文冠果组织培养育苗技术规程DB21/T 3859-2023.pdf

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D B 2 1/T X X X X X 2 0 2 2I C S 6 5.0 2 0.0 1C C S B 6 1DB21辽 宁 省 地 方 标 准D B 2 1/T 3 8 5 9-2 0 2 3文 冠 果 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程2 0 2 3-1 0-3 0 发 布 2 0 2 3-1 1-3 0 实 施辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 3I目 次前 言.1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 术 语 和 定 义.14 外 植 体 采 集.14.1 选 取 部 位.14.2 取 材 季 节.24.3 取 材 标 准.25 培 养 基 配 制.25.1 接 种 器 具 和 培 养 基 灭 菌.25.2 初 代 培 养 基 配 方.25.3 继 代 培 养 基 配 方.25.4 生 根 培 养 基 配 方.26 外 殖 体 处 理.26.1 处 理.26.2 消 毒 灭 菌.26.3 准 备.27 初 代 培 养.27.1 培 养 环 境 条 件.27.2 培 养 方 法.38 继 代 培 养.38.1 培 养 环 境 条 件.38.2 培 养 方 法.39 生 根 培 养.39.1 培 养 环 境 条 件.39.2 培 养 方 法.39.3 生 根.31 0 组 培 苗 移 栽.31 0.1 移 苗 季 节.31 0.2 移 苗 前 准 备.31 0.3 移 栽.41 0.4 移 栽 后 管 理.41 1 技 术 档 案.4D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 3I I附 录 A(资 料 性)文 冠 果 穴 盘 苗 培 养 的 管 理 措 施.5附 录 B(资 料 性)文 冠 果 苗 期 病 虫 害 防 治 药 剂 及 使 用 方 法.6附 录 C(资 料 性)文 冠 果 组 织 培 养 苗 木 质 量 分 级.7D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 3I I I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分:标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起草。本 文 件 由 辽 宁 省 林 业 和 草 原 局 提 出 并 归 口。本 文 件 起 草 单 位:大 连 民 族 大 学、上 海 培 林 生 物 科 技 有 限 公 司、大 连 市 自 然 资 源 事 务 服 务 中 心、国有 阜 新 蒙 古 族 自 治 县 林 业 科 技 示 范 林 杨。本 文 件 起 草 人:阮 成 江、都 小 绪、任 丽 娜、闫 晓 芳、丁 健、杜 维、高 岩、张 辉、李 颖 群、李 贺、王莉、李 景 滨、赵 思 阳、姜 鑫、姜 艺、周 慧、程 彦 博、常 婧、林 晓 坤。本 文 件 发 布 实 施 后,任 何 单 位 和 个 人 如 有 问 题 和 意 见 建 议,均 可 以 通 过 来 电 和 来 函 等 方 式 进 行 反 馈,我 们 将 及 时 答 复 并 认 真 处 理,根 据 实 际 情 况 依 法 进 行 评 估 及 复 审。归 口 管 理 部 门 通 讯 地 址:辽 宁 省 林 业 和 草 原 局(沈 阳 市 和 平 区 太 原 北 街 2 号),联 系 电 话:0 2 4-2 3 4 4 8 9 2 7。文 件 起 草 单 位 通 讯 地 址:大 连 民 族 大 学(大 连 市 金 普 新 区 辽 河 西 路 1 8 号),联 系 电 话:0 4 1 1-8 7 6 5 2 5 3 6。D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 31文 冠 果 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 文 冠 果(X a n t h o c e r a s s o r b i f o l i u m B u n g e)组 织 培 养 育 苗 过 程 中 外 植 体 采 集、配 养基 配 制、外 殖 体 处 理、初 代 培 养、继 代 培 养、生 根 培 养、组 培 苗 移 栽 和 技 术 档 案 等 技 术 要 求。