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I C S 65.020.4 0B 47DB14山 西 省 地 方 标 准D B 1 4/T 7 6 9 2 0 1 3桑 蚕 一 代 杂 交 种 催 青 技 术 规 程2 0 1 3-1 1-2 0 发 布 2 0 1 3-1 2-2 0 实 施山 西 省 质 量 技 术 监 督 局发 布DB 14/T 769 2013I目 次前 言.II1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 术 语 和 定 义.14 催 青 设 施 和 用 具.15 催 青.26 运 输.4附 录 A（规 范 性 附 录）桑 蚕 催 青 胚 胎 解 剖.5DB 14/T 769 2013I I前 言本 标 准 按 照 G B/T 1.1-2009 规 则 编 写。本 标 准 由 山 西 省 农 业 厅 提 出 并 归 口。本 标 准 起 草 单 位：山 西 省 纤 维 检 验 局、山 西 省 蚕 学 会、山 西 省 蚕 业 科 学 研 究 院。本 标 准 主 要 起 草 人：畅 晋 钢、王 晓 丽、李 洪 烈、马 腊 梅、亢 秀 杰、韩 红 发、王 玉 珏、王 江 琴闫 巧 凤、赵 益 荣。DB 14/T 769 20131桑 蚕 一 代 杂 交 种 催 青 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 桑 蚕 一 代 杂 交 种 催 青 的 设 施 和 用 具、催 青、包 装、运 输 要 求。本 标 准 适 用 于 山 西 省 境 内 桑 蚕 一 代 杂 交 种 的 催 青。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。N Y/T 327 桑 蚕 一 代 杂 交 种 检 验 规 程3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 标 准。3.1桑 蚕 一 代 杂 交 种用 原 蚕 种 按 规 定 组 合 杂 交 繁 殖 的 蚕 种。3.2催 青蚕 种 在 适 当 的 温 度、湿 度、光 照 等 环 境 条 件 下 胚 胎 顺 利 发 育 直 至 孵 化 的 过 程。3.3起 点 胚 子可 以 开 始 催 青 的 蚕 种 胚 胎，一 般 为 丙 2 胚 胎。3.4催 青 积 温起 点 胚 子 至 蚕 种 孵 化 时 间 内，以 胚 胎 每 日 感 受 的 平 均 温 度 减 去 10 后 逐 日 累 计 的 温 度 总 和。催 青 积温（）（日 均 感 受 温 度 10）。4 催 青 设 施 和 用 具4.1 催 青 室DB 14/T 769 201324.1.1 选 址交 通 便 利，水 电 充 足，空 气 清 新，四 周 宽 阔，远 离 废 水、废 气、废 渣 三 废 污 染 源。4.1.2 结 构有 效 高 度 不 小 于 3 m，单 间 长 宽 不 小 于 6 m 4 m，南 北 朝 向，内 设 走 廊，有 对 流 窗，地 面 平 整，光线 均 匀，具 有 温 湿 度 及 光 线 调 节 设 施。4.1.3 设 施高 度 不 超 过 2.0 m，间 距 不 小 于 35 c m 的 平 附 种 蚕 种 架，或 间 距 不 小 于 10 c m 的 散 卵 催 青 架。4.2 附 属 用 房配 备 15 m2以 上 的 蚕 种 解 剖 室、20 m2以 上 的 物 品 贮 藏 室、温 湿 度 控 制 室 及 其 他 附 属 用 房。4.3 仪 器 用 具恒 温 恒 湿 空 调 机、恒 温 恒 湿 控 制 台、加 湿 器、显 微 镜、温 湿 度 显 示 器、催 青 框、催 青 架、胚 胎 解 剖用 具（天 平、烧 杯、量 杯、二 重 皿、载 玻 片、吸 管、铜 丝 网 兜、小 刀、小 号 毛 笔）等。5 催 青5.1 消 毒5.1.1 催 青 一 周 前 完 成 对 催 青 室 及 催 青 用 具 的 清 洁、消 毒。5.1.2 催 青 室 及 周 边 环 境 清 理 后 用 含 有 氯、甲 醛、硫 等 药 物 制 剂 浸 渍、喷 雾、熏 烟 进 行 消 毒；催 青 用具 采 用 日 光 曝 晒、紫 外 线、蒸 汽 等 方 法 进 行 消 毒。5.1.3 催 青 前 2 d 开 窗 升 温，排 除 消 毒 药 味 和 异 味。5.2 蚕 种5.2.1 95%蚕 种 达 到 起 点 胚 子 时 领 取 蚕 种。5.2.2 蚕 种 到 达 催 青 室 后 进 行 查 验、登 记，包 括：品 种、批 次、代 号、制 种 期、数 量、出 库 日 期、制种 场 名 等。