香菇菌种生产技术规程DB36／T 1869-2023.pdf

I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 3 0DB36江 西 省 地 方 标 准D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 3香 菇 菌 种 生 产 技 术 规 程T e c h n i c a l r e g u l a t i o n f o r s p a w n p r o d u c t i o n o f L e n t i n u l a e d o d e s2 0 2 3-1 1-0 8 发 布 2 0 2 4-0 5-0 1 实 施江 西 省 市 场 监 督 管 理 局发 布D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 3I目 次前 言.I I1 范 围.12 规 范 性 引 用 文 件.13 术 语 和 定 义.14 菌 种 生 产 要 求.25 母 种 生 产.36 原 种、栽 培 种 生 产.57 贮 存 与 菌 种 生 产 档 案.9D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 3I I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 江 西 省 农 业 农 村 厅 提 出 并 归 口。本 文 件 起 草 单 位：江 西 省 农 业 科 学 院 农 业 应 用 微 生 物 研 究 所。本 文 件 主 要 起 草 人：王 赟 萍、张 诚、马 吉 平、钟 国 祥、王 素 贞、肖 银 润、熊 小 文，李 伟 红。D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 31香 菇 菌 种 生 产 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 香 菇（L e n t i n u l a e d o d e s）菌 种 的 术 语 和 定 义、菌 种 生 产 要 求、母 种 生 产、原 种 与 栽培 种 生 产、贮 存 与 菌 种 生 产 档 案 等 内 容。本 文 件 适 用 于 江 西 省 区 域 香 菇 母 种、原 种 和 栽 培 种 菌 种 生 产 要 求。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的。凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件，仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。G B 9 6 8 8 食 品 包 装 用 聚 丙 烯 成 型 品 卫 生 标 准G B 1 9 1 7 0 香 菇 菌 种G H/T 1 0 1 3 香 菇N Y/T 5 2 8 食 用 菌 菌 种 生 产 技 术 规 程N Y/T 1 2 8 4 食 用 菌 菌 种 中 杂 菌 及 害 虫 的 检 验N Y/T 1 7 3 1 食 用 菌 菌 种 良 好 作 业 规 范N Y/T 1 7 4 2 食 用 菌 菌 种 通 用 技 术 要 求N Y/T 1 9 3 5 食 用 菌 栽 培 基 质 质 量 安 全 要 求3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1香 菇 L e n t i n u l a e d o d e s香 菇 又 名 香 孽、香 信、香 苑、冬 菇、椎 茸(日 本)。属 担 子 菌 门（B a s i d i o m y c o t a）、伞 菌 亚 门（A g a r i c o m y c o t i n a）、伞 菌 纲（A g a r i c o m y c e t e s）、伞 菌 目（A g a n i c a l e s）、光 茸 菌 科(O m p h a l o t a c e a e)、小 香 菇 属（L e n t i n u l a）的 一 类 木 腐 菌，子 实 体 肉 质 或 近 肉 质。