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D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 4I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 3 0/3 9DB50重 庆 市 地 方 标 准D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 4草 莓 脱 毒 种 苗 快 速 繁 育 技 术 规 程2 0 2 4-0 3-1 5 发 布 2 0 2 4-0 6-1 5 实 施重 庆 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 4I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定起 草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 重 庆 市 农 业 农 村 委 员 会 提 出、归 口 并 组 织 实 施。本 文 件 起 草 单 位：重 庆 市 农 业 技 术 推 广 总 站。本 文 件 主 要 起 草 人：胡 黎 华、黄 振 霖、杨 灿 芳、赵 雨 佳、欧 建 龙、曾 卓 华、熊 伟、寇 琳 羚。D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 41草 莓 脱 毒 种 苗 快 速 繁 育 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 草 莓 脱 毒 试 管 苗 培 育、脱 毒 原 原 种 苗 生 产、脱 毒 原 种 苗 繁 殖、脱 毒 种 苗 繁 殖、病 毒 检测 等 要 求。本 文 件 适 用 于 草 莓 脱 毒 种 苗 快 速 繁 育。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用 文 件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本文 件。G B/T 8 3 2 1 农 药 合 理 使 用 准 则G B/T 2 9 3 7 5 马 铃 薯 脱 毒 试 管 苗 繁 育 技 术 规 程N Y/T 4 0 6 脱 毒 草 莓 种 苗 病 毒 检 测 技 术 规 程N Y/T 3 0 3 2 草 莓 脱 毒 种 苗 生 产 技 术 规 程3 术 语 和 定 义本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义。4 脱 毒 试 管 苗 培 育4.1 消 毒 处 理按 G B/T 2 9 3 7 5 的 规 定 执 行。4.2 培 养 基 制 备4.2.1 培 养 基 配 方：茎 尖 分 化 培 养 基 M S+6-B A 0.5 m g/L+N A A 0.1 m g/L+蔗 糖 3%+琼 脂 0.7%；增 殖培 养 基 M S+6-B A 0.3 m g/L+N A A 0.1 m g/L+蔗 糖 3%+0.7%琼 脂；生 根 培 养 基 1/2 M S+I B 0.0 5 m g/L+蔗糖 1.5%+琼 脂 0.7%。4.2.2 将 配 置 好 的 培 养 基 溶 液 分 装 入 培 养 容 器 中，培 养 基 深 度 约 2 c m，密 封 瓶 口，在 0.1 2 m p a/c m 压力 下 灭 菌 1 5 m i n，冷 却 备 用。4.3 接 种 材 料4.3.1 母 株 选 择田 间 选 择 生 长 健 壮、无 病 虫 害、能 充 分 表 现 本 品 种 优 良 性 状 的 植 株 为 母 株。4.3.2 接 种 材 料D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 42选 择 充 实 饱 满、无 机 械 损 伤 的 新 生 匍 匐 茎，截 取 2 c m 3 c m 顶 端 部 位 为 接 种 材 料。4.3.3 清 洗将 接 种 材 料 放 入 纱 布 袋，流 水 冲 洗 去 除 表 面 沙 尘 和 杂 质，灭 菌 滤 纸 吸 干 水 分 备 用。4.4 茎 尖 剥 离 及 接 种4.4.1 在 超 净 工 作 台 上，将 接 种 材 料 置 于 灭 菌 容 器 中，加 入 7 5%酒 精 浸 泡 3 0 s。倒 出 酒 精，无 菌 水冲 洗 3 次。加 0.1%升 汞 溶 液 浸 泡 7 m i n 8 m i n，期 间 适 当 晃 动 容 器，倒 出 升 汞 溶 液，无 菌 水 冲 洗 5次，用 灭 菌 滤 纸 吸 干 水 分 后 备 用。4.4.2 在 体 视 解 剖 镜 下 用 解 剖 针 逐 层 剥 去 茎 尖 组 织 顶 端 的 叶 原 基，直 至 露 出 顶 端 生 长 点，期 间 每 剥 离 1层 应 将 解 剖 针 浸 入 7 5%的 酒 精 中 消 毒 1 s。切 取 0.2 m m 0.3 m m 大 小 的 生 长 点 组 织，按 1 3 个/瓶 接 种 于 分 化 培 养 基 上，密 封 瓶 口，注 明 品 种、编 号 和 接 种 日 期。4.5 培 养4.5.1 培 养 条 件温 度 2 3 2，相 对 湿 度 7 0%，光 照 强 度 2 4 0 0 L x，每 天 光 照 时 间 1 4 h 1 6 h，生 根 阶 段 可 适当 增 加 光 照 强 度 至 5 0 0 0 L x。4.5.2 茎 尖 分 化 成 苗将 接 种 茎 尖 的 培 养 瓶 置 于 无 菌 室 内 培 养，直 至 茎 尖 分 化 成 带 叶 原 基 的 小 芽 丛，将 小 芽 丛 编 号 后 转 移至 增 殖 培 养 基，每 瓶 接 种 1 个，成 苗 后 剪 取 叶 片 检 测 病 毒，保 留 无 病 毒 苗 丛。