枣疯病综合防治技术规程DB11／T 1186-2015.pdf

ICS 65.020.20 B 16 备案号：DB11 北京市地方标准 DB11/T 1186-2015 枣疯病综合防治技术规程 Technical code of practice for control of Jujube witches broom 2015-04-30发布 2015-08-01实施 北京市质量技术监督局 发布 DB11/T 1186-2015 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 病树的分级.1 5 防治措施.1 5.1 检疫措施.1 5.2 建园要求与品种选择.2 5.3 枣园环境治理.2 5.4 栽培管理措施.2 5.5 病树清理.2 5.6 防治媒介昆虫.2 5.7 疯枝清理.2 5.8 换头改造.2 5.9 输液治疗.2 附录 A（资料性附录）枣疯病识别特征.3 附录 B（资料性附录）枣疯病病树分级.4 附录 C（资料性附录）枣疯病植原体 PCR检测和检验方法.5 附录 D（资料性附录）常见传病叶蝉的生物学特性.7 附录 E（资料性附录）输液治疗防治枣疯病方法.8 参考文献.10 DB11/T 1186-2015 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009 给出的规则起草。本标准 由北京市 园 林绿化局提 出 并归口。本标准 由北京市 园 林绿化局组织实 施。本标准起草 单位：北京市林业保护站。本标准参与起草 单位：中国林业科 学 研究院、北京流村王 园 果 园。本标准 主 要起草 人：王合、陶万强、刘曦、田国忠、袁菲、潘彦平、任争光、郝少东、冯 术 快、李志朋、王峰、李杰、赵连祥。DB11/T 1186-2015 1 枣疯病综合防治技术规程 1 范围 本标准规定 了 枣疯病的病 情 分级和 综合 防治 技 术。本标准 适 用 于北京地区 枣疯病的防治。2 规范性引用文件 下列 文件 对于 本文件的 应 用 是必不可少 的。凡是注日期 的引用文件，仅所注日期 的 版 本 适 用 于 本文件。凡是不注日期 的引用文件，其最新版 本（包括所有 的 修 改 单）适 用 于 本文件。GB 4285 农 药安全使 用标准 GB/T 8321.8-2007 农 药 合 理 使 用准则（八）GB/T 8321.9-2009 农 药 合 理 使 用准则（九）3 术语和定义 下列 术语和定义 适 用 于 本文件。3.1 植原体 phytoplasma 原 称类菌 原体(mycoplasma-like organism,MLO)，为 单 细胞 原 核 生物，无细胞壁，寄 生 在 植物 韧皮 部筛 管 中 和介体昆虫体 内。3.2 枣疯病 Jujube witches broom 是 一 种植原体引起的 维 管 束系统 病 害，以 枝叶 丛 生、花器返祖为 主 要 症状，严重时 可 导致 枣树 死亡。注：识别特征参见附录 A。4 病树的分级 分级标准参见附录 B。5 防治措施 5.1 检疫措施 DB11/T 1186-2015 2 5.1.1 加 强 枣树 苗木、接穗 的 调运 检疫，接穗、砧木、苗木等繁殖材 料 携带 植原体检测和检验方法参见附录 C。5.1.2 发现带 病 接穗、砧木、苗木等 植物 繁殖材 料 应 及时销毁，不 得 引 入 新 枣园 或已 建 立 的 无 病枣园，防 止 枣疯病 扩散蔓延。