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ICS 65.150 B 52 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 24792015 青虾亲本质量要求 The quaility standards of shrimp parents 文稿版次选择 2015-09-08 发布 2015-10-08 实施安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 24792015 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽农业大学提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽农业大学、当涂县水产局和当涂县苦菜圩水产养殖有限公司。本标准起草人：张晓华、奚业文、韦众、陶红革、杨传萍、陈晓芳、张桂芝、曹义林。DB34/T 24792015 1 青虾亲本质量要求 1 范围 本标准规定了青虾日本沼虾 Macrobranchium nipponense(de Haan)亲本质量的种质、选择等要求。本标准适用于青虾的良种亲本选择。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB 20555-2006 日本沼虾 3 亲本种质 3.1 学名与分类 3.1.1 学名 日本沼虾（Macrobranchium nipponense(de Haan)）3.1.2 分类地位 节肢动物门（Arthropoda）、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、游泳亚目(Natatia)、长臂虾科(Paleamonidea)、沼虾属(Macrobranchium)。3.2 外部形态与内部构造 符合 GB 20555-2006 中 4.1.14.1.3、4.2 的要求。3.3 可量性状 良种青虾亲本主要可量性状见表1。检测方法见附录A。表1 良种青虾亲本主要可量性状 项目 雌性（）雄性（）头胸甲长/体长 0.290.02 0.320.04 头胸甲宽/体长 0.180.01 0.180.02 腹部宽/体长 0.170.01 0.160.02 DB34/T 24792015 2 表 1（续）项目 雌性（）雄性（）第二步足长/体长 0.810.07 1.300.24 肥满度 1.940.15 1.850.16 3.4 生长 从幼虾到成虾，雌雄生长模式不同，且春季越冬群体和夏季种群的生长模式也不同。参见表2。表2 青虾生长方程 种群 雌（）雄（）春季 Lt=3.071-e-0.5798(t+0.5183)（r=0.956）Lt=3.381-e-0.4943(t+0.1672)（r=0.960）Wt=1.051-e-0.5798(t+0.5183)2.97(r=0.920)Wt=1.401-e-0.4943(t+0.1672)3.03(r=0.941)秋季 Lt=5.64/(1+e1.604-0.2385t)(r=-0.978)Lt=6.57/(1+e2.1805-0.2787t)(r=-0.968)Wt=7.56/(1+e4.203-0.3307t)(r=-0.968)Wt=13.15/(1+e4.8852-0.3764t)(r=-0.974)3.5 遗传学特征 细胞遗传学特性和生化遗传学特性指标详见附录B。4 亲本选择 4.1 来源 选用池塘培育的群体、源于沿长江、淮河湖泊野生青虾，每 2 年全部更新。4.2 选择时间 春繁亲本每年4月20日至5月20日之间，秋繁亲本每年8月5日至25日之间。4.3 雌雄区别 同龄个体，雄性大于雌性；雄性第 2 步足特别强大，长度为体长的 1.21.7 倍，雌性第 2 步足较细弱，长度不足体长的 1 倍；雄性生殖孔位于第五步足基部内侧，雌性生殖孔位于第三步足基部内侧；雄性第二腹肢的内肢各有 1 棒状附肢，雄附肢表面有刚毛，长度约为内肢的一半，雌性无；雌性腹部第 4、5 步足基部的距离较宽，呈“八”字形；雄性较窄。参见图1、图2、图3、图4。DB34/T 24792015 3 图1 雌雄青虾腹部（示第二步足）图 2 腹部放大（示第 4、5 步足基部形态）图3 雄性第二附肢（示雄性附肢）图 4 雌性第二附肢（示与雄性附肢区别）4.4 体色 青绿色，带有棕色斑纹。4.5 形态与行为标准 形态符合 GB 20555-2006 中 4.1 的要求，并要求无病、附肢完整，行动活泼、肥壮、规格一致。4.6 规格 春繁亲本雌虾体长（BL）45 mm，雄虾体长50 mm；秋繁亲本雌虾体长（BL）35 mm，雄虾体长40 mm。4.7 怀卵量 春繁亲本绝对怀卵量卵 20004000 粒，秋繁亲本绝对怀卵量卵 10002000 粒，卵颜色为绿色或橘黄色。DB34/T 24792015 4 A A 附 录 A（规范性附录）检测方法 A.1 形态生物学检测 A.1.1 抽样与测量 随机取 50 尾成体青虾进行生物学检测，主要测量指标有：体长(BL)、头胸甲长(CL)、头胸甲宽(CW)、腹长(AL)、腹宽(AW)、尾扇长(PL)、额剑长(RL)、第二步足长(P2L)（精确到 0.2 mm）；体质量(BW)、卵质量(EW)（精确到 0.001 g）。参见图A.1.图A.1 青虾主要形态性状 A.1.2 抱卵量计数方法 选取抱卵虾，逐尾将卵取出后在显微镜下计数。A.2 染色体分析 A.2.1 取材与预处理 DB34/T 24792015 5 取材以青虾精巢为佳，从雄虾腹部第 1、2 节侧甲缝中注射秋水仙素，浓度 1.5 ug/g，处理 46 h 后，在解剖镜下取精巢。A.2.2 低渗与固定 将精巢剪成 23 mm 大小，置于含低渗液（0.075 mol/L kcl)烧杯中，于 37环境中低渗处理 30 min。小心弃去低渗液，沿烧杯壁加入新配置的 4预冷的 Carnoy 固定液（乙醇：冰乙酸=3:1），放入 4冰箱中固定 1 h，期间更换 23 次固定液。A.2.3 制片、染色、计数、组型分析 按 GB/T 18654.12 的规定执行。A.3 生化遗传学分析 A.3.1 样品采集、制备与电泳 按照 GB 20555 的规定执行。A.3.2 检测规则与结果评判 按 GB/T 18654.12 的规定执行。DB34/T 24792015 6 B B 附 录 B（资料性附录）青虾的遗传学特性 B.1 细胞遗传学特征 体细胞染色体数 2n=104，染色体臂数 NF=178；核型组成为：n=16M+21SM+4ST+11T。参见图B.1。图B.1 青虾染色体组型图 B.2 生化遗传学特征 B.2.1 苹果酸脱氢酶（MDH）经染色，健康成体青虾肌肉组织 MDH 有 5 条酶带，同工酶谱见图B.2，各酶带的相对迁移率见表B.1。图B.2 青虾肌肉组织 MDH 同工酶电泳图谱 DB34/T 24792015 7 表B.1 青虾肌肉组织 MDH 各酶带相对迁移率 项目 酶带 MDH1 MDH2 MDH3 MDH4 MDH5 相对迁移率 0.13 0.17 0.23 0.29 0.32 B.2.2 酯酶（EST）经染色，健康成体青虾肌肉组织 EST 有 5 条酶带（见图B.3）。各酶带的相对迁移率见表B.2。图B.3 青虾肌肉组织 EST 同工酶电泳图谱 表B.2 青虾肌肉组织 EST 各酶带相对迁移率 项目 酶带 EST1 EST2 EST3 EST4 EST5 相对迁移率 0.08 0.325 0.375 0.71 0.74 _
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