肥料中复硝酚钠的测定　高效液相色谱法DB37／T 3758-2019.pdf

ICS 65.080 G 20 DB37 山东省 地 方 标 准 DB 37/T 3758 2019 肥料中复 硝酚钠的 测定 高 效液相色 谱法 Determination of sodium nitrophenolate in fertilizers by high performance liquid chromatography 2019-12-05 发布 2020-01-05 实施 山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB37/T 3758 2019 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范 性引 用文 件.1 3 原理.1 4 试剂 和材 料.1 5 仪器 与设 备.1 6 分析 步骤.2 6.1 样 品制 备.2 6.2 提取.2 6.3 测定.2 6.4 空 白实 验.2 6.5 分 析结 果表 述.3 6.6 允 许差.3 附 录 A（资 料性 附录）复 硝酚 钠等 的英 文名 称、分子 式、分子 量、CAS 号、结 构式.4 附 录 B（资 料性 附录）复 硝酚 钠的 标准 物质 液 相色谱 图.5 DB37/T 3758 2019 II 前 言 本标准 按照GB/T 1.1 2009 给出 的规 则起 草。本标准 由山 东省 市场 监督 管理局 提出 并 至 组织 实施。本标准 由山 东化 工标 准化 技术委 员会 归口。本标准 起草 单位：山 东省 产品质 量检 验研 究院、山 东省科 学院 生态 研究 所、德州市 农科 院、山 东 农大肥业 科技 有限 公司。本标准 主要 起草 人：刘晖、齐云、马 强、张娟、杨 中锋、朱海 荣、田静、刘 倩倩、于燕 萍、徐 楠、尹畅、刘金 凤、王景 超、邹惠玲、苏 本玉、丁 方军。DB37/T 3758 2019 1 肥 料中复 硝酚钠的 测定 高效液相 色谱法 警 告：本标 准有 可 能涉 及 到 有 害 物质、危 险 操作 和设 备 的 安全。本 标 准并 未指 出 所 有可 能的 安 全问题。使用者有责任 采取 适当的安全和健康措 施，并保证符合国家有关 法规 规定的要求。1 范围 本标准 规定 了肥 料中 复硝 酚钠的 高效 液相 色谱 法。本标准 适用 于水 溶肥 料、复混肥 料、掺混 肥料、配 方肥料 中复 硝酚 钠的 检测。称样量 为1.0 g 时，方法 中 复硝酚 钠检 出限 为3 mg/kg。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。GB/T 6682 分 析实 验室 用 水规格 和实 验方 法 3 原理 试样中 复硝酚 钠用 甲醇进 行超声 提取，以甲 醇-甲 酸 溶液为 流动相，在 选定的 工作条 件下，用高 效液相色 谱仪（配 有二 极管 阵列检 测器）进 行测 定，外标法 定量。4 试剂和 材料 本标准 中试 验用 水应 符合GB/T 6682 中 一级 用水 的规 格。4.1 甲醇：色谱 纯。4.2 甲酸：分析 纯。4.3 甲酸-水溶 液(1+1 000)：移取1.0 mL 甲 酸（4.2）与 1 000 mL 水 混匀。4.4 2-硝基 苯酚 钠标 准品：已 知质量 分数，98.0%。4.5 4-硝基 苯酚 钠标 准品：已 知质量 分数，98.0%。4.6 5-硝基 邻甲 氧基 苯酚 钠标 准品：已知 质量 分数，98.0%，2-硝 基苯 酚钠、4-硝 基苯 酚钠、5-硝基邻 甲氧 基苯 酚钠 信息 一览表 见附 录A 中表 A.1。4.7 复硝酚 钠标 准溶 液：称 取2-硝基 苯酚 钠、4-硝基 苯 酚钠、5-硝基 邻甲 氧基 苯 酚钠标 准品，用甲 醇(4.1)配制 成各 个标 准物 质 浓度 为 1 000 mg/L 的混 合 标准溶 液，现用 现配。5 仪器与 设备 5.1 高效液 相色 谱仪：配 有二 极管阵 列检 测器 和色 谱数 据处理 机。5.2 微量注 射器：50 L。DB37/T 3758 2019 2 5.3 漩涡混 合器。5.4 高速离 心机：最 高转 速不 低于 6 000 r/min。5.5 超声波 清洗 器。5.6 分析天 平：精 度0.1 mg。5.7 金 属试 验筛：0.5 mm。5.8 有机相 微孔 滤膜：0.22 m。