5.2 建园要求与品种选择 5.2.1 宜在没 有 发 生枣疯病的 地区 建园，在 栽培枣和 酸 枣 发 病 严重 区 建园 时 可 选用 抗 病、耐 病品种，如星 光、黑腰子 枣、唐星、阜星、嘎嘎 枣、尜尜 枣、葫芦 枣、骏 枣、壶瓶 枣、洪 赵 小 枣、月 光 等 品种。慎 用 易 感 病品种，如 梨 枣、冬 枣、泡泡红 枣、金丝 小 枣、赞皇大 枣 等。5.2.2 宜在无 病 区 用 健康 酸 枣种 子 培 育 实 生 苗 和建 优良 品种 采 穗 圃；有 条 件的 应 推广 应 用 脱毒 苗；在 病 区 建 采 穗 圃，应 在 防虫 网室 内。5.3 枣园环境治理 5.3.1 枣园 周边 不 宜 栽植 松、柏、桑 等 植物，不 宜在 枣园 内 间作芝麻、月 季 花等 媒介昆虫的 嗜食 植物。5.3.2 枣树 发 芽 前和生 长 期 间 应 及时 清 除桑、榆 等 其 他 植物和 杂 草。5.3.3 彻底刨除 枣园 周 围 已 经染 病的 酸 枣。5.4 栽培管理措施 因 地 制 宜，合 理施用 有 机肥，增 施 磷钾肥；适 度 修 剪，提 高 树体 通透 性和 光 照 强 度；控制结 果 数量，保 持健康 树 势。5.5 病树清理 5.5.1 对于新 建枣园 或无 病树枣园，发现 病 株，应 及时 清 除。5.5.2 对于 发 病 率较高，且 品种 抗 病性 较低 的枣园，发现 病 株，应 及时 刨除 并 补 栽 抗 病性 强 的品种，古 树 名 木 除外。5.5.3 刨除 病树 后 的树 坑 应 晾晒，待残根风干后再进行补 植。5.6 防治媒介昆虫 主 要媒介昆虫的 形态 特征和 发 生规 律 参见附录 D；可 选用 内 吸 性、触杀 性的 杀 虫 剂；使 用方法按照 GB/T 8321.8、GB/T 8321.9和 GB 4285执行。5.7 疯枝清理 对于 发 病 较轻（级 以 下，含 级）枣树的疯枝、带 病 根 蘖，应 立 即 清 除。疯枝清理的原则 是“疯 小 枝 去 大 枝”，即从 疯枝的 上 一 级 次 枝 条 基 部 去 除，不 留桩。5.8 换头改造 对于 发 病 较 重（级 以 上，含 级）且 有保 存价值 的病树，利 用 星 光、黑腰子等抗 病品种 进行 多 头高 接。高 接时 间 一 般 在 4月 中下 旬 5月 下 旬。高 接部 位 宜 低 不 宜 高，并 及时 清 除 砧木 萌蘖。5.9 输液治疗 对于 发 病 较轻（级 以 下，含 级）枣树和 古 树 名 木等 有保 留价值 的病树，可 进行 树 干 输液（滴 注）治疗。治疗 时 间 为 枣树 展 叶 后 至开 花 前 1周。输液治疗方法参见附录 表 E.1，药 剂 使 用 量 参见附录 表 E.2。DB11/T 1186-2015 3 A A 附 录 A（资料性附录）枣疯病识别特征 A.1 地上 部 分 被 害 植 株 出 现 叶 片变 小，枝叶 丛 生、纤 细、小 叶 黄 化 等。多 出 现在 新 生的枣头 上。花器症状 表 现 为花器 退 化，花 梗明显 延 长，是 正 常 花 梗 的 3 6倍，萼片、花 瓣、雄蕊 发 育 成 小 叶，雌蕊 发 育 成 小 枝。枝叶 症状 表 现为 1年 生 发 育 枝的 主 芽 和 多年 生 发 育 枝 上 的 隐 芽 非正 常 萌 发，一 年多次萌 生出 细小 枝叶，病枝 纤 细，节 间 缩短，形 成“丛状 枝”。果实 症状 表 现为 大 小 不 一，果 面着色 不 匀，凸凹 不平，凸 起 部 位呈 红 色，凹陷 部 位 呈 绿 色，果 肉疏 松，失去 食 用 价值。A.2 地 下部 分 根 部发 病 后，萌 生的 根 蘖也呈稠密 的 丛 枝 状，长 到 30cm左右便停 止 生 长 继而枯 死。