本 文 件 适 用 于 辽 宁 省 行 政 区 域 内 文 冠 果 组 织 培 养 育 苗。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中,注 日 期 的 引 用 文 件,仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件;不 注 日 期 的 引 用 文 件,其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本文 件。G B/T 6 0 0 1 育 苗 技 术 规 程L Y/T 1 8 8 2 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1文 冠 果 X a n t h o c e r a s s o r b i f o l i u m B u n g e无 患 子 科 文 冠 果 属 的 多 年 生 落 叶 乔 木。3.2初 代 培 养 p r i m a r y c u l t u r e又 称 诱 导 芽 培 养,外 植 体 接 种 到 培 养 基 上 以 后,一 般 先 放 在 培 养 室 进 行 弱 光 培 养,首 先 要 得 到 无 菌的 材 料,然 后 逐 渐 促 进 材 料 的 分 化 和 生 长,这 是 试 管 苗 的 第 一 代,称 初 代 培 养。3.3继 代 培 养 s u b c u l t u r e又 称 分 化 培 养,初 代 培 养 以 后 通 过 不 断 调 试 培 养 基 和 转 接 试 管 苗,使 试 管 苗 数 量 很 快 扩 大,这 种 不断 转 接 增 殖 的 过 程 称 为 继 代 培 养。3.4生 根 培 养 r o o t i n g c u l t u r e大 量 继 代 增 殖 以 后 能 形 成 无 根 的 芽 苗,在 培 养 基 上,利 用 从 茎 表 皮 细 胞 分 裂 形 成 突 起 的 根 原 基,进一 步 从 表 皮 培 养 形 成 根 的 过 程。4 外 植 体 采 集4.1 选 取 部 位选 取 文 冠 果 茎 尖、茎 段。D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 324.2 取 材 季 节在 春 季 芽 开 始 萌 发 或 正 萌 发 生 长 时 取 材。4.3 取 材 标 准选 取 当 年 半 木 质 化 枝 的 嫩 芽、嫩 枝 段 做 材 料;茎 尖、茎 段 长 0.5 c m 1.0 c m,每 段 留 芽 1 个 2 个。5 培 养 基 配 制5.1 接 种 器 具 和 培 养 基 灭 菌接 种 器 具 和 培 养 基 灭 菌 参 照 L Y/T 1 8 8 2。5.2 初 代 培 养 基 配 方初 代 培 养 基:S+6-苄 基 腺 嘌 呤 1 m g/L+吲 哚-3-丁 酸 0.1 m g/L+山 梨 酸 钾 2 0 m g/L+糖 3 0 g/L+琼 脂 6 g/L。5.3 继 代 培 养 基 配 方继 代 培 养 基:减 少 2 0 0 m g/L 硝 酸 铵 的 M S 培 养 基+6-苄 基 腺 嘌 呤 0.5 m g/L+萘 乙 酸 0.1 m g/L+糖 3 0 g/L+琼 脂 6 g/L。壮 苗 培 养 基:减 少 2 0 0 m g/L 硝 酸 铵 的 M S 培 养 基+6-苄 基 腺 嘌 呤 0.1 m g/L+萘 乙 酸 0.1 m g/L+维 生 素B 1 2 m g/L+糖 3 0 g/L+琼 脂 6 g/L。5.4 生 根 培 养 基 配 方文 冠 果 组 织 培 养 的 生 根 培 养 基:1/2 M S 培 养 基+吲 哚-3-丁 酸 1 m g/L+维 生 素 C 1 5 0 m g/L+糖 3 0 g/L+琼脂 6 g/L。6 外 殖 体 处 理6.1 处 理用 消 毒 过 的 剪 刀,采 集 文 冠 果 半 木 质 化 嫩 枝 作 为 外 植 体,用 清 洁 水 漂 洗 1 h 2 h,再 用 流 水 冲 洗 干净,标 记 好 编 号。将 外 植 体 叶 片 剪 掉,留 1 c m 2 c m 的 叶 柄,用 流 水 冲 洗 1 0 m i n 3 0 m i n,剪 成 3 c m 5 c m带 芽 茎 段。