6 分析步 骤 6.1 样品制 备 固体样 品：将样 品粉 碎，全部过0.5 mm试 验筛，待 用。液体样 品混 匀后 直接 称取。6.2 提取 称取0.1 g1.0 g 试样（精确至0.000 1 g）置于10 mL 离心 管中，加入8 mL甲 醇（4.1），涡旋 振荡1 min，超 声提取30 min 后，以6 000 r/min 高速 离 心10 min，冷 却至 室温，定容至10 mL，取1 mL上清液过0.22 m 有机 相滤 膜，待 测。6.3 测定 6.3.1 液相色 谱操 作条 件 推荐的 液相 色谱 条件 如下:a)色谱柱：250 mm 4.6 mm(i.d.)不锈 钢柱，内装 Atlantis T3、5.0 m 填 充物（或具 有同 等效果的 色谱 柱）；b)流动相：甲 醇（4.1）:甲酸溶 液（4.3）=55:45，经滤 膜过 滤，并进 行脱 气；c)流速：0.8 mL/min；d)柱温：30；e)检测波 长：254 nm；f)进样体 积：10 L。上述操 作参 数是 典型 的，可根据 不同 仪器 特点 对给 定的操 作参 数做 适当 调整，以期 获得 最佳 效 果。典型的 复硝 酚钠 标准 溶液 液相色 谱图 见附 录B 中图B.1。6.3.2 标准曲 线的 绘制 分别移 取复硝 酚钠标 准溶 液（4.7）0.01 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL、0.80 mL 和1.00 mL 至10 mL 容量 瓶中，甲醇（4.1）定容，配制 浓度 为1 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L、80 mg/L 和100 mg/L的复硝 酚钠标 准工 作溶液。按色 谱条件（6.3.1）进 行测定，以色 谱峰 峰面积 为纵坐 标，对 应的 溶液 浓度为横 坐标 作图，绘 制工 作曲线。6.3.3 试样测 定 取适量 待测 溶液（6.2），按照色 谱条 件（6.3.1）进 行测定，外 标法 定量。待 测物含 量高 的试 样可取适量 试样 溶液 用甲 醇稀 释后进 行测 定。同时 进行 平行试 验。6.4 空白实 验 DB37/T 3758 2019 3 除不称 取试 样外，均 按上 述步骤 进行。6.5 分析结 果表 述 试样中5-硝 基邻甲氧基苯酚钠、4-硝 基苯酚钠或2-硝基苯酚钠 的含量Xi 以质量分数（%）表示，结果按式（1）计 算：1001000i 0i mD V c cXi.(1)式中：ci 由 标准 曲线 查得 试 样溶液 中5-硝基 邻甲 氧基 苯酚钠、4-硝 基苯 酚钠 或2-硝基 苯酚 钠的 浓度，单位为 毫克 每升（mg/L）；c0 由 标准 曲线 查得 空 白溶液 中5-硝基 邻甲 氧基 苯酚钠、4-硝 基苯 酚钠 或2-硝基 苯酚 钠的 浓度，单位为 毫克 每升（mg/L）；V 样品 的定 容体 积，单位为 升（L）；Di 样品 稀释 倍数；m 样品 质量，单 位为 克（g）。计算结 果保 留两 位有 效数 字，取 平行 测定 结果 的算 术平均 值作 为测 定结 果。注1：复硝酚钠含量以 5-硝基邻甲氧 基苯酚钠、4-硝基苯酚钠和2-硝基苯酚钠的含量总和计。6.6 允许差 在重复 性条 件下 获得 的两 次平行 测定 结果 的绝 对差 值不应 超过 算术 平均 值的10%。DB37/T 3758 2019 4 A A 附 录 A（资料 性附 录）复硝酚 钠等 的英 文名 称、分子式、分 子量、CAS 号、结构 式 复硝酚 钠等 的基 本信 息见 表A.1。表A.1 复硝酚 钠等 的英 文名 称、分子式、分 子量、CAS 号、结构 式 序号 中文名称 英文名称 分子式 分子量 CAS 号 结构式 1 复硝酚钠 Sodium nitrophenolate/2 2-硝基苯酚钠 2-Nitrophenol Sodium Salt C6H4 NNaO3 161.09 824-39-5 3 4-硝基苯酚钠 4-Nitrophenol Sodium Salt C6H4 NNaO3 161.09 824-78-2 4 5-硝基邻甲氧基苯酚钠 5-Nitroguaiacol Sodium Salt C7H6NNaO4 191.12 77-06-5 DB37/T 3758 2019 5 B B 附 录 B（资料 性附 录）复硝酚 钠的 标准 物质 液相 色谱图 复硝酚 钠的 标准 物质 液相 色谱图 见图B.1。图B.1 复硝酚 钠的 标准 物质 液相 色谱图 _