病 根 发 病 初 期皮 呈褐色，后 期 形 成点 发 性 溃疡斑，最 终 死亡。DB11/T 1186-2015 4 B B 附 录 B（资料性附录）枣疯病病树分级 枣疯病病树分级见 表 B.1。表 B.1 枣疯病病树分级 表 病级 表 现症状 0 无 疯枝。仅有 1 2 个 小 病枝，其 他 枝 条外 观正 常。病枝 占总 枝 量 的 1/4 以 下，其 他 枝 条外 观正 常。病枝 占总 枝 量 的 1/4 1/2以 下，其 他 枝 条外 观正 常。病枝 占总 枝 量 的 1/2 3/4以 下，但尚 有 枝 条外 观正 常。病枝 占总 枝 量 的 3/4以 上（含），病枝 遍布 全 树，基 本 无 正 常枝 条。DB11/T 1186-2015 5 C C 附 录 C（资料性附录）枣疯病植原体 PCR检 测 和检 验 方 法 C.1 枣树和植原体 总 DNA提取 方 法 C.1.1 CTAB碱裂解法 CTAB碱裂解 法 总 DNA提 取 方法 如 下：a）取 枣树树 皮、叶 柄、叶 脉、根 等 含 韧皮部 组织，用液 氮 研 磨 成 粉末 状。b）称 取 0.1 g于 2 mL离心 管 中,加入 800 mL 65 预热 的 CTAB提 取 液（2%CTAB、100 mM Tris-HCl pH 8.0、1.4 M NaCl、20 mM EDTA、0.2%-巯 基 乙醇），65 水浴 1 h（期 间轻轻 混 匀 几 次）。c）加入等 体 积酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）抽 提，12000 rpm离心 10 min，取上 清液 至 离心 管。d）加入等 体 积氯仿 轻轻 混 匀，12000 rpm离心 10 min，取上 清液 至 离心 管。e）加入等 体 积异丙醇 轻轻 混 匀。f）将混 匀 的液体 转 入 DNA吸 附 柱 CB3（吸 附 柱容积 为 700 mL左右，可 分 次 加入 离心）中，12000 rpm离心 30 sec，弃掉废 液。g）向 吸 附 柱 CB3中 加入 700 mL 70%乙醇，12000 rpm离心 30 sec，弃掉废 液，将 吸 附 柱 CB3放 入 收集 管 中，然 后 重 复洗 脱 步骤。h）吸 附 柱 CB3放 入 收集 管 中，12000 rpm离心 2 min，倒掉废 液。将 吸 附 柱 CB3放 入 1.5 mL离 K心管 并于 室 温 开 盖放置 数 分 钟，以 彻底晾干吸 附 材 料 中 残 余 的 乙醇。i）向 吸 附 膜 的 中 央 部 位 悬空 滴 加 100 mL 1 TE，室 温放置 2 min 5 min，12000 rpm离心 2 min，将溶 液 收集 到 离心 管 中，-20 保 存 备 用。C.1.2 试剂盒法 可 直 接 用 商 品 化 植物 基 因 组 DNA快 速 提 取 试 剂 盒 提 取。C.2 枣疯植原体的 PCR检 测验证 C.2.1 引物 以 植原体 16S rRNA基 因 保 守序 列 设计 引物 对 R16mF2/R2（R16mF2:5-CATGCAAGTCGAACGGA-3，R16mR2:5-CTTAACCCCAATCATCGA-3）和 R16F2/R2（R16F2:5-ACGACTGCTAAGACTGG-3,R1:5-TGACGGGCGGTGACAAACCCC G-3）进行 直 接 PCR或 Nested-PCR。