收集到的花用打花机打碎后，用3.2 mm孔径粗筛分离出花瓣，收集脱出花药、花柄、花托和花丝。5.2 筛粉精选 5.2.1 将脱出的花托、花柄、花药、花丝放入孔距 2.2 mm，直径 80 cm 的圆筒筛中分离出花柄、花托。5.2.2 筛出的花药和花丝经过 1.2 mm 孔径的细筛，筛出花丝，剩余花药。6 花粉制取 6.1 粗花粉制取 干燥室内搭架,架上放吸潮垫隔纸等，摊放花药，厚度不超过0.3 cm,干燥室内温度24 26，排风扇不断排风，经26 h30 h干燥，花药完全爆开散粉。6.2 精花粉制取 将粗花粉过0.317 mm孔径的细筛获得。DB22/T 23002015 3 7 花粉贮存、包装、运输 粗花粉、精花粉包装、贮存和运输应符合表1要求。表1 粗花粉、精花粉包装、贮存和运输 贮存 短期贮存 d 长期贮存 d 种类 包装 包装规格 g 3 4 30 30 运输 粗花粉 用纸袋按规格包装，放入塑料自封袋，装入纸箱 50、100、250和500共四种。0 10 20 21 30 冷冻车运输或常温运输，常温运输时5 d 内送达精花粉 用纸袋按规格包装后，5 袋10 袋放入塑料自封袋，每1000 g放入不少于100 g变色硅胶（干燥剂），封口。10、20、50和100四种。50 kg 粗花粉 随机抽样5 件，每件50 g 随机抽样5件，每件50 g,每增加25，增抽样1件。精花粉 随机抽样5 件，每件50 g 随机抽样5件，每件50 g,每增加25，增抽样1件。8.2 形态检验 以授粉品种精花粉、粗花粉（粗花粉中取精花粉）为标样（如鸭梨），在100倍10倍显微镜下观察，如检验样品花粉的形态、大小、色泽与标样一致，可判定为梨花粉。8.3 精花粉纯度检测 100倍的显微镜下观察三个视野花粉，检测平均梨花粉纯度，计算精粉纯度，计算方法见公式（1）1003 2 13 2 1+=D D DC C CB.(1)式中：B精粉纯度(%)；DB22/T 23002015 4 1C 第一个视野中的梨花粉个数(个)；2C 第二个视野中的梨花粉个数(个)；3C 第三个视野中的梨花粉个数(个)；1D 第一个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)；2D 第二个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)；3D 第三个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)。8.4 花粉发芽率和精分率 发芽率和精分率检测参见附录A。9 等级划分及用量 9.1 粗花粉等级 按照发芽率高低和精粉率划分粗花粉等级及用量。表3 粗花粉等级及用量 等级 发芽率%精粉率%用量（生产10000Kg苹果梨花粉用量）g一级 60 500 二级 59.945 650g 三级 44.930 18 850g 不合格 30 注：发芽率低于30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。9.2 精花粉等级及用量 按照发芽率高低和精花粉纯度划分精花粉等级。表4 精花粉等级及用量 等级 发芽率%纯度%用量（生产10000 Kg苹果梨花粉用量）g 一级 60 100 二级 59.945 130 三级 44.930 95 170 不合格 30 注：发芽率低于30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。DB22/T 23002015 5 A A 附 录 A（规范性附录）花粉发芽率检测 A.1 培养基 A.1.1 配方 0.6 琼脂+10 蔗糖+300 L硼酸+20 L 吲哚乙酸。A.1.2 配制方法（100 mL培养基）将0.6 g琼脂倒入烧杯中，加一定量的蒸馏水溶解，边加热边搅动至琼脂完全溶解后倒入10 g蔗糖和30 硼酸，继续搅拌使其完全溶解后加入相应浓度的吲哚乙酸，最后加蒸馏水至100 ml刻度。A.2 发芽床的制备 取洁净的载玻片，用玻璃棒滴 2 滴 70 左右的培养基于载玻片上，待冷却后播种。A.3 花粉播种 用毛刷或发丝蘸取少量花粉，均匀地播于发芽床上。A.4 花粉培养 染色缸的底部铺上一层滤纸后加入少量的蒸馏水，将播好花粉的载玻片放入染色缸中，盖上盖，放入25 左右的恒温箱中培养2 h3 h。A.5 镜检 取出载玻片放在100倍的显微镜下观察花粉的萌发情况，在每个载玻片上选3个视野，每个视野花粉粒不能少于50个，分别记录每个视野内的花粉发芽数和花粉粒总数。A.6 发芽率计算 发芽率以百分率表示，精确到1位小数：100=FEG.(A.1)式中：G 花粉发芽率（%）；E发芽的花粉粒数(个)；F 发芽的花粉粒数与没发芽的花粉粒数之和(个)。DB22/T 23002015 6 A.7 粗花粉精粉率计算 从每个样品中随机称取 25 g样本，混合后放入0.317 孔径的筛中过筛，筛净后称取杂质重量，样本重量与杂质重量之差为精花粉重量，精花粉重量占样本重量的百分数即为精粉率。10021=MMM.(A.2)式中：M 精粉率（%）1M 精花粉重量（g）；2M 样本重量(精花粉重量杂质重量)（g）。注：精粉率以百分率表示，精确到1位小数。A.8 花粉外观 外观颜色应为淡黄色。DB22/T 23002015 7 B B 附 录 B（规范性附录）授粉时期与方法 B.1 时期及要求 B.1.1 从开花当天开始1 d4 d内，选择少风、晴天、气温较高的天气条件下授粉，授粉时间为 9：0015：00。B.1.2 授粉要做到均匀、细致、全面，2次以上重复授粉。B.2 方法 B.2.1 粗花粉授粉 用鸡毛授粉器等，每蘸一次可点20 个30 个花序。B.2.2 精花粉授粉 精花粉授粉时与添加剂混合使用。不同等级的精花粉所需添加剂的比例不同，花粉添加剂为淀粉或松花粉等。一级花粉添加剂用量为花粉的3倍，二级花粉添加剂用量为2倍，三级花粉可直接使用。用塑料绳丝授粉器等授粉，每蘸一次可授粉30 个60 个花序。_
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