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ICS 65.020.20 B 05 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1649 2019 蒙树1 号 杨和蒙树2 号杨 组培 育苗技术 规 程 Tissue culture and rapid propagation technique guideline for Populus mengshu-1 and mengshu-2 2019-05-20 发布 2019-08-20 实施 内 蒙 古 自 治 区 市 场 监 督 管 理 局 发布 DB15/T 1649 2019 I 目 次.II 1.1 2.1 3.1 4.1 5.2 6.3 7.4 8.4 9.4 10.5 11.6 A MS.7 DB15/T 1649 2019 II 前 言 GB/T1.1-2009 DB15/T 1649 2019 1 蒙树 1 号 杨和蒙 树2 号杨 组培育 苗技术规 程 1 范围 1 2 1 2 2 规范性 引用 文件 LY/T 1882-2010 3 术语和 定义 LY/T 1882-2010 3.1 蒙树1 号杨 Populus mengshu-1(Populus tomentosa P.bolleana)(P.canescens)3.2 蒙树2 号杨 Populus mengshu-2 4 环境及 器具 灭菌 4.1 准备 室 消毒 灭菌 4.2 接种室 消毒 灭菌 30 min 40 min 20 min 4.3 培养室 消毒 灭菌 DB15/T 1649 2019 2 4.4 超净工 作台 消毒 灭菌 30 min 40 min 40 min 70%4.5 器具消 毒灭 菌 4.5.1 接种器 具消 毒灭 菌 121 30 min 20 s 4.5.2 污染瓶 消毒 灭菌 5 培养基 配制 5.1 基本培 养基 选择 MS 5.2 母液的 配制 和保 存 5.2.1 母液的 配制 MS A 20 B C 100 D 200 E 50 A 0.5 mg/L 5.2.2 母液的 保存 4 5.3 培养基 制备 5.3.1 准备工 作 pH 5.3.2 蔗糖和 琼脂 准备 30 g/L 6 g/L 5.3.3 加母液 A B C D E 50 ml/L 10 ml/L 5 ml/L 5 ml/L 10 ml/L DB15/T 1649 2019 3 A B C D E 25 ml/L 10 ml/L 5 ml/L 5 ml/L 10 ml/L 1 2 6-BA 0.30 mg/L NAA 0.05 mg/L 1 6-BA 0.30 mg/L IBA 0.20 mg/L 2 6-BA 0.50 mg/L IBA 0.2 mg/L 1 IBA 0.30 mg/L NAA 0.20 mg/L 2 IBA 0.30 mg/L NAA 0.10 mg/L 5.3.4 母液定容 5.3.5 加热溶 解 5.3.6 pH 值 调节 1 mol/L HCl 1 mol/L NaOH pH 5.8 6.0 5.3.7 分装 350 ml 50 ml 5.3.8 封口 5.3.9 标记 5.3.10 灭菌 8 121 20 min 5.3.11 冷却 2 d 3 d 5.3.12 贮存 7 d 4 15 d 6 外植体 及其 灭菌 6.1 外植体 采集 1 3 5 cm 10 cm DB15/T 1649 2019 4 6.2 外植体 灭菌 20%15 min 30 min 75%10 s 0.1%5 min 5 7 初代培 养 7.1 初代培 养基 5.3.3 7.2 初代接种 1 cm 1 7.3 培养条 件 25 2 2000 lx 14 h/10 h 8 继代培 养 8.1 继代培 养基 5.3.3 8.2 继代转接 3 cm 4 cm 2 cm 1 2 6 7 8.3 培养条 件 25 2 2000 lx 12 h/12 h 8.4 培养期 20 d 30 d 9 生根培 养 9.1 生根培 养基 5.3.3 DB15/T 1649 2019 5 9.2 生根转接 3 cm 4 cm 2 cm 1 2 8 10 3 mm 5 mm 9.3 培养条 件 25 2 1500 lx 12 h/12 h 9.4 培养 期 25 d 30 d 10 炼苗 10.1 瓶苗炼苗 3 cm 4 cm 20 30,1500 lx 2000 lx 1 10.2 温室穴 盘炼苗 10.2.1 炼苗床 搭建 60 cm 70 cm 10.2.2 穴盘 48 mm 23 mm 40 mm 10.2.3 基质 6 mm 1 mm 2 mm 3 mm 6 mm=3:2:1 10.2.4 填装基质 10.2.5 瓶苗清洗 30 35 0.5 mg/L 3 min 10.2.6 穴盘栽植 10.2.7 炼苗操作 20 30 60%70%14 d DB15/T 1649 2019 6 7 60%70%8 9 11 12 14 10.2.8 养护管理 3 d 15 d MS 10.2.9 炼苗期 45 d 15 cm 11 大田移 栽 11.1 整地 30 cm 11.2 灌溉方式 75 mm 11.3 苗木栽 植 30 cm 50 cm 2 cm 3 cm 11.4 大田管理 3 d 4 d 1 2 5 cm 2 MS DB15/T 1649 2019 7 A A 附 录 A（资料 性附 录）MS 培 养基 母液 配制 表 表A.1 MS 培 养基 母液 配制 表 mg/L mg mL mL/L A NH4NO3 1650 20 33000 1000 50 KNO3 1900 20 38000 CaCl2 2O 440 20 8800 MgSO4 2O 370 20 7400 KH2PO4 170 20 3400 B FeSO4 2O 27.8 100 2780 1000 10 Na2 2O 37.3 100 3730 C MnSO 4H2O 22.3 100 2230 500 5 ZnSO4 2O 8.6 100 860 H3BO3 6.2 100 620 KI 0.83 100 83 Na2MoO4 2O 0.25 100 25 CuSO4 2O 0.025 100 2.5 CoCl2 2O 0.025 100 2.5 D 2 200 400 1000 5 B1 0.1 200 20 B6 0.5 200 100 0.5 200 100 E 100 50 5000 500 10 注 4 _
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