a）直 接 PCR反 应 体 系(50 mL)：1 mL5 mL模板 DNA，1 mL 10 mM dNTP，5 mL10 PCR buffer，1 mL4 mL 引物(R16mF2/R16mR2)，加 0.5 uL Taq酶，加 蒸馏水 至 50 uL。扩 增条 件：94 变 性 5 min；94，45 s;52，30 s;72,90 s；扩 增 30个 35个 循 环，然 后 72，10 min。b）Nested-PCR：取 直 接 PCR产 物 稀释 40倍 后 取 1 uL作 DNA模板，引物 为 R16F2/R2，其 它 条 件 同直接 PCR。C.2.2 扩 增 产 物用 1%琼脂糖凝胶电泳，然 后 于 紫 外 灯 下 检 查 1.2 kb（Nested-PCR）和 1.4 kb（直 接 PCR）的特 异 扩 增 片 段 的 有 无。DB11/T 1186-2015 6 C.2.3 必 要 时 回收 PCR扩 增 产 物，进行 片 段克隆 和测 序，进行 BLAST比 对 或系统 进 化 分 析，鉴 定 确认 病 原。DB11/T 1186-2015 7 D D 附 录 D（资料性附录）常见传 病 叶蝉 的 生物学 特性 常见传病叶蝉的生物学特性见 表 D.1。表 D.1 常见传 病 叶蝉 的 生物学 特性 生物 学特 性 凹 缘 菱纹 叶蝉 Hishimonus sellatus（Uhler）,1896片 突菱纹 叶蝉 Hishimonus lamellatus Cai et Kuoh，1995 中 华拟菱纹 叶蝉 Hishimonoides chinensis Anufriev,1970 红 闪 小 叶蝉 Typhlocyba sp.形态 特征 属半翅目 Hemiptera，叶蝉 科 Cicadellidae。成 虫体 长 2.8 mm3.4mm，至 翅端 长 3.7mm 4.6mm。体 黄 绿 色，头 部 前方 突 出，具 黄色 光 泽，头 顶 有 数 对不 甚 明显 的 淡 黄褐色 小 斑 纹，复 眼暗 绿 色，单 眼 黄色，前 翅灰 白 色，半 透 明，两翅 合 拢 时 呈 菱纹 斑。虫体的 腹 面黄色 或 淡 黄 绿 色，足淡 黄 色，腹 部 背 面 中 央 黑 褐色。若 虫 共 5龄，体 长 3.9mm 4.3mm，头冠 黄 绿 色，疏 生 褐色 小 斑点。复 眼暗 绿 色，单 眼 黄色，胸背 面 浓 褐色，被 黄点。属半翅目 Hemiptera，叶蝉 科 Cicadellidae。成 虫体 长 2.75mm 3.1mm,至翅端 长 3.7mm4.0mm。成 虫 身 体 呈 污 黄 微 褐色，腹 部 背 面 黑 褐色，侧 缘 区 红 黄色，前 翅污白。整 个 虫体 有 黄褐至 暗 褐色斑 纹，其 中 在 头 冠 中 域偏 前的 横槽 区 内 有 斑点 1对，斑点 前方 近 中 央 各 有 1小 斑点。若 虫，脱 皮 4次,共五 龄。雌 性 为 黄褐色,雄 性 为黑 褐色。属半翅目 Hemiptera，叶蝉 科 Cicadellidae。成 虫体 长 3.3 mm 3.8mm，头 部 淡黄色，头 顶 前 缘 具暗 褐色 斑 纹 1对。复 眼暗 红 色。小 盾 板 淡 黄色，具橙 褐色 斑点。若 虫 共 5龄，淡 黄色，体 背 黄褐色，有光 泽，头 部 和 胸 部 背 面 具 不 规则 褐 纹。属半翅目 Hemiptera，叶蝉 科 Cicadellidae。成 虫体 狭 长 美 观，雌 虫体 长 1.66 mm 66mm，雄 虫体 长 2.25 mm 2.38mm，复 眼污白 色，越 冬态 复 眼 为黑 褐色。成 虫 羽 化 初 时 有 两 种 颜 色，污白 色 或 微 黄色，两天 后 变黄 白 色。