来 源：G H/T 1 0 1 3-2 0 1 5，3.1，有 改 动 3.2菌 种 s p a w n通 过 生 产 试 验 具 有 特 异 性、均 一 性 和 稳 定 性，且 丰 产 性 好、抗 逆 性 强，生 长 在 适 宜 基 质 上 的 培 养 物，包 括 母 种、原 种 和 栽 培 种。3.3母 种 s t o c k c u l t u r eD B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 32经 分 离、杂 交、诱 变 等 各 种 方 法 选 育 得 到 的 具 有 结 实 性 的 香 菇 菌 丝 体 纯 培 养 物 及 其 继 代 培 养 物，以玻 璃 试 管 为 培 养 容 器 和 使 用 单 位，也 称 为 一 级 种、试 管 种。来 源：G B 1 9 1 7 0-2 0 0 3，3.1，有 改 动 3.4原 种 m o t h e r s p a w n由 母 种 移 植、扩 大 培 养 而 成 的 菌 丝 体 纯 培 养 物。常 以 玻 璃 菌 种 瓶 或 塑 料 菌 种 瓶 或（1 2 1 7）c m（2 2 2 8）c m（0.0 0 4 0.0 0 5）c m 聚 丙 烯 塑 料 袋 为 容 器，也 称 为 二 级 种。3.5栽 培 种 p l a n t i n g s p a w n由 原 种 移 植、扩 大 培 养 而 成 的 菌 丝 体 纯 培 养 物。常 以 菌 种 瓶（玻 璃 瓶 或 塑 料 瓶）或（1 5 1 7）c m（3 3 3 5）c m（0.0 0 4 0.0 0 5）c m 聚 丙 烯 塑 料 袋 为 容 器。栽 培 种 只 能 用 于 栽 培，不 可 再 次 扩 大 繁 殖 菌种，也 称 为 三 级 种。3.6固 体 菌 种 s o l i d s p a w n以 富 含 木 质 素、纤 维 素 和 淀 粉 等 天 然 有 机 物 为 主 要 原 料，添 加 适 量 的 有 机 氮 源 和 无 机 盐 类，具 一 定水 分 含 量 的 固 体 培 养 基 培 养 的 纯 菌 丝 体。3.7液 体 菌 种 l i q u i d s p a w n指 采 用 与 母 种 营 养 成 份 相 似 但 不 添 加 琼 脂 的 液 体 培 养 基 培 养 而 得 到 的 纯 菌 丝 体，菌 丝 体 在 培 养 基 中呈 絮 状 或 球 状，液 体 菌 种 可 以 作 为 原 种 或 栽 培 种 使 用。4 菌 种 生 产 要 求4.1 人 员 要 求香 菇 菌 种 生 产 所 需 要 的 技 术 人 员 和 检 验 人 员 应 经 过 专 业 培 训、掌 握 香 菇 基 础 知 识 及 香 菇 菌 种 生 产 技术 规 程 要 求。4.2 场 所 和 厂 房 要 求香 菇 菌 种 生 产 应 选 择 地 势 高、通 风 良 好、空 气 清 新、水 源 近、排 水 通 畅 和 交 通 便 利 的 场 所。周 边 无污 染 源。香 菇 菌 种 生 产 厂 房 要 求 有 各 自 隔 离 的 摊 晒 场、原 材 料 库 和 配 料 分 装 库。配 套 有 配 料 室、搅 拌 室、装袋（瓶）室、灭 菌 室、冷 却 室、接 种 室、培 养 室（通 风 好，有 纱 窗）、菌 种 检 测 室 及 菌 种 冷 藏 库 等 各 环节 的 设 施。冷 却 室、接 种 室 和 培 养 室 都 应 要 有 净 化 设 施 和 无 菌 设 施。4.3 生 产 设 备 要 求D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 33香 菇 菌 种 生 产 需 要 电 子 秤、搅 拌 机、装 袋（瓶）机、高 压 灭 菌 锅 或 常 压 灭 菌 锅、臭 氧 离 子 发 生 器、超 净 工 作 台 或 接 种 箱、恒 温 培 养 箱、培 养 架、摇 床、菌 种 发 酵 罐、冰 箱、空 调、显 微 镜 等 设 备。5 母 种 生 产5.1 生 产 流 程培 养 基 配 制 分 装 试 管 灭 菌 冷 却 无 菌 检 验 接 种 培 养 检 验 母 种。5.2 容 器试 管 一 般 选 用 1 8 m m 1 8 0 m m 或 者 2 0 m m 2 0 0 m m。