牧草中饱和链烷烃测定 气相色谱法DB15／T 1584-2019.pdf

ICS 65.120 B 46 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1584 2019 牧草中饱 和链烷 烃测 定 气相色 谱法 The Method of Determination of Saturated Alkane Using Nalkane in Forage Samples by Gas Chromatography 2019-01-18 发布 2019-04-18 实施 内 蒙 古 自 治 区 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB15/T 1584 2019 I 前 言 本 标准按照GB/T 1.1-2009给出 的规则起 草。本标准由内 蒙古自治 区农牧业 科学院提 出。本标准由内 蒙古自治 区畜牧业 标准化技 术委员会（SAM/TC19）归 口。本标准起草 单位：内 蒙古自治 区农牧业 科学院。本标准主要 起草人：孙海洲、任晓萍、金鹿、桑 丹、李胜利、张 春华、张 崇志、珊 丹、凌树 礼、闫新刚。DB15/T 1584 2019 1 牧草中饱 和链烷 烃测定 气 相色谱 法 1 范围 本标准规定 了应用气 相色谱法 测定牧草 中饱和链 烷烃 的方法。本标准适用 于牧草中 饱和链烷 烃含量的 测定。2 规范性引用 文件 下列文件对 于本文件 的应用是 必不可少 的。凡是 注日 期的引用文 件，仅所注 日期的版 本适用 于本文件。凡是不 注日期的 引用文件，其最新 版本（包 括所 有的 修改单）适用于 本文件。GB/T 3358.1 统计学 词汇及符 号 第1部 分：一般 统计 术语与用于 概率的术 语 GB/T 6682 分析实验 室用水规 格和试验 方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 3 原理 利 用碱性物 质，处理掉样 品中的脂 肪部分及 非链烷 烃 部分，然后添加 有机溶剂 进行萃取，得到链烷烃部分。4 试剂 除特殊注明外，本标准所用 试剂均为分 析纯，水为 蒸 馏水，色谱用水 为去离子水，符合GB/T 6682的规定。4.1 98.5%正庚烷。4.2 99.7%无水乙 醇。4.3 85%氢氧化钾。4.4 99.5%正二十 七烷烃（C27）。4.5 98%正二十九 烷烃（C29）。4.6 99%正三十烷 烃（C30）。4.7 98%正三十一 烷烃（C31）。4.8 98.9%正三十 二烷烃（C32）。4.9 正三十三烷 烃（C33）。4.10 99.9%正三十 四烷烃（C34）。DB15/T 1584 2019 2 4.11 正三十五烷 烃（C35）。4.12 正三十六烷 烃（C36）。4.13 99.5%正三十 七烷烃（C37）。4.14 链烷烃标准 4.14.1 链烷烃标准 贮备液 准确称取链 烷烃标准 品4.5 mg，置于10 mL的容 量瓶中，用庚烷溶 解，定 容，其 浓度为0.45 mg/mL，置于4 冰箱 中密封保 存。4.14.2 链烷烃标准 工作液 分 别准确吸 取一定量 的标准贮 备液（4.14.1），用庚 烷稀释成浓 度不同浓 度的标准 工作液。其中，C27 的工作 液浓度分 别为 0.11 mg/mL、0.22 mg/mL、0.44 mg/mL、0.86 mg/mL、1.72 mg/mL；C29 的工 作液浓度 分别为 0.11 mg/mL、0.21 mg/mL、0.42 mg/mL、0.84 mg/mL、1.68 mg/mL；C30 的工 作液浓度 分别为 0.10 mg/mL、0.21 mg/mL、0.40 mg/mL、0.82 mg/mL、1.64 mg/mL；C31 和C32 的工作液 浓度分别 为 0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL、3.20 mg/mL；C33 的工 作液浓度 分别为 0.10 mg/mL、0.21 mg/mL、0.41 mg/mL、0.82 mg/mL、1.64 mg/mL；C34 的工 作液浓度 分别为 0.11 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL；C35 的工 作液浓度 分别为 0.10 mg/mL、0.22 mg/mL、0.43 mg/mL、0.86 mg/mL、1.72 mg/mL；C36 和C37 的 工作液浓 度分别为0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.80 mg/mL、1.60 mg/mL、3.20 mg/mL。5 仪器和设备 5.1 实 验室用样 品粉碎机 或研钵。5.2 分析天平（分度值 0.0001g）。5.3 干燥箱。5.4 气相色谱仪。5.5 数显水浴摇 床。6 试样制备 采样按照GB/T 14699.1 制备，置 于干燥 箱内于 65 烘 干，粉碎或 研磨后过 1 mm 筛，混匀，装 入密闭容器中，保存备用。7 分析步骤 7.1 试验溶液的 制备 准 确称取 100 mg 干燥样品，放入 10 mL 具塞试管 中。添加 1.5 mL 的 1 mmol/L 醇化氢 氧化钾，盖好试管后 在数显温 控水浴摇 床中90 加热16 h。然 后局部降温 到5060 后，添加1.5 mL 的1 mg/mL的庚烷内标 溶液于具 塞试管中，慢速摇 动。继续 加入0.4 mL蒸馏水 后盖好瓶 塞剧烈震 荡，再放 入50DB15/T 1584 2019 3 60 的水浴 锅中。待样 品分层后 用聚乙 烯巴斯德 吸管 移取上层部 分到小瓶 中。继续添 加1.5 mL 的1 mg/mL庚烷内标溶 液到具塞 试管中重 新萃取，移取上层 部分 到同一个小 瓶中。充 分摇匀两 次的萃取 液。使用注射器 的注射筒，用少量玻 璃棉将底 层铺平，倒 入大约1 cm 高度的硅 胶（80目 230 目），制成硅胶层析 柱。用1 mL 庚烷溶液 对层析 柱进行淋 洗激 活，利用硅 胶层析柱 过滤萃取 液。然后 取4 mL洗脱烷烃用0.45 m微孔有 机膜过滤 作为试样 溶液，供气 相色谱分析 备用。7.2 测定 7.2.1 色谱条件 柱 型：TG-1MS（规格：30 m*0.25 mm，膜厚：0.25 m）。检测器：FID(氢火焰 离子检测 器)。载气：高纯 度氮气。总压力：160 kpa。总流量：46.4 mL/min。柱流量：1.06 mL/min。线速度：35.2 cm/sec。分流比：40:1。吹扫流量：3.0 mL/min。循环流量：30.0 mL/min。H2 流量：40.0 mL/min。空气流量：400 mL/min。7.2.2 定量测定 取1 mL 2 mL 试样制 备液和相 应浓度的 标准工作 液，作多点校准，以色谱 峰面积积 分值定量。8 测定结果的 计算 8.1 试样中链烷 烃的含量 以质量分 数表示，按式（1）计 算。X=m1/（mn）（1）式中：X 试样中 链烷烃的 含量，单 位为mg/kg；m1 试样 色谱峰对 应的链烷 烃质量，单位为g；m 试样质 量，单位 为mg；n 稀释倍 数。8.2 结果表示 取两次测定 的算数平 均值作为 结果，保 留一位小 数。8.3 重复性 每试样称取 两个平行 样进行测 定，取平 均值为分 析结 果。根据GB/T 3358.1，在 相同条件 下同一样 品获得 的测 定结果的偏 差不得超 过算术平 均值的10%。_