生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒DB11／T 1129-2014.pdf

ICS 65.020 B 15 DB11 北京市地方标准 DB 11/T 1129 2014 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Technical regulation for applying of biocontrol production Clostera anachoreta(Denis&Schifferm ler)Granulosis Virus 2014-11-05发布 2015-03-01实施 北京市质量技术监督局 发布 DB11/T 1129 2014 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。本标准由北京市园林绿化局提出并归口。本标准由北京市园林绿化局组织实施。本标准起草单位：北京市西山试验林场、北京市林业保护站。本标准主要起草人：梁洪柱、陈倩、周荣伍、颜容、宁少华、张玉博。DB11/T 1129 2014 1 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 1 范围 本标准规定了杨扇舟蛾颗粒体病毒（Clostera anachoreta(Denis&Schifferm ller)Granulosis Virus，简称 CaGV）的防治对象、防治适期、使用剂量、施用方式、效果调查方 法。本标准适用 于 北京 地区利 用杨扇舟蛾颗粒体病毒防治杨扇舟蛾 幼虫。2 术语和定义 下列术语和 定 义 适用 于 本 文件。2.1 杨扇舟蛾 Clostera anachoreta(Denis&Schifferm ller)异名：Pygaera anachoreta pallida Staudinger，Pygaera mahatma Bryk。别名：白 杨 天社 蛾、白 杨 灰天社 蛾、杨 树天社 蛾、小叶 杨 天社 蛾。属鳞翅目 Lepidopera舟蛾 科 Notodontidae。危害 杨 属 Polulus和柳属 Salix植物。识别特征参见附录A。2.2 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Clostera anachoreta(Denis&Schifferm ller)granulosis virus 一种具有较高宿 主 特异性 的 昆虫 病毒。2.3 多角体 polyhedral inclusion body（PIB）包埋 病毒粒 子 的 包涵 体，是表示 病毒 数 量的单位。2.4 制剂 pesticide perparation 所制成 的 某一含 量 和某一 用 途 的 产品。3 CaGV制剂的应用 3.1 防治对象 杨扇舟蛾 幼虫。DB11/T 1129 2014 2 3.2 制剂准备 参见附录 B。3.3 防治适期 1龄 2龄低龄幼虫 期防治 为最佳。每年物候差异较大，以当年各代虫情预测预报为 准。在 北京 地区，正常年份，第 1代低龄幼虫在 5月上中旬；第 2代低龄幼虫在 6月中下旬；第 3代低龄幼虫在 7月 末 8月上旬；第 4代低龄幼虫在 8月 末 9月上旬。3.4 使用剂量 防治 低龄幼虫，每 公顷 用 3.75 1011多角 体（PIB）；防治 其他 龄 期 幼虫，用量 加倍，即 每 公顷 用 7.5 1011PIB。3.5 施用方式 杨扇舟蛾颗粒体病毒 为 胃 毒剂，使用 时应均匀喷洒到 树叶上。具 体使用方 法见表 1。表 1 杨扇舟蛾颗粒体病毒制剂施用方式 喷雾类型 地 面喷雾/飞机喷雾 低龄幼虫 稀释倍 数 其他 龄 期 幼虫 稀释倍 数 常 量 喷雾 地 面喷雾 1000 500 飞机喷雾 30 15 低 量 喷雾 地 面喷雾 100 50 飞机喷雾 10 4 超 低 容量 喷雾 地 面喷雾 4 1.5 4 效果调查 4.1 调查内容 检 查 虫 口 减退率 和成 灾率，以 此来 表示 防治效果。4.2 调查时间 制 剂 喷洒后 第 15d调查 一 次。4.3 调查方法 在幼虫 发生 期，针 对杨扇舟蛾 危害 的杨 属和柳属树 木 的 树 冠处进行 调查。每 个 调查 区以 林 班、行政 村或自然村 为 单位，划 定标准 地。按 每 50hm2不 少 于 2块、每 100hm2不 少 于 5块、每 500hm2不 少 于 15块设置 标准 地，调查防治 前后 的 活 虫数。标准 地 内随机选取 20株作 为 标准 株，逐 一 进行详 查。