5.3 培 养 基培 养 基 配 方 如 下：配 方 一：P D A 培 养 基（马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基）：马 铃 薯 2 0 0 g，葡 萄 糖 2 0 g，琼 脂 2 0 g，加 水 至1 0 0 0 m L。如 果 配 方 中 的 葡 萄 糖 替 换 成 蔗 糖，称 为 P S A 培 养 基。配 方 二：C P D A 培 养 基(综 合 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基)：马 铃 薯 2 0 0 g，葡 萄 糖 2 0 g，磷 酸 二 氢 钾 2 g，硫 酸 镁 0.5 g，琼 脂 2 0 g，加 水 至 1 0 0 0 m L。5.4 分 装分 装 培 养 基 至 试 管 1/4 1/3 处，用 棉 塞 或 硅 胶 塞 封 闭 试 管 口，每 5 支 试 管 为 1 捆，牛 皮 纸 或 报 纸 包 棉塞，棉 线 扎 紧，棉 塞 向 上 放 置。棉 塞 应 采 用 梳 棉，不 能 使 用 脱 脂 棉。5.5 灭 菌放 入 高 压 灭 菌 锅 灭 菌，在 1 2 1 1 2 4（0.1 1 M P a 0.1 2 M P a）下 灭 菌 2 5 m i n。5.6 冷 却灭 菌 后 温 度 降 到 5 5 6 5 时，在 空 气 清 洁 的 室 内 摆 斜 面，要 求 斜 面 长 度 不 超 过 试 管 长 度 的 2/3。5.7 无 菌 检 验抽 取 3%5%冷 却 的 试 管，在 2 8 下 培 养 4 8 h，无 微 生 物 长 出 为 灭 菌 合 格。5.8 母 种 制 备5.8.1 超 净 工 作 台 消 毒先 用 7 5%酒 精 棉 球 将 超 净 工 作 台 以 及 接 种 工 具 表 面 擦 拭 消 毒，再 打 开 紫 外 灯 照 射 3 0 m i n。5.8.2 香 菇 菌 种 分 离挑 选 生 长 长 势 良 好、形 状 规 则、未 开 伞、无 虫 蛀 的 香 菇 子 实 体 作 为 种 菇，用 7 5%的 酒 精 棉 球 对 种 菇表 面 擦 洗 消 毒，并 用 无 菌 滤 纸 充 分 吸 干 后 放 置 在 洁 净 的 培 养 皿 中。用 双 手 将 菇 体 掰 开，用 无 菌 接 种 刀，在 菌 盖 与 菌 柄 交 界 处 切 取 1 0 m m 5 m m“目”字 形 组 织 小 块 为 接 种 材 料。用 接 种 针 挑 取 一 小 块 组 织 片，迅 速 地 接 入 试 管 斜 面 培 养 基 的 中 央，然 后 将 试 管 口 和 棉 塞 在 酒 精 灯 火 焰 上 过 火 灭 菌 后 塞 好，将 接 种 后 的试 管 放 入 2 5 的 恒 温 箱 内 培 养，2 d 3 d 后 组 织 块 及 周 围 便 长 出 白 色 的 菌 丝，待 菌 丝 长 满 试 管 斜 面 即 可。D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 345.8.3 转 管 培 养选 取 斜 面 上 菌 丝 茁 壮、长 势 优 良 的 试 管，用 接 种 工 具 挑 取（3 5）m m(3 5)m m 的 菌 块，按 无 菌操 作 要 求，转 接 到 新 的 试 管 培 养 基 中，置 于 2 5 的 培 养 箱 中 培 养 1 5 d 2 0 d，当 菌 丝 长 满 培 养 基 表 面，即 成 母 种，可 用 于 生 产 原 种。5.8.4 菌 种 检 查接 种 4 8 h 后 应 做 首 次 检 查，挑 拣 出 未 萌 发 或 污 染 母 种。母 种 菌 落 长 至 直 径 2 c m 左 右 时，进 行 第 二 次检 查，待 菌 丝 长 满 培 养 基 前 再 检 查 一 次，剔 除 或 丢 弃 污 染、生 长 不 良 的 菌 种。5.8.5 母 种 检 查 要 求母 种 形 态 要 求 见 表 1。表 1 香 菇 母 种 形 态 要 求项目 要求 检验方法容器 完整、无破损、无裂纹、洁净 肉眼观察棉塞或硅胶塞 干燥、整洁、松紧适度 肉眼观察菌丝生长量 长满培养基 肉眼观察菌丝体特征 洁白、平整、无角变 肉眼观察菌落边缘 整齐 肉眼观察菌丝体分泌物 无 肉眼观察杂菌菌落 无 肉眼观察，必要时使用 5 放大镜观察斜面背面外观 培养基不干缩，颜色均匀，无暗斑、无色素 肉眼观察6 原 种 与 栽 培 种 生 产6.1 生 产 技 术 流 程培 养 基 配 制 装 袋（瓶）灭 菌 冷 却 接 种 培 养 检 查 原 种（栽 培 种）。