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ICS 65.020.20 CCS B 05 3301 浙江省杭州市地方标准 DB3301/T 1081 2024 代替DB3301/T 10812018 三叶青种 苗生产 技术 规程 2024-06-30 发布 2024-07-30 实施 杭州市市 场监督 管理局 发 布 DB3301/T 1081 2024 I 前 言 本文件按照GB/T 1.1 2020 标准化 工作导 则 第1 部分：标准 文件的结 构和起草 规则的 规定起草。本文件代替DB3301/T 1081 2018 三叶 青种苗生 产 技术规程，与DB3301/T 1081 2018 相比，除结构调整 和编辑性 改动外，主要技术 变化如下：a)将原规范性 文件“GB 15618 土壤环境 质量标 准”的 引用改为“GB 15618 土壤环 境质量 农用地土壤污染 风险管控 标准（试 行）”（见第 2 章，2018 年版的第2 章）；b)调整了“4.1 产地 环境”的部分 内容，将原文 中的“灌 溉水质应符 合 GB 5084 规 定的二级 标准”改为“灌 溉水质 基本控制 项目限值 应符合 GB 5084 规 定的规定”（见第 2 章，2018 年版 的第2 章）。本文件的某 些内容可 能涉及专 利。本文 件的发布 机构 不承担识别 这些专利 的责任。本文件由杭 州市农业 农村局提 出、归口 并组织实 施。本文件起草 单位：杭 州中泽生 物科技有 限公司、杭州 万向职业技 术学院、浙江省中 医药大学。本文件主要 起草人：陈加红、李梦君、沈晓霞、沈斌 斌、沈宇峰、孙乙铭、郭二彪、钱立军。本文件及其 所代替文 件的历次 版本发布 情况为：2018 年 首次发布 为DB3301/T 1081 2018；本次为 第一次修 订。DB3301/T 1081 2024 1 三叶青种 苗生产 技术规 程 1 范围 本文件规定 了三叶青 种苗生产 的产地选 择及准备、扦 插育苗、组 培育苗、病虫害防 治、出圃、档案管理、模式 图等。本文件适用 于三叶青 种苗生产。2 规范性引用 文件 下列文件中 的内容通 过文中的 规范性引 用而构成 本文 件必不可少 的条款。其中，注日 期的引用 文件，仅该日期对 应的版本 适用于本 文件；不 注日期的 引用 文件，其最 新版本（包括所有 的修改单）适用于 本文件。GB 3095 环 境空气质 量标准 GB 5084 农 田灌溉水 质标准 GB/T 8321（所有部分）农药 合理使用 准则 GB 15618 土壤环境 质量 农 用地土壤 污染风险 管控 标准（试行）NY/T 1276 农药安全 使用规范 总则 3 术语和定义 下列术语和 定义适用 于本文件。三叶青 radix tetrastigme 又名三叶崖 爬藤（学 名：Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg），葡萄科多 年生草质 藤本，块根入药。组培苗 tissue culture seedling 利用侧芽作 为外植体，采用组 织培养技 术生产的 种苗。4 产地选择及 准备 产地环境 产地土壤污 染风险筛 选值应符 合GB 15618 的规定；空 气质量应符 合GB 3095 规定的 二级标准；灌溉水质基本控 制项目限 值应符合GB 5084 的 规定。温室育苗 扦插及组培 苗移植通 常选择在 配备各类 移动苗床 的温 室中进行，如无移动 苗床，地 面需覆盖 园艺地布。遮光率 为50%60%。DB3301/T 1081 2024 2 露地育苗 露地育苗场 地表面应 平整无杂 草，覆 盖园艺地 布，搭 建 荫棚，其 上覆盖遮 光率为50%60%的 遮阳网。5 扦插育苗 扦插基质 以70%园土+20%泥炭+10%草木灰 作扦插基 质，加施 基质 量1.5%2.5%的腐 熟有机肥 或缓释肥 作基肥，充分拌匀，消毒。扦 插前装入50 孔穴盘，压紧。扦插时间 3月上旬6 月中旬，10 月上旬 11月下 旬。插穗选择 在母本株上 选择二年 生健壮枝 条，斜剪 成2节3 节、810 长 的插穗，上部留1 叶。插穗处理 扦插前用甲基托布津（70粉剂）500 倍液浸泡插 穗全 株1h2h，然后用IBA 500/L 浸泡插穗基部1min 后马上 扦插。扦插方法 将插穗斜插 入 穴孔，每穴1株，入土深度 为 枝条的1/3 1/2，插后 压紧，浇 透水。插后管理 5.6.1 浇水 扦插后35d40d 生根出叶 前，每天喷 水（浇水）1次2次，保持基 质潮湿。生 根后减少浇 水次数，增加单次浇 水量。5.6.2 保温保湿 可在穴盘上 方搭建小 拱棚，保 持60%80%的空气 相对 湿度和15 25 温度。5.6.3 施肥 扦插后20d，每隔15d 喷施1次浓 度为0.3%磷酸二 氢钾 肥液，一般 喷施3次4 次。