4.4 计算公式 虫 口 减退率及 成 灾率计算 方 法见 公 式（1）、（2）：DB11/T 1129 2014 3 100-%=防治 前活 虫数 防治 后活 虫数 防治 前活 虫数）虫 口 减退率（(1)1000%=寄 主 总面积成 灾面积）成 灾率（(2)DB11/T 1129 2014 4 A A 附 录 A（资料性附录）杨扇舟蛾的形态特征 A.1 成虫 雌 虫 体 长 15mm 20 mm，翅 展 38mm 42mm；雄 虫 体 长 13mm 17mm，翅 展 23mm 37mm。灰 褐色，前 翅 顶角部分 有一 个深 灰 褐色 的扇 形斑，其 下 方 有一较大 黑点。头顶至胸背 中 央 有 黑棕色条带。A.2 卵 扁圆 形，直径 1mm，初 产 时 橙红 色，孵 化 时 暗 灰 色，产于叶 片 背面或 小 枝 上，单 层排 列。A.3 幼虫 老熟 时 体 长 32mm 40mm。头黑褐色。全身密披 灰 黄 色长 毛；身 体 灰 赭 褐色，背面带 淡黄 绿 色；背 线、气门 上 线 和 气门线暗 褐色，气门 上 线 较 宽；每 节两侧 各有 4个 赭 色 小 毛瘤，环 形 排 列，其 上有 长 毛。第 1、8腹节 背面 中 央 有 1枣红 色 大 瘤，其 基 部 边缘 黑色，两侧 各 伴 有 1个 白 点。A.4 蛹 体 长 13mm 18mm，褐色，尾 部 有 分 叉 的 臀棘。所 结茧 为灰白 色，椭圆 形。DB11/T 1129 2014 5 B B 附 录 B（资料性附录）制剂准备 B.1 CaGV的室内增殖 B.1.1 增殖室条件 温度 25，光 照 L：D=14:10，光源 为白 炽灯。B.1.2 饲养植物 新鲜 黑 杨 派 杨 树叶 片。B.1.3 饲养 工具 透明塑料养 虫 杯，底直径 3.5cm，顶 直径 5.0cm，杯 高 5.0cm。B.1.4 增殖方法 在 养 虫 杯 内 放入 15头 杨扇舟蛾 初孵 幼虫，每天 喂饲新鲜 杨 树叶 片。待 幼虫 发 育 至 3龄 末时，开始喂饲 带 毒 叶 片（将新鲜 叶 片浸 于 浓度 为 1.0 106PIB/ml的 CaGV液 体 中 5s，取 出 后 阴干），每天 更换 带 毒 叶 片。饲喂 期 间 及时 清理养 虫 杯 内 的 虫 粪，防 止 虫 体 感染杂菌。待 80%幼虫 死亡 时，收集 所有幼虫，-10 长 期 贮存。B.2 CaGV的 提纯 B.2.1 CaGV的 提取 将 B.1.4中 收集 的 幼虫 加 2倍 无菌水 稀释，在高 速 组织 捣碎 机 上，粉碎 3min后取 出，先 用 三 层 纱布 初 步过滤，再 用 80目 筛 子 进 一 步过滤，滤 液 用 16000r/min离心 机 离心，滤 液 分 为 三 层，上 层清液 为 水，弃之；中 间 浅 褐色 沉淀 为 病毒 粗 提 物，保 留；底 部黑色 沉淀 为 杂 质，弃之。B.2.2 粗提 物的 测 定 取 1克 病毒 粗 提 物 稀释至 1000倍，然后取 1ml稀释 液 滴 于 血球 计 数 板 上，盖盖玻 片，在 显微镜 15 40倍 状态 下 计 数，对 角 线 取 样，共 取 80小 格，颗粒 边缘 不 在 同 一小 格 内 的 不计，并按 公 式（B.1）计算 病毒 内 PIB含 量。如 果 粗 提 物含 量 低于 1.25 1011PIB/ml，表 明 病毒 粗 提 物中 杂 质 含 量 过 高，应加 2倍 无菌水 混 匀，重 新 离心 提 纯，除 杂 质，直 至 含 量 合格。每 克 PIB含 量=平 均 每 格 颗粒体 数 400万 1000（B.1）注：1000为 稀释倍 数。B.3 CaGV制剂的 配 制和 保存 DB11/T 1129 2014 6 B.3.1 配 制 将 B.2.1中含 量 合格 的 CaGV加 7%的 盐 水，与 50%中性 甘油混合，三者重 量 比 为 1：49：50，制成甘油 病毒 悬 液。B.3.2 保存 避 光、避紫外 线 照 射。4，可 保 存 2年；常 温，可 保 存 6个 月。B.4 CaGV制剂的质量 检测 用 多点 抽样 的方 法，取 1ml B.3.2中 保 存 的 甘油 病毒 悬 液，按 B.2.2中 方 法测 定，CaGV制 剂 含 量 在 1.25 109PIB/ml以上，为 合格。DB11/T 1129 2014 7 参 考 文 献 1 DB11/T 703 2010 美国 白 蛾 综合 防 控技 术 规 程 2 DB43/T 151 2000 日 本 赤松 毛 虫 质 型多角 体病毒 及其 杀 虫 剂（J-DSCPV）的 质 量、生 产、使用 技 术 规 程 3 萧刚柔 主 编 1992 中 国森 林 昆虫第 2版（增订 本）北京：中 国 林业出 版 社 1016 1017 4 武春 生 方 承莱编著 2003 中 国动 物 志 昆虫 纲 第 三十 一 卷 鳞翅目 舟蛾 科 北京：科 学 出 版 社 802 804 5 包 建 中 古德祥编著 1998 中 国 生 物 防治 山西：山西 科 学技 术 出 版 社 437 440 _