6.2 固 体 菌 种 生 产6.2.1 培 养 基 配 方培 养 基 配 方 如 下：a）配 方 一：杂 木 屑 7 8%、麦 麸 2 0%、石 膏 粉 1%、白 糖 或 红 糖 1%；b）配 方 二：杂 木 屑 7 8%、麦 麸 1 8%、玉 米 粉 2%、石 膏 1%、白 糖 或 红 糖 1%；c）配 方 三：杂 木 屑 7 9%、麦 麸 2 0%、石 膏 1%；d）配 方 四：杂 木 屑 6 3%、棉 籽 壳 1 5%、麦 麸 2 0%、石 膏 1%、白 糖 或 红 糖 1%；D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 35e）配 方 五：杂 木 屑 6 3%、玉 米 芯 粉 1 5%、麦 麸 2 0%、白 糖 或 红 糖 1%、石 膏 1%。所 有 原 料 应 符 合 N Y/T 1 9 3 5 规 定。6.2.2 拌 料按 照 培 养 料 配 方 准 确 称 取 生 产 所 需 各 种 原 材 料。将 原 料 加 水 混 合 后 充 分 拌 匀。培 养 料 含 水 量 控 制 在6 0%6 5%。6.2.3 容 器原 种 采 用 8 5 0 m L 以 下、瓶 口 直 径 4 c m、耐 1 2 6 高 温 的 透 明 玻 璃 瓶，或 采 用（1 2 1 7）c m（2 2 2 8）c m（0.0 0 4 0.0 0 5）c m 的 聚 丙 烯 塑 料 袋。栽 培 种 采 用 同 原 种 要 求 的 玻 璃 瓶 子，或（1 5 1 7）c m（3 3 3 5）c m（0.0 0 4 0.0 0 5）c m 的 聚 丙烯 塑 料 袋。以 上 聚 丙 烯 塑 料 袋 均 要 求 符 合 G B 9 6 8 8 要 求。6.2.4 装 袋（瓶）采 用 装 袋（瓶）机 或 人 工 进 行 装 袋（瓶），人 工 装 袋（瓶）需 用 打 孔 器 在 袋 口 处 打 孔，孔 直 径 1 c m 1.5 c m，深 度 为 8 c m 1 2 c m，每 袋（瓶）装 培 养 基 5 0 0 g 6 0 0 g。6.2.5 灭 菌培 养 基 质 装 袋（瓶）后 4 h 内 进 行 灭 菌。高 压 灭 菌：培 养 基 在 1 2 1 1 2 4（0.1 1 M P a 0.1 4 M P a）下 灭 菌 2 h。常 压 灭 菌：在 3 h 之 内 使 灭 菌 温 度 达 到 1 0 0，保 持 1 0 0 1 0 h 1 2 h。6.2.6 冷 却灭 菌 完 成 后 取 出，置 于 净 化 冷 却 区 域 冷 却 至 室 温。6.2.7 接 种6.2.7.1 接 种 前 准 备先 用 7 5%酒 精 棉 球 将 接 种 袋（瓶）以 及 接 种 工 具 表 面 擦 拭 消 毒，放 入 接 种 箱 或 接 种 室 内，再 对 接 种箱 或 接 种 室 进 行 消 毒。6.2.7.2 接 种 操 作6.2.7.2.1 原 种接 种 前 一 天 备 好 母 种，严 格 按 照 无 菌 操 作 要 求，将 接 种 工 具 在 酒 精 灯 火 焰 上 方 灼 烧 灭 菌，冷 却 后 挑取 2 c m2左 右 的 菌 块 到 菌 袋(瓶)中，每 支 母 种 接 原 种 6 8 袋(瓶)。6.2.7.2.2 栽 培 种接 种 前 一 天 备 好 原 种，严 格 按 照 无 菌 操 作 要 求，将 接 种 工 具 在 酒 精 灯 火 焰 上 方 灼 烧 灭 菌，冷 却 后 挑取 5 g 6 g 块 状 原 种 到 菌 袋(瓶)中，每 袋(瓶)原 种 接 栽 培 种 6 0 1 0 0 袋(瓶)。6.2.8 培 养温 度 控 制 在 2 2 2 6，空 气 湿 度 在 6 0%7 5%，通 风 避 光 培 养。D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 366.2.9 质 量 检 查原 种 及 栽 培 种 在 培 养 期 间，按 照 N Y/T 1 2 8 4 要 求 进 行 检 查。