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ICS 65.020 B62 DB36 江西省地方标准 DB 36/T 5572016 代替 DB36/T 557-2009金边瑞香脱毒快繁技术规程 The technical regulation for Virus Removal and Rapid Propagation of Daphne odora var.maginata 2016-09-28发布 2016-12-01实施江西省质量技术监督局 发布 DB36/T 5572016 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 脱毒试管苗无性系的建立.1 3 试管苗移植.2 4 上钵.2 DB36/T 5572016 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省林业厅提出并归口。本标准起草单位：江西省科学院生物资源研究所、江西省大余县花卉生产办公室、江西省林业科技推广总站。本标准主要起草人：江洪如、金晓鹏、朱祺、李新、彭军、钟东洋、余发新、毛新琳、吕新、王碧琴、刘腾云、高柱。本标准与DT36/T5572009版相比，修订如下：将“3.1 培养基配置”条款中 3.1.2至 3.1.5 步骤合并调整为 3.1.2，“琼脂条”修改为“卡那胶”,3.1.6、3.1.7 顺序分别调整为 3.1.3、3.1.4；将“3.3.1 接种”条款中“取出试管苗，切下顶芽以及带有 23 个节的下部茎段，然后”内容删除；将“4.1 炼苗”条款中“20左右的温水”修改为“自来水”；将“5.1 基质”条款中“将红壤土：砻糠灰：河沙：珍珠岩按 3：1.5：0.5：0.5 配比，加入800 倍液多菌灵消毒，装入 1416cm的营养钵中，再将苗高 6cm 左右小苗栽入钵内，轻浇水。”调整为“用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入 14cm16 cm 的营养钵中，再将苗高 6 cm左右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。”；将“5.2 施肥”条款中“每万盆每次施 1.5 kg”修改为“每万盆根据苗的大小每次施 10kg50kg”；将“6 苗木分级”修改为“6 苗木分类”。DB36/T 5572016 1 金边瑞香脱毒快繁技术规程 1 范围 本标准规定了金边瑞香茎尖诱导培养、脱毒组培苗无性系的建立、脱毒试管苗的移栽、脱毒盆苗培养及苗的分级、包装、检疫等。本标准适用于江西省金边瑞香脱毒快繁。2 脱毒试管苗无性系的建立 2.1 培养基的配置 2.1.1 配置 MS 基本培养基。2.1.2 每升溶液中加入 5g6 g卡那胶，再加入所需激素种类和浓度，与基本培养基混合搅匀，pH 值调为5.75.8。2.1.3 装瓶，瓶的大小 220 ml左右，每瓶装培养基 35.5 ml。2.1.4 封好瓶口后，放进灭菌锅内进行高压灭菌；灭菌的压力为 0.09 MPa，时间为 25 min。2.2 脱毒 2.2.1 外植体处理 选择生长健壮的金边瑞香枝条作为脱毒组培苗的外植体。将嫩芽在自来水下洗净，用0.1%升汞溶液浸泡12 min，无菌水冲洗4次5次，无菌滤纸吸干水分，切下顶芽，然后在超净台中双筒显微镜下剥离0.2mm0.3 mm的茎尖，接种到预先准备好的诱导培养基中，每瓶接种5个。茎尖诱导培养需50 d70 d。2.2.2 茎尖的诱导培养及脱毒检测 由单个茎尖诱导获得的单芽分别转入MS+6-BA 0.5-1 mg/L+NAA0.1 mg/L的培养基中培养，待长成2cm3 cm高的试管苗，将茎苗再切成带有一个节的基段，继续在原培养基上培养，然后将来自不同茎尖生长点的试管苗若干株进行脱毒检测，脱去5种病毒的苗可作为脱毒苗进行快速繁殖。2.3 试管苗的无性系培养 2.3.1.1 接种 在超净工作台上，按芽和茎段分别接入转代增殖培养基中，每瓶放8个材料；苗直径大于1.0 mm以上的试管苗，切下1.5cm2.0cm高的苗则接入生根培养基中，每瓶6个。2.3.2 培养时间 增殖培养每代50 d；生根培养30 d。2.3.3 培养温度 增殖培养为2426；生根培养2224。DB36/T 5572016 2 3 试管苗移植 3.1 炼苗 把要移植的生根瓶苗从培养间取出，放在室温处，打开瓶盖炼苗1 d，用自来水将根上的琼脂轻轻洗净，切勿伤根，洗好后即可移植。3.2 基质及配比 珍珠岩：泥炭=2：1，将珍珠岩、泥炭及50%的多菌灵1500倍液按比例均匀混合，然后装入6cm8cm的容器中待用。将刚洗好的生根苗移入，栽后轻浇水，使基质湿润。3.3 置放 移植苗应置放在有防虫网的棚内；或具备500 m以上隔离条件（即500 m内没有种植传统繁殖的金边瑞香）的棚内。3.4 小苗管理 3.4.1 温度 小苗在棚内一般可正常管理。当棚内温度低于5时，则刚移栽的小苗须加小拱棚保温15 d；若棚内温度高于30，则应覆盖遮阳网并喷雾降温。3.4.2 水分 移栽苗注意保湿，但水分不能过量。3.4.3 养分 移栽苗在30 d后，有新根生长，可喷洒0.2%磷酸二氢钾一次，隔15 d再喷洒一次。4 上钵 4.1 基质 用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入14cm16 cm的营养钵中，再将苗高6 cm左右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。4.2 施肥 栽苗20d30 d后可喷0.2%磷酸二氢钾一次，以后每月施以20倍水稀释过的腐熟枯饼水溶液，每年抽枝前施复合肥1次2次，每万盆根据苗的大小每次施10 kg50 kg。4.3 打顶定干 当小苗长至10cm高时，即可打顶定干，生长一年的小苗可长成具2个4个侧枝、高20cm的植株。4.4 苗木分类 原种苗：长根30 d的试管苗；移栽成活苗：苗高6 cm的移栽苗。4.5 检疫 DB36/T 5572016 3 外调苗木应按国务院发布的植物检疫条例和农业部、原林业部的植物检疫条例实施细则以及中华人民共和国进出境动植物检疫条例实施细则严格检查把关。_
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