5.2.3 依 据 N Y/T 327 检 验 卵 量、良 卵 率 等 质 量 指 标。5.2.4 根 据 表 1 蚕 种 催 青 所 需 积 温 要 求，确 定 催 青 天 数（一 般 9 11d）。表 1 常 用 品 种 催 青 积 温品 种 菁 松 皓 月 8 7 1 8 7 2 晋 蚕 三 号积 温（）1 4 0 1 5 0 1 3 5 1 4 5 1 4 0 1 5 05.2.5 以 制 种 批 为 单 位，按 附 录 A 进 行 解 剖。5.3 上 架DB 14/T 769 201335.3.1 将 蚕 种 放 在 催 青 架 上。5.3.2 催 青 架 上 标 明 进 催 青 室 的 日 期、蚕 种 代 号、品 种 名 称、批 次、制 种 场 名、制 种 期 及 代 号。5.4 温 湿 度、光 线 要 求5.4.1 蚕 种 到 达 催 青 室 前 2 h，调 节 催 青 室 温 度 至 22，湿 度 75%80%。5.4.2 根 据 胚 胎 发 育 程 度 调 节 温 湿 度 及 光 线，每 15 m i n 观 察 记 录 温 湿 度。5.4.3 常 规 催 青 见 表 2表 2 常 规 催 青 标 准催 青 日 期（天）出 库 当 日 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1胚 胎 代 号 丙 1 丙 2 丁 1-2 戊 1 戊 2 戊 3 己 1 己 2 己 3 己 4 己 5 孵 化温 度（）1 5-1 7 2 0 2 2.5 2 4 2 5 2 5.5相 对 湿 度（%）7 7 7 4 7 9 7 6 7 6 8 1 7 7 8 1 8 1 8 6 8 1-8 6光 照 自 然 光 线 每 日 感 光 1 8 h 全 日 遮 光 早 晨 5：0 0 6：0 0 感 光5.4.4 简 化 催 青 见 表 3表 3 简 化 催 青 标 准催 青 日 期（天）出 库 当 日 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1胚 胎 代 号 丙 1 丙 2 丁 1-2 戊 1 戊 2 戊 3 己 1 己 2 己 3 己 4 己 5 孵 化温 度（）1 5 1 7 2 2.5 2 5.5-2 6相 对 湿 度（%）8 0 7 6 8 1 8 1 8 6光 照 自 然 光 线 每 日 感 光 1 8 h 全 日 遮 光 早 晨 5：0 0-6：0 0感 光注 1：简 化 催 青 前 段 和 后 段 温 差 较 大，应 在 戊 1 胚 胎 1 8 h 后，以 每 小 时 升 高 0.5 的 方 法 逐 步 把 温 度 调 节 到 2 5.5 5.5 换 气根 据 室 内 空 气、天 气 状 况，催 青 前 期 每 日 上 下 午 各 换 气 1 次，每 次 换 气 10 m i n 15 m i n，胚 胎 发 育到 戊 3后，每 日 上 下 午 各 换 气 2 次。换 气 时 防 止 温 度 激 变，室 内 外 温 差 小 时，打 开 门 窗 通 风 换 气。室 内外 温 差 大 时，先 在 走 廊 换 好 气，再 进 行 室 内 换 气。5.6 调 种、摇 种每 日 上 下 午 定 时 调 换 催 青 框 位 置，按 计 划 前 后、左 右、上 下、对 角 轮 换。散 卵 在 调 种 时 摇 种，每 日两 次，摇 卵 要 轻，防 止 撞 伤 震 伤 蚕 卵 胚 胎。5.7 分 装DB 14/T 769 201345.7.1 蚕 种 点 青 达 到 80%时，对 蚕 种 进 行 包 装，放 入 包 装 箱 内，做 好 标 记，用 黑 布 遮 盖。5.7.2 包 装 采 用 透 气、牢 固、无 害、无 异 味、无 破 损 及 霉 变 的 纸 箱，标 明 蚕 种 名 称、数 量、批 次 等。5.8 发 种5.8.1 蚕 卵 胚 胎 发 育 至 己 4 己 5 时 发 种，春 蚕 达 到 98%以 上、秋 蚕 达 到 95%以 上。5.8.2 发 种 前 8h，将 蚕 种 保 护 温 度 逐 渐 调 至 自 然 温 度。5.8.3 如 需 延 迟 发 种，在 蚕 种 胚 胎 发 育 处 于 催 青 初 期 至 丁 2 阶 段 前，将 蚕 种 放 入 温 度 5，相 对 湿 度75%的 冷 库 进 行 保 护，可 抑 制 胚 胎 发 育 7 d；或 用 温 度 12，相 对 湿 度 75%，可 抑 制 胚 胎 发 育 2 d。低温 保 护 前 后，应 在 温 度 15、相 对 湿 度 75%的 环 境 中 放 置 5 h 6 h。