6.2.1 0 原 种 和 栽 培 种 形 态 要 求原 种 和 栽 培 种 形 态 要 求 见 表 2。表 2 香 菇 原 种、栽 培 种 形 态 要 求项目 要求 检验方法容器 完整、无破损、无裂纹 肉眼观察棉塞或无棉盖体 干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和滤菌要求 肉眼观察培养基上表面距袋（瓶）口的距离5 0 m m 5 m m 肉眼观察菌丝生长量 长满培养基 肉眼观察菌丝体特征 菌丝体洁白、浓密、粗壮，生长均匀，无高温抑制线 肉眼观察菌落边缘 紧贴瓶（袋）壁、无干缩 肉眼观察菌丝分泌物 允许少量无色至棕黄色水珠 肉眼观察杂菌菌落 无肉眼观察，必要时使用 5 放大镜观察子实体原基 无 肉眼观察6.3 液 体 菌 种 生 产6.3.1 摇 瓶 液 体 菌 种 生 产6.3.1.1 培 养 基 配 方培 养 基 配 方 如 下：1）配 方 一：葡 萄 糖 2 0 g，蛋 白 胨 5 g，酵 母 膏 3 g，磷 酸 二 氢 钾 3 g，硫 酸 镁 1.5 g，维 生 素 B 1 5 m g，加 水 至 1 0 0 0 m L，p H 6.0 6.5；2）配 方 二：玉 米 粉 2 0 g，葡 萄 糖 2 0 g，酵 母 膏 5 g，牛 肉 膏 4 g，磷 酸 二 氢 钾 2 g，硫 酸 镁 1 g，维生 素 B 1 5 m g，加 水 至 1 0 0 0 m L，p H 6.0 6.5。玉 米 粉 应 过 2 0 目 筛。6.3.1.2 培 养 基 配 制按 液 体 培 养 基 配 方 配 制，玉 米 粉 先 用 水 搅 拌 均 匀，装 入 三 角 瓶 中，混 合 均 匀，装 液 量 为 摇 瓶 容 量 的2/5 3/5，封 口 膜（耐 高 温 组 培 封 口 膜）或 棉 塞 封 口，棉 塞 需 用 硫 酸 纸 或 牛 皮 纸 包 扎。6.3.1.3 灭 菌D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 37将 分 装 好 的 摇 瓶 放 入 灭 菌 锅 内，锅 内 留 有 一 定 的 空 隙。灭 菌 蒸 汽 压 力 升 至 0.1 M P a 0.1 2 M P a，恒压 维 持 3 5 m i n 4 0 m i n。6.3.1.4 接 种 与 培 养待 培 养 基 冷 却 后 置 于 消 毒 过 的 超 净 工 作 台 上，用 经 火 焰 消 毒 并 冷 却 后 的 接 种 针 挑 取 5 6 块（3 5）m m（3 5）m m 的 母 种 块 迅 速 转 接 于 待 接 种 摇 瓶 培 养 基 内。将 接 种 后 的 三 角 瓶 置 于 摇 床 上 振 荡 培 养，转 速 为 1 6 0 r p m，2 3 2 5 下 培 养 7 d。摇 瓶 培 养 期 间 应 定 期 检 查，及 时 剔 除 污 染 杂 菌 的 三 角 瓶。6.3.2 发 酵 罐 液 体 菌 种 生 产6.3.2.1 煮 罐、空 消发 酵 罐 初 次 使 用、出 现 杂 菌、长 期 放 置、更 换 品 种 等 情 况 出 现 其 一 时，应 煮 罐 和 空 消。蒸 气 压 力 0.1 5M P a、温 度 1 2 6，维 持 4 0 m i n。6.3.2.2 液 体 菌 种 培 养 基 配 方培 养 基 配 方 如 下：a）配 方 1：玉 米 粉 2 0 g，葡 萄 糖 2 0 g，酵 母 膏 5 g，牛 肉 膏 4 g，磷 酸 二 氢 钾 2 g，硫 酸 镁 1 g，维生 素 B 1 5 m g，消 泡 剂 0.3 g，加 水 至 1 0 0 0 m L，P H 6.0 6.5。b）配 方 2：马 铃 薯 1 0 0 g（煮 汁），葡 萄 糖 1 0 g，麦 麸 4 0 g（煮 汁），蛋 白 胨 2 g，磷 酸 二 氢 钾 2 g，硫 酸 镁 1 g，消 泡 剂 0.3 g，加 水 至 1 0 0 0 m L，p H 6.0 6.5。c）配 方 3：玉 米 粉 2 0 g，麦 麸 2 0 g（煮 汁），葡 萄 糖 2 0 g，蛋 白 胨 5 g，磷 酸 二 氢 钾 2 g，硫 酸 镁 1 g，消 泡 剂 0.3 g，加 水 至 1 0 0 0 m L，p H 6.0 6.5。玉 米 粉 应 过 2 0 目 筛。