成 虫 静 止时 从 头的 前 缘 至 后 缘 沿 着 头 缝 的 两侧 各 有 1条红 色 纵纹，头 缝处 有 断续 黄 白 色 条 纹，下 接 前 胸背 板 红 色斑，近 前 缘 斑 纹 中 间 有 微 黄 白 色 不 很 明显 的“小”字 形红 色斑 纹 1个。羽 化 初 期 为 浅 黄色，两天 后 由 微 红 变 红 色（第 一 代 有少 部 分 斑 纹 为 黄 色，越 冬态 斑 纹更 明显）。发 生 规 律 北京 一 年 发 生 5代，以 越 冬 卵 在 枣园 中 及 周边 的 桑 树 表 皮 下 越 冬，也 可 在 月 季、蔷薇 枝 条 上 越 冬。凹 缘 菱纹 叶 蝉 在 不 同 寄 主 上 的分 布 随 季 节 发 生 变 化。第 一 代 在 5月 初 由 桑 树、月 季 上 的 越 冬 卵孵 化，幼 虫 在 桑 树、月 季 上 生 长，5 月 中下 旬 羽 化 交配 后，成 虫 部 分 迁飞 至 枣树 上 产 卵，其 后 在 枣树 上 约 1月发 生 1代。9月 10月 份 发生的 第 4 5代世代 重 叠，进 入发 生 高峰期，9 月 份 部 分 回 迁 到 桑 树 上 产 卵 越 冬。一 年 发 生 4 5代。越 冬 成 虫 于 5月 上旬 迁 回 至 枣 产 卵，6 9月 初 在 枣园 中 出 现 3个 成 虫 高 峰，随 后 虫 口 密 度 下 降。北京 一 年 发 生 3代，以 卵 越 冬，卵 多 产 在 枣树、酸 枣 或 其 他 寄 主 的 一、二 年 生枝 条 上，卵 期 约 232d。枣树 萌 芽 期 开 始孵 化，2d 3d即 达 到 盛 期，第 一 代若 虫 期（5月 上 中 旬）和成 虫 期（5 月 下 旬 6月 中 旬）集 中 而 整齐。6月 中 旬 自第二代 成 虫 开 始 与 第 一 代 成 虫 后 期 部 分 交替，以 后数 代交错更 加严重。一 年 发 生 2代，以 成 虫 在 枣树 下 及 枣 林 附 近 杂 草 丛 中 越 冬，翌 年 5月 初 枣 芽 萌 发 后 上 树 产 卵、取 食。5月 下 旬 6月 上 中 旬 为 产 卵盛 期，5月 下 旬 7月为 若 虫 发 生 期，8月 上 中 旬 为 第 1代 成 虫 产 卵盛 期，8月 中下 旬 9月 上 中 旬 为 若 虫 发 生 盛 期，8月 下 旬 第 2代 成 虫 开 始羽 化并 准 备 越 冬。DB11/T 1186-2015 8 附 录 E（资料性附录）输液治疗防治枣疯病方 法 输液治疗防治枣疯病方法见 表 E.1，表 E.2。表 E.1 输液治疗防治枣疯病方 法 使 用 工具 手摇钻 或 电 钻（钻 头 孔径 0.4cm）、输液 器、袋 子、管 子、针 头。药 剂 选择 四 环 素 类 农 用 抗 生 素 使 用 条 件 树 干 直 径 超过 5cm的病树。使 用 时 间 在 枣树 展 叶 后 至开 花 前 至 少 1周，北京地区 通 常 在 5月 份。使 用 方 法 配 药 按照 药 剂 使 用 说 明，用 适 量 的 干 净 清 水溶 解 药 剂后，用 4 6层纱 布 或 多 层卫 生 纸过滤，以 减 少 沉淀 和 杂 质，有 利 于 加 快 树体 吸 收；治疗 药 液要 随 用 随配，配 制 好 的 药 液要 在 24h内 用 完。根 据 树 干 粗 度和病 情 严重 程 度，确 定输液 数量，参见附录 B枣疯病病 情 分级标准和附 表 D.2枣疯病树 干 滴 注 治疗用 药 量 查 算 表。