6.2 消 毒 灭 菌将 洗 干 净 的 外 植 体 拿 到 超 净 台 内,用 7 5%酒 精 冲 洗 3 0 s 6 0 s,无 菌 水 冲 洗 3 次,再 用 次 氯 酸 钠 溶液 消 毒 3 m i n 1 0 m i n,无 菌 水 洗 4 次 水 洗,间 隔 不 少 于 5 m i n,冲 洗 次 数 以 水 清 澈 为 准。6.3 准 备将 已 灭 菌 的 枝 条 去 掉 顶 端 和 底 部,切 成 0.5 c m 1 c m 带 芽 茎 段、茎 尖。7 初 代 培 养7.1 培 养 环 境 条 件D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 33培 养 室 温 度 2 3 2 5,湿 度 2 0%3 0%,光 照 强 度 2 2 0 0 l x 2 5 0 0 l x,整 齐 摆 放 在 培 养 架 上。7.2 培 养 方 法在 超 净 工 作 台 上 将 准 备 好 的 外 植 体 接 种 在 初 代 培 养 基 上。暗 培 养 3 d 后 转 入 光 培 养,培 养 2 5 d 3 5 d茎 段 上 萌 发 出 不 定 芽。8 继 代 培 养8.1 培 养 环 境 条 件培 养 室 温 度 2 3 2 5,湿 度 2 0%3 0%,光 照 强 度 2 2 0 0 l x 2 5 0 0 l x,整 齐 摆 放 在 培 养 架 上。8.2 培 养 方 法外 植 体 长 满 培 养 瓶,就 需 转 入 到 新 的 继 代 培 养 基 中,在 超 净 工 作 台 上,用 接 种 剪 子 和 镊 子 剪 成1.0 c m 1.2 c m 茎 段 插 入 培 养 瓶 内,每 瓶 1 0 段 1 5 段。继 续 培 养 2 5 d 3 0 d,待 其 长 满 瓶 后 转 入 壮 苗 培 养基 中 继 续 培 养,重 复 操 作。文 冠 果 扩 繁 方 法 为 分 株 繁 殖 方 式,扩 繁 继 代 过 程 的 扩 繁 系 数 为 6。9 生 根 培 养9.1 培 养 环 境 条 件培 养 室 温 度 1 8 2 5,湿 度 2 0%3 0%,光 照 强 度 2 2 0 0 l x 2 5 0 0 l x,整 齐 摆 放 在 培 养 架 上。9.2 培 养 方 法采 用 培 养 基 瓶 内 一 步 生 根 法 生 根。在 无 菌 超 净 工 作 台 上,从 壮 苗 培 养 后 的 芽 丛 中 切 割 单 株,用 接 种剪 子 和 镊 子 剪 成 1.0 c m 1.2 c m 茎 段 插 入 培 养 瓶 内,每 瓶 插 1 0 株 1 5 株。在 黑 暗 环 境 中 培 养 8 d 1 0 d,根 原 基 开 始 萌 动 后,开 始 正 常 培 养。9.3 生 根生 根 过 程 为 2 5 d 3 0 d,根 数 1 条 5 条,颜 色 白 色,吸 收 力 强,移 栽 成 活 率 高。1 0 组 培 苗 移 栽1 0.1 移 苗 季 节组 培 苗 移 入 温 室 全 年 均 可 进 行,最 佳 时 间 为 早 春。1 0.2 移 苗 前 准 备1 0.2.1 清 除 培 养 基组 培 苗 从 瓶 中 取 出,放 在 2 0 左 右 的 清 水 中,将 附 着 在 根 上 的 培 养 基 进 行 彻 底 清 洗,注 意 不 能 伤根;对 长 度 超 过 5 c m 的 根 进 行 适 当 修 剪。最 后 蘸 根 宝 3 号 生 根 剂 1 0 0 0 倍 液 2 0 0 0 倍 液 促 进 生 根。1 0.2.2 穴 盘 准 备D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 34采 用 5 1 0 的 穴 盘。将 基 质 添 加 入 穴 盘 的 每 一 个 穴 位。基 质 要 求 排 水 性 和 透 气 性 良 好,同 时 有 一 定的 保 水 性;可 采 用 草 炭 和 沙 子 按 照 比 例 1:1 进 行 混 合,然 后 用 敌 克 松 5 0 0 倍 液 8 0 0 倍 液 均 匀 喷 洒 进 行 消毒。1 0.3 移 栽采 用 穴 盘 移 栽 文 冠 果 组 培 苗。栽 植 标 准 为:苗 木 根 系 舒 展,上 不 埋 心,下 不 露 根,并 轻 轻 镇 压,栽植 后 用 细 喷 雾 器 喷 水,冲 掉 叶 面 上 沾 着 的 基 质,使 根 系 与 基 质 密 切 接 触。