长白山林蛙油的测定 薄层色谱法DB22／T 2625-2017.pdf

ICS 67.050 X 04 备案号：56326-2017 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 26252017 长白山林蛙油的测定 薄层色谱法 Determination of Ranae Oviductus from Changbai mountain Thin layer chromatography method 2017-06-12发布 2017-08-12实施吉林省质量技术监督局 发布 DB22/T 26252017 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2015给出的规则起草。本标准由吉林省林业厅提出并归口。本标准起草单位：吉林大学、吉林省林蛙产业商会。本标准主要起草人：王永生、伊常青、徐阳、孔德娟、陈冰、王艳伟、杨怀雷。DB22/T 26252017 1 长白山林蛙油的测定 薄层色谱法 1 范围 本标准规定了用薄层色谱对林蛙油进行测定的方法。本标准适用于吉林长白山林蛙油的测定。2 原理 胆甾-5-烯-3,7-二醇对照品在105条件下与10%硫酸乙醇反应显蓝色。3 试剂或材料 除特别说明外所有试剂均为分析纯。3.1 二氯甲烷。3.2 石油醚（沸程 60 90）。3.3 乙酸乙酯。3.4 浓硫酸（98%）。3.5 无水乙醇。3.6 胆甾-5-烯-3,7-二醇对照品。3.7 硅胶 G 薄层板。3.8 定量毛细管（5L，2L）。3.9 滤纸。4 仪器设备 4.1 天平（感量 0.0001 g）。4.2 60 目筛。4.3 容量瓶。4.4 具塞锥形瓶（50 mL）。4.5 粉碎机（功率：550 W，频率：50 Hz60 Hz，转速：no 28000 r/min）。4.6 层析缸。4.7 超声波清洗器。4.8 旋转蒸发仪。4.9 循环水式真空泵。4.10 喷雾瓶。5 样品 DB22/T 26252017 2 林蛙油。6 试验步骤 6.1 取干燥林蛙油适量，粉碎（4.5）后过 60 目筛（4.2）。6.2 取上述粉末 2.0 g（4.1），置于 50 mL 具塞锥形瓶（4.4）中，加二氯甲烷（3.1）20 mL，在水温 30 以下超声提取 20 min（4.7），滤过（3.9），同法提取 2 次，合并滤液，减压浓缩（4.8，4.9），残渣加二氯甲烷（3.1）1 mL 使溶解，作为供试品溶液。6.3 取胆甾-5-烯-3,7-二醇对照品（3.6）0.5 mg（4.1）置于 5 mL 容量瓶中（4.3），加二氯甲烷（3.1）定容至刻度，摇匀，制成每 1 mL 含 0.1 mg 的溶液，作为对照品溶液。6.4 量取乙酸乙酯（3.3）和石油醚（60 90）（3.2）各 20 mL 置于具塞锥形瓶（4.4）中，振摇使其充分混匀，作为展开剂。6.5 取上述展开剂适量加入到层析缸中（4.6），展开剂液面距缸底 5 mm8 mm，保持层析缸密闭，预饱和 30 min。6.6 吸取浓硫酸 5 mL（3.4）加入到 45 mL 无水乙醇（3.5）中即得10%硫酸乙醇溶液，作为显色剂。6.7 在距薄层板（3.7）一端10 mm 处轻划一条基线，距基线 80 mm 处轻划一条上沿线。6.8 取 5 L，2 L 定量毛细管（3.8），吸取供试品溶液 5 L，对照品溶液 2 L，分别点于同一硅胶 G 薄层板上（3.7）。点样时，直径以 2 mm 为宜，同一薄层板可点多个样品，各点间隔不小于 10 mm，待点样斑点干燥后放入预饱和的层析缸（4.6）中进行展开，待展开剂上升至薄层板上沿线时，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液（4.10），在 105 加热（约 20 min）至斑点显色清晰。7 试验结果 薄层层析图谱中，与对照品斑点相应的位置上，供试品显相同颜色的斑点。资料见附录A。8 试验报告 试验报告应包括下列内容：a)本标准的名称和编号；b)样品的详细信息；c)试验条件；d)试验结果；e)在试验过程中观察到的任何异常现象；f)试验日期。DB22/T 26252017 3 A A 附 录 A（资料性附录）长白山林蛙油薄层色谱图 长白山林蛙油薄层色谱图见图A.1。注：1：胆甾-5-烯-3,7-二醇对照品；27：林蛙油供试品 图A.1 长白山林蛙油薄层色谱图 _