打 孔 打 孔 的 位 置 一 般 在 病树树 干 上 离 地 面 20cm 30cm处，用 手摇钻 或 电 钻 在 树 干 上 钻孔径 0.45cm、深 达木 质 部 2cm 3cm的 注 药 孔；打 孔 时 钻 体 必 须 保 持 稳 定，使 孔径 均 匀；钻 注 药 孔 时，钻 头与树 干 的 夹 角 最 好 在 45左右；注 药 孔 位 置 尽 可 能 与树 上 的疯枝 相 对应；要 避免 在死亡 的 木 质 部 打 孔，同 时 注 药 孔 附 近 不 能 有 树 洞 和 裂 缝，避免 造 成 漏 液。输液 输液 瓶（袋）应 尽 量 挂 高，宜为 1.2m以 上，以加 大 压差，加 快 药 液 流 量。为 保 证 液 流 通 畅，要 排净 输液管 道 中 的 气 体。然 后 将 针 头 斜 向 下 插 入，旋紧，避免漏 液。插 入 针 头 后，打 开 输液 器 开 关，检 查 输液 瓶（袋）是 否 滴 液、针 头 处 是 否漏 液。不 滴 液 可 能 是 排气 不 畅 或 针 头 堵塞 造 成 的，漏 液 可 能 是 针 头 插 得 不 紧 不 严，而 漏 液 太 快可 能 是注 药 孔 打 在 了 坏 死或 有 裂 缝 的 部 位，应 及时 纠 正。不 漏 液 且 能 正 常 滴 液 后，放 到 最 大 输液 速 度 处 输液，一 般 24h左右 输 完。使 用 注 意事项 在 输液前，轻 病树 可 按前 述 手 术治疗方法 去 除 疯枝，一 定 不 能 留桩，否 则 药 液 达 不 到桩上 影响 输液的 治疗 效 果。也 可 以 先 输液，后 去 除 疯枝，有 利 于 药 液 到 达 全 树。DB11/T 1186-2015 9 表 E.2 枣疯病树 干 输液治疗用 药 量 查算表 干 径（cm）干周（cm）不 同 病级病树参考用 药 量（500mL：瓶）1级 2级 3级 4级 5级 5 15.7 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 6 18.84 0.5 0.5 0.5 0.5 1 7 21.98 0.5 0.5 1 1 1 8 25.12 1 1 1 1 1 9 28.26 1 1 1 1 1 10 31.4 1 1 1 1.5 1.5 11 34.54 1 1.5 1.5 1.5 1.5 12 37.68 1.5 1.5 1.5 1.5 2 13 40.82 1.5 1.5 2 2 2 14 43.96 2 2 2 2 2.5 15 47.1 2 2 2.5 2.5 2.5 16 50.24 2.5 2.5 2.5 2.5 3 17 53.38 2.5 2.5 3 3 3 18 56.52 3 3 3 3 3.5 19 59.66 3 3 3.5 3.5 3.5 20 62.8 3.5 3.5 3.5 4 4 21 65.94 3.5 4 4 4 4.5 22 69.08 4 4 4.5 4.5 5 23 72.22 4.5 4.5 5 5 5 24 75.36 5 5 5 5.5 5.5 25 78.5 5 5.5 5.5 6 6 26 81.64 5.5 6 6 6 6.5 27 84.78 6 6 6.5 6.5 7 28 87.92 6.5 6.5 7 7.5 8 29 91.06 7 7.5 8 8 8.5 30 94.2 8 8 8.5 8.5 9 E DB11/T 1186-2015 10 参 考 文 献 1 刘 孟军，赵 锦，周 俊 义.枣疯病病 情 分级体 系 研究 J.河 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