5.9 防 病建 立 卫 生 防 病 制 度，保 持 室 内 外 清 洁 卫 生，每 天 对 催 青 室 外 环 境 进 行 消 毒，避 免 有 毒 有 害 物 质 进 入。室 内 禁 止 吸 烟、熏 蚊 香，入 室 应 换 鞋、洗 手。6 运 输在 早 晚 温 度 较 低 时 进 行，防 止 高 温、闷 热、雨 淋、剧 烈 震 动 及 有 害 气 体。DB 14/T 769 20135A A附 录 A（规 范 性 附 录）桑 蚕 催 青 胚 胎 解 剖A.1 解 剖 抽 样以 催 青 批 为 单 位，每 个 批 次 随 机 确 定 3 5 个 采 样 点，每 个 点 抽 取 10 粒 蚕 卵，共 采 集 30 50 粒。A.2 解 剖 次 数从 丙 2 胚 胎 到 戊 2 胚 胎，每 日 7：00 时 解 剖 1 次；从 戊 3 胚 胎 到 己 3 胚 胎，每 日 7：00 时 和 15：00 时 各 解剖 1 次。A.3 解 剖 方 法A.3.1 试 剂浓 度 为 20%的 K O H 或 N a O H 溶 液A.3.2 仪 器、工 具生 物 显 微 镜、铜 丝 网 兜、烧 杯、吸 管、加 热 器、二 重 皿A.3.3 准 备取 一 个 批 的 样 品 卵 放 入 铜 丝 网 兜，在 清 水 中 湿 润，将 浓 度 为 20%的 K O H 或 N a O H 溶 液 煮 沸，停 止 加热，当 解 剖 液 停 止 发 泡 时，此 时 将 铜 丝 网 兜 放 入 解 剖 液，当 卵 面 颜 色 变 成 赤 豆 色 时 取 出，用 清 水 洗 净。A.3.4 解 剖将 漂 洗 过 的 卵，移 入 盛 有 清 水 的 二 重 皿 内，用 吸 管 吸 水 反 复 冲 击 卵 粒，促 使 卵 壳 和 胚 子 分 离，将 去壳 后 的 胚 子 吸 放 到 载 玻 片。当 胚 胎 不 易 脱 离 卵 时，可 用 60 左 右 的 热 水 进 行 冲 击；当 胚 胎 附 着 的 脂 肪 球过 多 时，应 再 用 吸 管 吸 水 缓 力 冲 击，使 脂 肪 球 脱 落。A.3.5 整 理 与 镜 检将 载 玻 片 放 于 50 100 倍 显 微 镜 下，用 毛 笔 轻 轻 除 去 胚 胎 表 面 的 脂 肪 球，使 胚 胎 伸 直 平 整。根 据 表1观 察 催 青 期 各 阶 段 胚 胎 特 征，每 批 不 少 于 20 只 完 整 胚 胎。表 A.1 催 青 期 各 阶 段 胚 胎 名 称 及 主 要 特 征催 青 日 期 胚 胎 代 号 胚 胎 发 育 阶 段 胚 胎 主 要 特 征0 丙 1 最 长 期 前 体 驱 伸 长，头 褶、尾 褶 更 见 增 大，头 帽 凹 陷 明 显，1 8 个 体 节 可以 识 别。1 丙 2 最 长 期 体 驱 细 长，头 褶 发 达，凹 陷 稍 深，1 8 个 体 节 明 显，在 第 1、第 2体 节 正 中 约 见 纵 沟。DB 14/T 769 20136表 A.1（续）催 青 日 期 胚 胎 代 号 胚 胎 发 育 阶 段 胚 胎 主 要 特 征2 丁 1 肥 厚 期 体 驱 长 大，体 宽 增 阔，头 褶 边 缘 带 方，凹 陷 深 刻，1 8 个 体 节 愈见 明 显，纵 沟 全 部 清 楚。丁 2 突 起 发 生 期 体 驱 更 见 宽 大，头 褶 凹 陷 更 深，第 2 至 第 7 体 节 开 始 发 生 突 起。3 戊 1 突 起 发 达 前 期 头 褶 先 端 发 生 1 对 小 突 起，第 2 至 第 7 体 节 各 发 生 1 对 突 起。4 戊 2 突 起 发 达 后 期 体 驱 稍 短，体 宽 略 阔，头 褶 及 第 2 至 第 7 体 节 各 突 起 更 加 发 达，第 8 体 节 以 下 开 始 发 生 突 起。5 戊 3 缩 短 期 体 驱 显 著 缩 短 增 宽，前 端 4 个 体 节 开 始 缩 成 头 部，后 端 2 个 体节 开 始 缩 成 尾 部，腹 部 一 部 分 突 起 消 失。6 己 1 反 转 期 体 驱 呈 S 型，尾 端 体 凶 向 腹 面 弯 曲。7 己 2 反 转 期 终 了 体 驱 全 面 向 腹 面 弯 曲，消 化 管 形 成。8 己 3 气 管 显 现 期 气 管 开 始 着 色，蚁 蚕 形 态 初 备，在 胚 胎 外 缘 开 始 出 现 刚 毛。9 己 4 点 青 期 气 管 完 成，头 部 叶 浓 黑 色。1 0 己 5 转 青 期 蚁 体 完 成，全 部 呈 浓 黑 色。1 1 孵 化 孵 化 蚁 蚕_ _ _ _ _
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