5.6.4 炼苗 扦插后60d80d，视 根系及枝 叶生长情 况，分次 逐步 延长通风时 间、提高 光照强度，最后达 到栽培正常条件。6 组培育苗 组培流程 DB3301/T 1081 2024 3 外 植体选 取 外植体 消毒 外植体 切段 初代培 养 增殖培 养 生根培 养 炼苗 组培苗移 植。外植体的获 得和处理 6.2.1 外植体的选 取 选择无病虫 害、无病 毒侵染的 生长健壮 的当年生 嫩枝。6.2.2 外植体的消 毒 将选采的外 植体嫩枝，用洗涤 剂水刷洗，以自然 水冲 洗干净。在 超净工作 台上，将 外植体嫩 枝先放入75%的乙醇 溶液中浸 泡10s后，用无菌水 洗净，再放 入0.1%HgCl2 或2%次 氯酸钠溶 液中消毒10min 20min后，用无菌 水冲洗3次5次。6.2.3 外植体的切 段 在超净工作台上，用火焰 灭菌的解剖 刀、镊子将 嫩枝 均匀切分成长0.8cm 1.0cm 的小段，每段含1个腋芽，接 种于事先 准备好的 诱导培养 基中，每 瓶5 株 10株。芽朝上插 入培养基 中。初代培养 6.3.1 初代培养基 基本培养基 为MS培养 基。植 物激素 为：0.3 mg/L 0.5mg/L 浓度的苄 氨基腺嘌 呤（6-BA）；0.01mg/L 0.05mg/L 浓 度的萘乙 酸（NAA）。6.3.2 培养条件 培养温度为252。前期暗培 养，待 有芽萌发 后将 光照强度调 至3000lx 5000lx，光照时 间为10 h/d 12h/d，待组培 苗生长满 瓶后再增 殖培养。增殖培养 6.4.1 增殖培养基 基本培养基 为MS培养 基。植物激 素为2.0 mg/L 4.0mg/L 浓度的苄 氨基腺嘌 呤（6-BA）；0.1 mg/L 0.3mg/L 浓度 的萘乙酸（NAA）。6.4.2 培养条件 培养温度为252。光照强度3000lx 5000lx，光 照时间为10 h/d 12h/d。待组培苗 生长至大于2cm 后，将 小苗分切 进行生根 培养。生根培养 6.5.1 生根培养基 基本培养基 为1/2MS 培 养基。植 物激素为0.5mg/L 2.0mg/L 浓度的 吲哚丁酸（IBA）。6.5.2 培养条件 DB3301/T 1081 2024 4 培养温度为252。光照 强度3000 lx 5000lx，光 照时间为10 h/d 12h/d。待组 培苗生长 至大于5cm 后，可 将小苗移 至温室进 行炼苗。炼苗 移植前，将 培养瓶放 置在温室 自然散射 光下，封 口炼 苗3d7d。然后再开 口炼苗3d 7d，开 口炼苗时可在培养 基表面洒 薄薄一层 水，温度 控制在253。组培苗移植 6.7.1 基质 以60%泥炭土+40%珍珠 岩作移栽 基质，要 求疏松 透气 且有一定肥 力。调节pH 值至5.5 6.0。6.7.2 移栽 炼苗完成后，加水将 培养基打 散倒出，再将小苗 清洗 干净后，栽 植于穴盘 中。移植后的管 理 6.8.1 水分管理 移栽时浇足 水，以后 每2d 3d 淋水一次。2周3 周后，相对湿度 控制在80%90%，当第一片 新叶完全张开后，降低湿度 至60%70%。6.8.2 光照和温度 管理 移栽后，光 照强度控 制在2000lx 3000lx。整个 育苗 期，温度宜 控制在15 30 之间。6.8.3 施肥 移栽后第4周 8周，每周 喷施1 次浓度为0.3%磷 酸二 氢钾肥液。7 病虫害防治 三叶青苗期 病虫害较 少，可通 过降低湿 度、加强 通风、保持生产 环境清洁 等方法防 治病害；可采用杀虫灯、沾 虫板、防虫网减 轻虫害。如有必 要也可 采取 药剂防治，使用农 药应符合NY/T 1276 和GB/T 8321（所有部分）的规定。8 出圃 组培苗移栽培育80d100d，扦插苗 完成炼苗后，新 根5条以上，平 均根长超过3，新叶3 片5片以上，植株 生长健壮、无病虫 害、叶色 翠绿即可 出圃。9 档案管理 生产单位应 完整保存 真实的产 地环境质 量资料、管理 和销售记录。管理和销售 记录包括 投入物品 品种、来源、数量、购 买时间和地 点、使 用方法、使用 时间、生产管理操作时间 与方法、操作人员、种苗出 圃时间及 销售 情况等。DB3301/T 1081 2024 5 10 模式图 三叶青种苗 生产技术 规程模式 图参见附 录A、附 录B。DB3301/T 1081 2024 6 附录A（资料性）三叶青种苗 生产技术 模式图（扦插育苗）三叶青种苗 生产技术 模式图（扦插育苗）见图A.1。图 A.1 三叶 青种苗生 产技术模 式图（扦 插育苗）DB3301/T 1081 2024 7 A A 附录B（资料性）三叶青种苗 生产技术 模式图（组培育苗）三叶青种苗 生产技术 模式图（组培育苗）见图B.1。图 B.2 三叶 青种苗生 产技术模 式图（组 培育苗）
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