4.5.3 脱 毒 苗 扩 繁将 无 病 毒 苗 丛 切 分 成 2 4 块 小 苗 丛，接 种 于 增 殖 培 养 基 继 代 培 养，每 2 0 d 3 0 d 增 殖 1 代。4.5.4 生 根 培 养从 继 代 苗 丛 剪 取 2 c m 以 上 的 小 苗 接 种 于 生 根 培 养 基，间 距 1 c m 2 c m，培 养 2 0 d 3 0 d，获 得脱 毒 试 管 苗。5 脱 毒 原 原 种 苗 生 产5.1 生 产 条 件在 无 病 虫 的 网 室 或 温 室 中 生 产，纱 网 规 格 1 0 0 目。工 作 人 员 进 入 前 应 对 手 部、鞋 底 消 毒，穿 戴 专用 工 作 服。室 内 工 具 专 用。5.2 基 质 配 置将 草 炭、蛭 石、细 土、有 机 肥 按 体 积 5:2:2:1 比 例 混 合，按 1/m 加 入 氮 磷 钾（N-P 2 O 5-K 2 O，1 5-1 5-1 5）复 合 肥，混 匀、过 筛，高 温 日 晒 或 按 4 g/拌 入 5 0%多 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 消 毒 后 备 用。5.3 炼 苗 移 栽生 根 试 管 苗 在 室 温 弱 光 环 境 下 炼 苗 1 d，揭 去 瓶 盖 后 再 炼 苗 1 d。取 苗 洗 去 培 养 基，移 栽 入 温、网室 内 的 基 质 苗 床（穴 盘），浇 透 水 后 喷 施 1 次 多 粘 类 芽 孢 杆 菌 生 物 菌 肥，间 隔 7 d 再 喷 施 1 2 次。D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 435.4 管 理苗 床（穴 盘）上 方 搭 建 小 拱 棚,覆 盖 塑 料 薄 膜、遮 阳 网，7 d 后 逐 渐 通 风 和 增 加 光 照。棚 内 温 度1 5 2 5，相 对 湿 度 8 5%9 0%。1 4 d 后 撤 除 薄 膜，移 栽 6 0 d 后 生 长 成 可 定 植 的 脱 毒 原 原 种 苗。5.5 品 种 真 实 性 观 察将 脱 毒 原 原 种 苗 定 植 后 观 察 植 物 学 性 状 和 生 物 学 性 状，淘 汰 变 异 植 株。6 脱 毒 原 种 苗 繁 殖将 脱 毒 原 原 种 苗 带 土 定 植 于 基 质 苗 床，株 行 距 1 m 1 m。将 匍 匐 茎 节 压 入 基 质，子 苗 长 至 4 片 叶以 上，得 到 脱 毒 原 种 苗，可 作 为 扩 繁 脱 毒 种 苗 的 母 株。7 脱 毒 种 苗 繁 殖7.1 育 苗 地 选 择海 拔 1 0 0 0 m 1 2 0 0 m，地 势 平 坦、排 灌 方 便、光 照 充 足，无 土 壤 线 虫 及 草 莓 病 源，土 质 疏 松 肥 沃、微 酸 性 或 中 性、3 年 内 未 种 植 过 草 莓 和 茄 科 作 物 的 沙 壤 土 地 块,建 立 脱 毒 种 苗 繁 育 苗 圃。7.2 整 地 施 肥每 6 6 7 施 入 腐 熟 的 有 机 肥 1 0 0 0，深 翻、平 整 土 地，耕 匀 耙 细 开 厢，厢 宽 1 m 1.2 m。7.3 定 植在 春 季 气 温 达 到 1 0 以 上 时，将 脱 毒 原 种 苗 按 株 距 5 0 c m 6 0 c m 单 行 定 植 于 厢 面 中 部，栽 植深 度“上 不 埋 心，下 不 露 根”。栽 后 浇 透 定 根 水，保 持 土 壤 湿 润。7.4 田 间 管 理7.4.1 水 肥 管 理7.4.1.1 宜 配 套 安 装 喷 灌 设 施，夏 季 浇 水 选 择 早 晚 地 温 较 低 时 进 行，雨 季 应 开 沟 排 水。7.4.1.2 匍 匐 茎 发 生 期，结 合 浇 水 每 次 用 3 k g/亩 氮 磷 钾 复 合 肥（N-P 2 O 5-K 2 O，2 0-2 0-2 0）追 肥 1 2次，生 长 后 期，宜 叶 面 喷 施 0.1%0.3%磷 酸 二 氢 钾 水 溶 肥。7.4.2 花、叶 管 理及 时 摘 除 母 株 上 的 花 蕾 花 序、干 枯 老 叶、病 叶。7.4.3 匍 匐 茎 整 理匍 匐 茎 发 生 期 及 时 将 交 叉 重 叠 的 匍 匐 茎 拉 开，将 匍 匐 茎 上 发 生 的 不 定 根 茎 节 段 压 入 土 中。7.5 病 虫 害 防 治7.5.1 防 治 原 则坚 持“预 防 为 主，综 合 防 治”的 植 保 方 针，以 农 业 防 治 和 物 理 防 治 为 基 础，优 先 采 用 生 物 防 治 技 术，辅 以 化 学 防 治 应 急 控 害 措 施。D B 5 0/T 1 5 7 3 2 0 2 447.5.2 主 要 防 治 对 象主 要 虫 害 有 蚜 虫、螨 类、斜 纹 夜 蛾、蛴 螬 等，主 要 病 害 有 蛇 眼 病、炭 疽 病、白 粉 病、红 心 根 腐 病 等。7.5.3 用 药 安 全农 药 使 用 应 符 合 G B/T 8 3 2 1 的 规 定。7.6 出 圃 标 准具 有 4 片 以 上 展 开 叶，叶 色 鲜 绿，叶 柄 粗 壮，中 心 芽 饱 满，根 茎 粗 1 c m 以 上，根 系 发 达，初 生根 长 度 6 c m 以 上，无 病 虫 害、无 机 械 损 伤。8 病 毒 检 测病 毒 检 测 按 N Y/T 4 0 6 的 规 定 执 行。脱 毒 瓶 苗 和 脱 毒 原 原 种 苗 脱 毒 率 1 0 0%，脱 毒 原 种 苗 脱 毒 率 9 5%，脱 毒 种 苗 脱 毒 率 9 0%。
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