1 0.4 移 栽 后 管 理1 0.4.1 穴 盘 苗 培 养穴 盘 苗 培 养 的 管 理 措 施 见 附 录 A。1 0.4.2 钵 苗 培 养组 培 苗 在 穴 盘 中 生 长 3 0 d 后,根 系 与 基 质 已 经 形 成 根 团,即 可 移 栽 至 可 降 解 营 养 钵 中。移 栽 时 要 求基 质 不 散 落,移 栽 后 及 时 浇 水。每 7 d 1 0 d 喷 布 一 次 杀 菌 剂 多 抗 霉 素 1 0 0 0 倍 液、异 菌 多 菌 灵 1 5 0 0 倍 液(或恶 霉 灵 1 0 0 0 倍 液)、阿 维 菌 素 1 5 0 0 倍 液 2 0 0 0 倍 液,防 治 根 腐 病、灰 霉 病、红 蜘 蛛。具 体 防 治 药 剂 及配 制 方 法 见 附 录 B。1 0.5 苗 木 出 圃文 冠 果 组 培 苗 在 营 养 钵 中 生 长 4 0 d 后,达 到 苗 木 等 级、级,即 成 苗、出 圃。详 见 附 录 C。1 1 技 术 档 案按 G B/T 6 0 0 1-1 9 8 5 要 求,建 立 相 应 育 苗 技 术 管 理 档 案。D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 35A A附 录 A(资 料 性)文 冠 果 穴 盘 苗 培 养 的 管 理 措 施表A.1 文 冠 果 穴 盘 苗 培 养 的 管 理 措 施条件 1 0 d 之内 1 0 d 1 9 d 2 0 d 3 0 d温度 2 0 2 5 2 0 2 5 2 0 2 5 湿度控制在8 0%9 0%,最好用间歇喷雾保湿,也可用塑料拱棚保湿。逐渐降低到4 0%5 0%,采用拱棚保湿的,可逐渐打开。逐渐降低到4 0%以下。光照采用拱棚时,棚内控制在3 0 0 0l x 5 0 0 0 l x。采用拱棚时,棚内逐渐增强至8 0 0 0l x 1 0 0 0 0 l x。温室内控制在1 0 0 0 0 l x 以上。通风每天早晚各通风一次,每次通风以湿度降到6 0%7 0%为宜。拱棚与温室保持时时通风换气。与温室内空气保持一致。杀菌剂每7 d 1 0 d 喷布一次杀菌剂多抗霉素1 0 0 0 倍液、异菌多菌灵1 5 0 0 倍液(或恶霉灵1 0 0 0 倍液),防治根腐病、灰霉病。每7 d 1 0 d 喷布一次杀菌剂多抗霉素1 0 0 0 倍液、异菌多菌灵1 5 0 0 倍液(或恶霉灵1 0 0 0 倍液),防治根腐病、灰霉病。每7 d 1 0 d 喷布一次杀菌剂多抗霉素1 0 0 0 倍液、异菌多菌灵1 5 0 0 倍液(或恶霉灵1 0 0 0 倍液),防治根腐病、灰霉病、红蜘蛛。D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 36附 录 B(资 料 性)文 冠 果 苗 期 病 虫 害 防 治 药 剂 及 使 用 方 法表B.1 文 冠 果 苗 期 病 虫 害 防 治 药 剂 及 使 用 方 法药剂名称 剂型 病害及虫害 用药量 备注敌克松 粉剂 4 0 0 倍液1 0 0 0 倍液 基质消毒异菌多菌灵 悬浮剂 根腐病、灰霉病 1 0 0 0 倍液1 2 0 0 倍液 移栽后喷布多抗霉素 水剂 根腐病、灰霉病 1 6 0 0 倍液1 8 0 0 倍液 移栽后喷布恶霉灵 9 9%粉剂 根腐病、灰霉病 8 0 0 倍液1 2 0 0 倍液 移栽后喷布阿维菌素 5%乳油 红蜘蛛 1 2 0 0 倍液1 8 0 0 倍液 移栽后喷布D B 2 1/T 3 8 5 9 2 0 2 37附 录 C(资 料 性)文 冠 果 组 织 培 养 苗 木 质 量 分 级表C.1 文 冠 果 组 织 培 养 苗 木 质 量 分 级注 1:1-0 表示 1 年生组培苗,未经移植。注 2:营养钵7 h 7 1 5。名称 种类 苗龄苗木等级综合控制指标、级苗百分率适用范围级 级地径c m苗高c m根系 叶地径c m苗高c m根系 叶长度c m根数(条)叶片数(个)长度c m根数(条)叶片数(个)文冠果 组培苗 1-0 0.3 0 4 0 1 5 1 5 50.1 5 0.2 92 0 3 9 1 0 1 5 1 0 1 5 3 5枝 叶 完整,无损 伤、无 病 虫害,生长健壮9 0辽宁省行政区域内_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
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