6.3.2.3 投 料 和 定 容用 水 把 淀 粉、玉 米 粉 等 原 料 搅 拌 均 匀，不 能 有 结 块，通 过 吸 管 或 漏 斗 加 入 罐 体，装 液 量 为 罐 体 容 量的 7 0%8 0%，加 入 0.0 3%消 泡 剂，通 入 空 气 搅 拌 1 m i n 2 m i n，混 合 均 匀，拧 紧 上 料 口 盖。6.3.2.4 灭 菌发 酵 罐 加 热 层 通 入 冷 水，水 位 低 于 排 水 口 2 0 c m，关 闭 进、排 水 阀 门 加 热。待 加 热 层 蒸 汽 压 力 达 到0.0 5 M P a 时，缓 慢 打 开 排 气 阀 降 压 至 0 M P a，关 闭 排 气 阀，再 次 升 压 至 0.1 1 M P a，待 发 罐 培 养 层 蒸 汽 压力 达 到 0.0 5 M P a 时，缓 慢 打 开 排 气 阀 降 压 至 0 M P a，关 闭 排 气 阀，再 次 升 压 至 0.1 1 M P a，同 时 打 开 空 气过 滤 器 灭 菌，微 开 排 气 阀，维 持 5 0 m i n 6 0 m i n。6.3.2.5 冷 却灭 菌 结 束，关 闭 空 气 过 滤 器 灭 菌 阀 与 排 气 阀，缓 慢 打 开 空 气 过 滤 器 排 水 阀 降 压 至 0 M P a，加 热 层 通入 冷 水 降 温；同 时 缓 慢 打 开 发 酵 罐 培 养 层 排 气 阀 降 压，待 压 力 接 近 0 M P a 时 向 培 养 层 内 通 入 无 菌 空 气，调 整 排 气 阀，维 持 罐 压 0.0 4 M P a 0.0 5 M P a，培 养 液 温 度 降 至 2 5 以 下 时，关 闭 加 热 层 进 水 阀。6.3.2.6 接 种 与 培 养接 入 摇 瓶 菌 种，接 种 量 为 2%4%。将 摇 瓶 接 种 管 和 发 罐 接 种 口 用 7 5%酒 精 消 毒，用 9 5%酒 精 的 火焰 圈 套 在 接 种 口 上，轻 微 打 开 呼 吸 器 阀 门，使 发 酵 罐 压 力 为 0 M P a。点 燃 火 焰 圈，在 火 焰 保 护 下 用 镊 子D B 3 6/T 1 8 6 9 2 0 2 38去 掉 接 种 管 上 的 牛 皮 纸 和 瓶 塞，打 开 接 种 口 阀 门，将 接 种 管 插 入 接 种 口，将 摇 瓶 菌 种 注 入 发 酵 罐。拔 出接 种 管，关 闭 接 种 阀 门，去 掉 火 焰 圈，打 开 空 气 压 缩 机。根 据 菌 丝 生 长 情 况，适 时 调 节 进 气 按 钮，通 入 适 量 无 菌 空 气，同 时 调 节 排 气 阀，维 持 罐 压 0.0 1 M P a 0.0 3 M P a，培 养 温 度 控 制 在 2 3 2 5，培 养 9 d 1 0 d。6.3.3 液 体 菌 种 形 态 要 求液 体 菌 种 形 态 要 求 见 表 3。表 3 香 菇 液 体 菌 种 种 形 态 要 求项目 要求 检验方法菌液色泽 菌丝球或菌丝片段呈白色，菌液呈浅棕色 肉眼观察菌液形态培养液澄清透明，菌丝球、菌丝片段均匀悬浮于液体中，不分层，直径小于 3.5 m m肉眼观察菌液气味有香菇液体培养时特有的香气，无酸、臭等异味，发酵罐排气口气味正常，无明显改变肉眼观察菌丝形态可见香菇菌种液体培养中特有的菌丝形态，菌丝粗壮，分支较少，无杂菌显微镜观察7 贮 存 与 菌 种 生 产 档 案7.1 贮 存固 体 菌 种 在 1 4 下 避 光 保 藏，保 藏 期 不 超 过 5 0 d。液 体 菌 种 生 产 后 应 立 即 使 用，如 不 能 立 即使 用，需 进 行 贮 藏，贮 藏 环 境 温 度 低 于 2 0。发 酵 罐 内 液 体 菌 种，持 续 通 无 菌 空 气，保 持 罐 压 0.0 1 M P a 0.0 3 M P a，可 存 放 2 d。7.2 菌 种 生 产 档 案生 产 档 案 应 载 明 生 产 地 点、时 间、数 量、培 养 基 配 方、培 养 条 件、菌 种 来 源、操 作 人、技 术 负 责 人、检 验 记 录、菌 种 流 向 等 内 容。生 产 档 案 应 当 保 存 至 菌 种 售 出 后 2 年。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _