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I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 1 621辽 宁 省 地 方 标 准D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 4番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 监 测 技 术 规 范G u i d e l i n e s f o r q u a r a n t i n e s u r v e i l l a n c e o fT o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s2 0 2 4-0 7-3 0 发 布 2 0 2 4-0 8-3 0 实 施辽 宁 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 4I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定起 草。请 注 意 本 文 件 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 辽 宁 省 农 业 农 村 厅 提 出 并 归 口。本 文 件 起 草 单 位：辽 宁 省 农 业 发 展 服 务 中 心、沈 阳 农 业 大 学 植 物 保 护 学 院、葫 芦 岛 市 现 代 农 业 发 展服 务 中 心、盖 州 市 农 业 技 术 推 广 中 心、盘 锦 市 现 代 农 业 发 展 中 心、喀 左 县 农 业 发 展 服 务 中 心。本 文 件 主 要 起 草 人：蔡 明、江 冬、王 昭、孟 威、宋 国 柱、吴 元 华、鲁 旭 鹏、王 宇 颖、金 伟、李 萍、徐 清 云、吕 广 辉。本 文 件 发 布 实 施 后，任 何 单 位 和 个 人 如 有 问 题 和 意 见 建 议，均 可 以 通 过 来 电 和 来 函 等 方 式 进 行 反 馈，我 们 将 及 时 答 复 并 认 真 处 理，根 据 实 际 情 况 依 法 进 行 评 估 及 复 审。归 口 管 理 部 门 通 讯 地 址：辽 宁 省 农 业 农 村 厅（沈 阳 市 和 平 区 太 原 北 街 2 号），联 系 电 话：0 2 4-2 3 4 4 7 8 6 2。文 件 起 草 单 位 通 讯 地 址:辽 宁 省 绿 色 农 业 技 术 中 心(沈 阳 市 于 洪 区 长 江 北 街 3 9 号),联 系 电 话:0 2 4-8 6 8 0 7 6 9 7。D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 41番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 监 测 技 术 规 范1 范 围本 文 件 规 定 了 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒（T o m a t o b r o w n r u g o s e f r u i t v i r u s，T o B R F V）的 监 测 依 据、监 测 工 具、疫 情 监 测、诊 断 与 鉴 定、监 测 报 告、标 本 保 存 与 处 理 等 技 术 内 容。本 文 件 适 用 于 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 的 监 测。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用 文 件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本文 件。S N/T 2 9 6 4 植 物 病 毒 检 测 规 范3 术 语 和 定 义本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义。4 监 测 依 据番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒，属 烟 草 花 叶 病 毒 属，病 毒 粒 子 呈 杆 状，宽 约 1 8 n m，长 约 3 0 0 n m。病 毒 通 常在 种 子 中 存 活 数 年，种 子 萌 芽 时 侵 染 幼 苗 嫩 叶 和 顶 芽，逐 渐 扩 展 至 茎 杆、果 实 系 统 感 染 植 株；也 能 随 种子 和 机 械 摩 擦、嫁 接、搭 架 绑 蔓、修 枝 打 杈 等 农 事 操 作 在 田 间 快 速 扩 散。该 病 毒 可 引 起 番 茄 植 株 花 叶，花 梗、花 萼 和 叶 柄 出 现 褐 变 坏 死 条 斑,果 实 出 现 黄 色 斑 点、变 褐、表 面 皱 缩、有 斑 纹、果 实 减 少。其 发生 规 律、传 播 途 径 和 典 型 症 状 等 是 该 病 毒 监 测 的 重 要 依 据。5 监 测 工 具剪 刀、铲 子、手 套、取 样 袋 等。6 疫 情 监 测监 测 准 备收 集 当 地 番 茄、辣 椒 等 茄 科 植 物 的 种 植 情 况，番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 发 生 情 况 等 相 关 资 料；制 定 简 便易 行 的 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 监 测 计 划。监 测 作 物监 测 作 物 包 括 番 茄、辣 椒、茄 子、烟 草 等 茄 科 植 物。D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 42监 测 区 域6.3.1 未 发 生 区重 点 监 测 从 疫 情 发 生 区 调 入 茄 科 种 苗 及 产 品 的 地 区，境 外 茄 科 引 种 种 植 区，茄 科 科 种 苗 繁 育 基 地、出 口 茄 科 种 子 生 产 基 地 及 周 边 等 疫 情 发 生 高 风 险 区 域。主 要 监 测 是 否 传 入 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒。6.3.2 发 生 区重 点 监 测 发 生 疫 情 的 代 表 性 地 块 和 边 缘 区。主 要 监 测 多 年 种 植 寄 主 植 物 并 有 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 发生 历 史 的 地 块 和 疫 苗 来 源 的 育 苗 基 地。监 测 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 的 发 生 动 态 和 扩 散 趋 势。监 测 时 期在 茄 科 作 物 苗 期、开 花 坐 果 期 和 结 果 期 等 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 显 症 期 分 别 进 行 2 次 3 次 调 查，各 地可 根 据 当 地 的 气 候 和 茄 科 的 生 育 期 确 定 具 体 的 调 查 时 间，重 点 开 展 结 果 期 监 测。监 测 方 法6.5.1 未 发 生 区6.5.1.1 访 问 调 查向 菜 农、农 资 经 销 商、农 技 人 员 等 相 关 人 员 询 问 有 关 茄 科 作 物 果 实 变 褐 皱 缩 和 花 叶 情 况，初 步 了 解疫 情 可 能 发 生 地 点、时 间、危 害 情 况。对 询 问 过 程 中 发 现 的 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 可 疑 发 生 地 区，进 行 深入 重 点 调 查。6.5.1.2 田 间 踏 查对 访 问 调 查 过 程 中 发 现 的 可 疑 发 生 区 和 其 他 高 风 险 茄 科 作 物 种 植 区，在 生 长 期 进 行 2 次 3 次 踏 查，观 察 田 间 有 无 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 发 病 症 状(见 附 录 A)。调 查 面 积 应 占 可 疑 发 生 区 和 其 他 高 风 险 茄 科 作物 种 植 区 种 植 面 积 的 2 0%3 0%。6.5.1.3 定 点 调 查在 访 问 调 查 和 踏 查 过 程 中，发 现 可 疑 疫 情 需 进 行 定 点 调 查。采 用 5 点 取 样 法，每 点 随 机 调 查 1 0 株，统 计 发 病 株 率 与 病 果 率。6.5.2 发 生 区6.5.2.1 发 生 区 范 围 监 测采 取 访 问 调 查 和 踏 查 方 法（具 体 方 法 见 6.5.1.1 和 6.5.1.2），监 测 发 生 区 的 范 围 变 化。6.5.2.2 发 生 区 发 生 动 态 监 测采 取 定 点 调 查 法（具 体 方 法 见 6.5.1.3），每 县（市、区）选 1 0 个 调 查 点，每 7 d 调 查 1 次，整 个 生 育期 调 查 4 次。7 诊 断 与 鉴 定D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 43田 间 现 场 诊 断主 要 检 查 叶 片、花 梗、花 萼、叶 柄 和 果 实，观 察 是 否 出 现 病 毒 危 害 症 状。叶 片 和 果 实 发 病 且 符 合 典型 症 状 的 可 直 接 判 定。室 内 鉴 定7.2.1 采 样经 现 场 诊 断，不 能 确 定 为 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 的，用 剪 刀 剪 取 具 有 典 型 症 状 的 叶 片、果 实 或 用 铲 子挖 取 疑 似 症 状 植 株 等 植 物 样 本 放 入 采 样 袋，袋 内 应 附 有 标 签，带 回 实 验 室 进 行 检 测。标 签 应 记 录 好 采 集时 间、地 点、采 集 人、发 病 症 状 及 发 病 面 积 等 必 要 信 息7.2.2 方 法采 用 R T-P C R 法。鉴 定 步 骤 应 按 照 S N/T 2 9 6 4 的 规 定 执 行。8 监 测 报 告详 细 记 录 监 测 结 果，记 载 调 查 地 点、时 间、寄 主 植 物 名 称、发 生 面 积、危 害 程 度 等（见 附 录 B）。并将 原 始 记 录 表 连 同 照 片、影 像 等 其 它 资 料 整 理 汇 总 形 成 监 测 报 告，由 县 级 植 物 检 疫 机 构 按 要 求 逐 级 报 送。9 标 本 保 存 与 处 理监 测 过 程 中 使 用 的 有 关 材 料 和 用 具，在 使 用 完 毕 后 须 进 行 消 毒 和 除 害 处 理。经 检 疫 鉴 定 后 的 种 子 样品 应 保 存 在 4 冰 箱 内，叶 片 和 果 实 样 品 应 保 存 在-2 0 以 下 或 冻 干 保 存 3 个 月 备 查，保 存 期 满 后，进 行灭 活 处 理。D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 44A A附 录 A（资 料 性）番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 典 型 症 状A.1 番 茄 染 病 症 状染 病 后，嫩 叶 和 顶 芽 上 出 现 花 叶 症 状，叶 脉 黄 化、叶 片 变 窄，严 重 时 花 梗、花 萼 和 叶 柄 出 现 褐 变 坏死 条 斑。在 番 茄 生 长 后 期，会 导 致 果 实 颜 色 变 浅，变 绿 或 者 出 现 黄 色 斑 点，严 重 时 造 成 番 茄 果 实 变 褐，表 面 皱 缩，有 斑 纹。花 和 果 实 数 量 减 少（见 图 A.1）图 A.1 番 茄 上 褐 色 皱 纹 果 病 毒 引 起 的 症 状A.2 辣 椒 染 病 症 状染 病 后，植 株 发 育 迟 缓，叶 片 变 形、变 黄、有 斑 点，果 实 症 状 为 果 实 变 形、出 现 黄、棕 或 绿 色 条 纹（见 图 A.2）。图 A.2 辣 椒 上 褐 色 皱 纹 果 病 毒 引 起 的 症 状D B 2 1/T 3 9 9 4 2 0 2 45B B附 录 B 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 调 查 监 测 记 录 表番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 监 测 结 果 填 入 表 B.1。表 B.1 番 茄 褐 色 皱 纹 果 病 毒 调 查 监 测 记 录 表调 查 地 点：县 乡(镇)村 调 查 时 间:调 查 单 位：调 查 人：作 物 名 称：生 育 期：栽 培 方 式：种 植 面 积(6 6 7 m2):调 查 面 积(6 6 7 m2)：种 苗 来 源：疑 似 症 状/危 害 状：田间调查调 查 点 数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0调 查 面 积(6 6 7 m2)发 生 面 积(6 6 7 m2)调 查 株 数发 病 株 数病 株 率(%)病 果 率(%)备 注：
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